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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203990

Resumo

O Parque Nacional Serra da Capivara, Estado de Piauí, Brasil apresenta um extraordinário cenário para o aprofundamento dos estudos da biodiversidade de helmintos. Possui uma fauna de mamíferos diversificada incluindo os marsupiais e tatus que são frequentemente vistos e, ocasionalmente, encontrados atropelados nas rodovias periféricas. Três espécimes de gambás Didelphis albiventris e dois de tatus Dasypus novemcinctus foram encontrados mortos na área do parque e suas vísceras foram doadas pela Fundação Museu do Homem Americano (FUMDHAM) para serem estudados no Instituto Oswaldo Cruz - RJ. Os helmintos coletados do intestino foram fixados em álcool 70% ou formol 4%. Foram clarificados em glicerina para estudos por microscopia de luz e alguns espécimes foram pós-fixados em 1% OsO4 e ferrocianeto de potássio 0,8%, desidratados em série alcoólica, levados ao ponto crítico com CO2, revestidos com ouro e examinados através da microscopia eletrônica de varredura. O DNA genômico dos parasitos foi extraído utilizando QIAamp DNA Mini Kit. Dois pares de primers foram desenhados para reação da cadeia da polimerase e em seguida o material foi sequenciado. As espécies encontradas foram: Aspidodera raillieti e A. subulata parasitos intestinais do gambá-de-orelha-branca e A. binansata, A. vazi e Hadrostrongylus speciosum parasitos do tatu Dasypus novemcinctus. Novos dados ultraestruturais de A. binansata e A. vazi foram obtidos. Sequências do citocromo c-oxidase da subunidade 1 do DNA mitocondrial (mtDNA cox1), da região parcial 16S rDNA (rnnL), nova sequência parcial do gene 18S rDNA (SSU), espaçadores transcritos internos (ITS) 1 e 2 e o gene 5.8S rDNA, além de nova sequência parcial do gene 28S rDNA (LSU) de A. raillieti são apresentados. Os dados genéticos incluem a primeira sequência de SSU e LSU para A. raillieti e primeiro gene LSU para Aspidoderidae. Além disso, foi obtida a primeira sequência de A. vazi do gene parcial 16S rDNA. A análise filogenética da máxima-verossimilhança utilizando o gene LSU rDNA mostrou que Heterakoidea, representado por Aspidoderidae e Heterakidae, compõe um clado com alto suporte estatístico, considerado grupo irmão de Cosmocercoidea representado por Rondonia rondonia e Orientatractis moraveci (Atractidae). Ransomnematoidea, Rhigonematoidea e outros Cosmocercoidea representados por Cosmocercoides pulcher e C. tonkinensis (Cosmocercidae) formam um clado separado com alto suporte estatístico. Cosmocercoidea é considerado um grupo parafilético. Novos dados ultraestruturais, genéticos e de distribuição geográfica são apresentados e discutidos.

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The National Park Serra da Capivara, Piauí state, Brazil, presents an extraordinary scenario for improvement of the studies of helminth biodiversity. The Park has diversity mammals species among them marsupials and armadillos are frequently seen and occasionally found dead by running over on the road. Three specimens of opossum Didelphis albiventris and two of armadillo Dasypus novemcinctus were found dead in the Park and their viscera were donated by Fundação Museu do Homem Americano (FUMDHAM) to be studied in Instituto Oswaldo Cruz. Helminths collected in intestine were fixed in alcohol 70% or formal 4%. Parasites were clarified in glycerin for studies in microscopy of light. Some specimens were post-fixed in 1% OsO4 and potassium ferrocyanide 0.8%, dehydrated in alcoholic series, and conducted to critical point with CO2 coated with gold and visualized through scanning electron microscopy. Genomic DNA of the parasites was extracted using QIAmp DNA Mini Kit, and two set of primers were designed to polymerase chain reaction and amplicons sequenced. The species found were Aspidodera raillieti, and A. subulata from Didelphis albiventris and A. binansata, A. vazi and Hadrostrongylus speciosum from Dasypus novemcinctus from the Serra da Capivara National Park, Piauí State, Brazil were studied herein. New ultrastructural data of A. binansata and A. vazi were obtained. Sequences of cytochrome c-oxidase subunit 1 of mitochondrial DNA (mtDNA cox-1), partial mitochondrial 16S rDNA (rnnL), new sequence of partial 18S rDNA (SSU), internal transcriber spacers (ITS) 1, and 2 and 5.8S rDNA gene, and new sequence of partial 28S rDNA (LSU) gene of A. raillieti are presented. Genetic data includes the first sequence of SSU and LSU for A. raillieti and first LSU gene for Aspidoderidae. Additionally, first sequence of 16S rDNA of A. vazi was obtained. Phylogenetic analysis of maximum-likelihood using LSU gene showed Heterakoidea (represented by Aspidoderidae and Heterakidae) compose clade strongly supported (100%) and considered sister-group of Cosmocercoidea, represented by Rondonia rondonia and Orientatractis moraveci (Atractidae). Ramsonnematoidea, Rhigonematoidea and other Cosmocercoidea represented by Cosmocercoides pulcher and C. tonkinensis (Cosmocercidae) appear in a separeted clade with high statistical support. Cosmocercoidea is considered a paraphyletic group. New ultrastructural, genetic and of geographical distribution are presented and discussed.

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