Estudo químico e biológico de Microplumeria anômala (Müll. Arg.) Makgr. (Apocynaceae) e Buchenavia oxycarpa (Mart.) Eichler (Combretaceae)

RESUMO

Escherichia coli é um dos patógenos responsáveis por doenças veterinárias que causam prejuízos econômicos decorrentes do declínio da saúde de animais de produção e dos animais de companhia, acarretando impacto emocional nos proprietários. Por essa razão, a introdução de novos fármacos antibióticos é imprescindível. A rica biodiversidade brasileira apresenta potencial para descoberta de novos fármacos. A partir de triagem biológica de 1791 extratos vegetais obtidos de mais de 600 espécies, realizada em um modelo de disco difusão em ágar e com quatro cepas de E. coli, foram identificados dois extratos vegetais ativos. O primeiro, oriundo do caule de Microplumeria anomala (Apocynaceae) e denominado EB127, e o segundo, oriundo dos frutos de Buchenavia oxycarpa (Combretaceae) e denominado EB725. EB127 foi estudado em termos de sua composição química, utilizando-se métodos de partição e cromatografias para o fracionamento e métodos espectroscópicos para a identificação das moléculas. As frações enriquecidas e compostos isolados foram testados contra as quatro bactérias, a fim de se identificar os compostos que apresentavam atividade antibacteriana. Foram identificados por meio da ressonância magnética nuclear as moléculas de lupeol, sitosterol, estigmasterol, 3-acetil-11-oxo--amirina, 3-acetil-11-oxo--amirina, 3,7-dihidroxi-colest-5-eno, 3-hidroxi-colest-5-en-7-ona e 3-hidroxi-colest-5,22-dien-7-ona, sendo algumas identificadas na espécie pela primeira vez. E, por meio da cromatografia liquida de alta eficiência de espectrometria de massas, sugerem-se também a presença de ácido dihidrobenzóico hexosídeo; ácido rosmarínico; um dos isômeros ácido 8-epi-loganínico ou ácido loganínico; 8-epi-logânico ou loganino; um dos isómeros do éster secologanosídeo-7-metila ou secologanino; ácido 4-O-feruloilquínico; ácido vanílico glicosilado; ácido procatecuico glicosilado; ácido cafeoilquinico; ácido metil dicafeoilquinico e cafeoil hexosídeo encontrados na fração 10%ACN da fase de partição H2O, obtida do extrato orgânico e que apresentou atividade antibacteriana significativa ante a bactéria E. coli resistente a antibióticos. EB725 também foi fracionado e testado contra as mesmas bactérias, aplicando-se a mesma metodologia. Para esse extrato, a atividade antibacteriana mais significativa foi verificada nas frações DCM da fase de partição CHCl3, 10%ACN da fase de partição BuOH e 10%ACN da fase de partição H2O. Em termos efetivos, as frações e compostos que apresentaram atividade contra a bactéria de E. coli resistente foram considerados os mais interessantes, e os compostos identificados nessas frações.

ABSTRACT

Escherichia coli is on of the pathogens responsible for veterinary diseases, which cause economic losses arising from the decline in the health of farm animals and pets, causing emotional impact on owners. The rich biodiversity brazilian presents potential for drug discovery. From 1791 biological screening plant extract obtained from more than 600 species, held in a disk agar diffusion model and with four strains of e. coli, were identified two active plant extracts. The first, from stem of Microplumeria anomala (Apocynaceae) and name EB127, and the scond of Buchenavia oxycarpa (Combretaceae) and named EB725. EB127 has been studied in terms of their chemical composition, using methods of partition and chromatograms for the fractionsenriched and spectroscopic methods for the identification of molecules. The fractionsenriched and isolated compounds were tested against the four bacteria in order to identify the compounds with antibacterial activity. Were identified by nuclear magnect resonance of molecules lupeol, sitosterol, stigmasterol, 3-acetyl-11-oxo--amyrin, 3-acetyl-11-oxo--amyrin, 3 -7 -dihydroxy-5-ene colest, -hydroxy 3-colest-5-en-7-one and -hydroxy 3-colest-5.22-dien-7-ona, with some identified in species for the first time. And by high efficiency liquid chromatography mass spectrometry also suggested the presence of dihidrobenzóico acid hexosídeo; rosmarinic acid; one of the isomers 8-epi-loganínico acid or loganínico acid; 8-epi-logânico or loganino; one of the secologanosídeo ester isomers-7-methy ou secologanino; 4-O-feruloilquinico acid; vanilic acid glicosilado; procatecuico acid glicosilado; cafeoilquinico acid; methyl dicafeoilquinico and cafeoil hexosídeio acid found in 10%ACN fraction parttion phase H2O, obtained from organic extratct and that showed significant antibacterial activity in front of the e. coli bacteria resistant to antibiotics. EB725 was also split and tested against the same bacteria, applying the same methodonlogy. For this extract significant antibacterial activity was detected in the farctions DCM partition phase CHCl3, 10%ACN partition phase BuOH and 10%ACN partitionphase H2O. In effective terms, the fractions and compouds showed activity against bacteria of resistant e. coli were found to be most interesting, and the compounds identified in these fractions.