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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-204658

Resumo

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de insulina, sozinha ou associada a concentrações fixa ou crescentes de FSH no cultivo in vitro de folículos pré-antrais caprinos isolados. Folículos secundários foram cultivados individualmente durante 18 dias em meio de base contendo 50 ng/mL de GH suplementado com insulina em baixa concentração (INS-LW: 10 ng/mL) ou alta concentração (INS-HG: 10 g/mL) sozinha ou associada ao FSH em concentrações fixa (FSH100: 100 ng/mL) ou crescentes (FSH-SEQ: 100 ng/mL, dias 0 ao 6; 500 ng/mL, dias 6 ao 12; 1000 ng/mL, dias 12 ao 18 ). Após o cultivo, os seguintes pontos foram avaliados: morfologia e taxas de crescimento folicular, formação de antro, produção de estradiol (E2), expressão do mRNA para os genes para FSHR, GHR, INSR, CYP19A1, CYP17, 3ßHSD, bem como as taxas de viabilidade e de maturação oocitária. O tratamento INS-LW mostrou uma taxa mais elevada (P < 0,05) de folículos normais no dia 18 de cultivo. No entanto, aumento global (P < 0,05) no crescimento folicular, diâmetro oocitário e taxa de retomada da meiose foram obtidos utilizando INS-HG+FSH100. Os tratamentos INS-HG e INS-HG+FSH100 apresentaram maiores níveis de produção de estradiol e dos níveis de mRNA para CYP19A1, CYP17, 3ßHSD quando comparado aos tratamentos INS-LW e INS-LW+FSH100. Em conclusão, na presença de GH, o meio básico suplementado com 10 g/mL de insulina e 100 ng/mL de FSH durante todo o período de cultivo, melhorou o crescimento folicular e oocitário, a retomada da meiose oocitária e a produção de E2 a partir de foliculos pré-antrais caprinos isolados cultivados in vitro.

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The aim of this study was to evaluate the effect of different insulin concentrations, alone or associated with either a fixed FSH concentration or increasing FSH concentrations on in vitro culture of isolated goat preantral follicles. Secondary follicles were individually cultured for 18 days in a basic medium containing 50 ng/mL GH supplemented with low insulin concentration (INS-LW: 10 ng/mL) or high insulin concentration (INS-HG: 10 g/mL) alone or with a fixed FSH concentration (FSH100: 100 ng/mL) or with increasing FSH concentrations (FSH-SEQ: 100 ng/mL, days 0 to 6; 500 ng/mL, days 6 to 12; 1000 ng/mL days 12 to 18). After culture the following end points were evaluated: follicle morphology and growth rates, antrum formation, , estradiol (E2) production, gene expression for FSHR, GHR, INSR, CYP19A1, CYP17, 3ßHSD as well as oocyte viability and maturation. INS-LW treatment showed a higher (P < 0.05) incidence of normal follicles at day 18 of culture. However, overall higher (P < 0.05) follicular growth, oocyte diameter and meiotic resumption rates were obtained using INS-HG + FSH 100. INS-HG and INS-HG+FSH100 showed higher E2 production and mRNA levels for CYP19A1, CYP17, 3ßHSD when compared to INS-LW and INS-LW+FSH100. In conclusion, in presence of GH, a basic medium supplemented with 10 g/mL insulin and 100 g/mL FSH throughout the culture period, improved follicular and oocyte growth, oocyte meiotic resumption and E2 production from isolated preantral caprine follicles cultured in vitro.

Biblioteca responsável: BR68.1