EXPRESSÃO COMPARATIVA DE GENES RELACIONADOS AO ESTRESSE CELULAR E DESENVOLVIMENTO OOCITÁRIO EM CABRAS ALIMENTADAS COM DIFERENTES CONCENTRAÇÕES DE LIPÍDIOS

RESUMO

O presente estudo foi realizado para investigar o efeito lipotóxico da dieta com níveis crescentes de lipídios na expressão de gênica em células da granulosa e oócitos caprinos. Foram utilizadas trinta cabras, agrupadas em três diferentes dietas (n = 10) recebendo durante 28 dias forragem e concentrado contendo, respectivamente, 2,7% (grupo LL), 3,9% (grupo LI) e 5,1% de lipídios (grupo LH). Três dias antes da colheita de oócitos, a onda folicular foi sincronizada utilizando 1 mL PGF2 intramuscular, seguido de utilização de um dispositivo intravaginal de progesterona. Oócitos viáveis e as células da granulosa foram submetidos à qRT-PCR para determinar a expressão dos genes PLIN2, ATF4, CHOP10, BAX, BCL2, e HSP70. Durante todo o período experimental, amostras de sangue foram coletadas para análise de colesterol, triglicérideos e lipídios totais. No grupo LH obteve-se um aumento mais acentuado do total de lípidos (+ 60,1%) (P <0,05), colesterol (+ 18,8%) e triglicérideos (+ 8,5%). Este aumento foi três vezesmaior que nos grupos LI e LL. Todos os genes foram expressos em oócitos e células da granulosa. Quanto ao efeito da dieta na expressão de PLIN2, esta foi superior no grupo LI para oócito (P <0,05) e células da granulosa. Embora nenhuma diferença (P> 0,05) tenha sido encontrada entre as dietas, o índice apoptótico (BAX \ BCL2), no tratamento LH foi maior e atingiu valores duas vezes superiores nos grupos LI (5,8 vs. 2,3) e LL (5,8 vs. 3,4) respectivamente. Concluímos que o intervalo de lipídios usados nas dietas não foi suficiente para induzir alterações significativas nos genes sinalizadores de estresse da estrutura oocitária e das respectivas células da granulosa.

ABSTRACT

The present study was conducted to investigate the lipotoxicity effect of diet with increase fat levels on gene expression in goats oocyte and granulosa cells. Thirty doeswere grouped in three diets (n=10) that for 28 days received forage and concentrate toprovide respectively 2.7% (LL group), 3.9% (LI group) and 5.1% lipids(LH group). Three days before the oocyte harvest, follicular wave was synchronized 1mL PGF2 intramuscularly followed by insertion of an intravaginal progesterone drug release. Viable oocytes and granulosa cells were submitted to qRT-PCR for determinethe expression of PLIN2, ATF4, CHOP10, BAX, BCL2, HSP70 genes. Throughout the experimental period, blood samples were taken for cholesterol, triglycerides and totallipids analysis. In LH group was recorded a more pronounced increase of total lipids (+60.1%) (P < 0.05), Cholesterol (+ 18.8%) and triglycerides (+ 8.5%). These augmentwere thrice higher that LL e LI groups. All genes were expressed in oocyte andgranulosa cells. Effect of diet was observed only in PLIN2 gene, when expression was superior in LI group for oocyte (P < 0.05) and granulosa cells. Although no difference (P > 0.05) were recorded in comparison between diets, the apoptotic index(BAX\BCL2), in LH treatment was higher and achieve values twice superior to LI (5.8 vs. 2.3) e LL (5.8 vs. 3.4) groups respectively. We conclude that the lipid interval used in the diets was not enough to induce significant changes of genes stress oocytestructure and its granulosa cells.