DESENVOVIMENTO E OTIMIZAÇÃO DE MÉTODO POR CLAE - EM/EM PARA DETERMINAÇÃO DE RESÍDUOS EM PESCADO

RESUMO

Este trabalho teve como objetivo avaliar a ocorrência de resíduos de antimicrobianos da classe dos anfenicóis em filé de tilápia do Nilo e de truta arco-íris , provenientes de frigoríficos localizados em Minas Gerais, por cromatografia líquida (CL) acoplada à espectrometria de massas (EM). O método CLAE desenvolvido utilizou coluna Aqua C18 (50 x 2,0 mm, 5 um),e fase móveis (A) água + 0,1% de ácido fórmico e (B) metanol + 0,1% de ácido fórmico com um fluxo de 0,4 mL/min e um gradiente de eluição.O espectrômetro de massa operou por ionização electrospray, modo de ionização negativa e as amostras foram analisadas por monitoramento de reações múltiplas. O método forneceu boa resolução entre os picos de tianfenicol, florfenicol e cloranfenicol com 3,9; 5,1 e 6,5 minutos de tempo de retenção, respectivamente. O método de extração otimizado consistiu em única etapa de extração liquido-liquido com recuperações apropriadas. O método atendeu aos parâmetros de validação (EC657/2002), fornecendo valores de CC de 0,019; 54,81 e 54,933 g/kg para cloranfenicol, florfenicol e tianfenicol, respectivamente. Dentre as 117 amostras analisadas, 12 apresentaram resíduos de cloranfenicol em concentração de 0,02 a 0,49 g/kg, das quais três estavam acima do limite mínimo de desempenho requerido (LMDR) estabelecido para o cloranfenicol (0,30 g/kg), com concentrações de 0,37; 0,42 e 0,49 g/kg. Resíduos de tianfenicol foram encontrados em duas das 117 amostras, em concentrações abaixo do limite máximo de resíduo (LMR). O florfenicol foi detectado em todas as amostras, com teores abaixo do LMR. A presença de resíduos de cloranfenicol em alimentos representa um risco à saúde dos consumidores. Apesar dos teores de tianfenicol e florfenicol encontrados estarem dentro dos padrões aceitáveis deve haver constante vigilância no uso desses e de pescados pelas consequências na saúde pública.

ABSTRACT

This study aimed to evaluate the occurrence of antimicrobial residues of the anfenicóis class in the Nile tilapia fillet and rainbow trout, from refrigerators located in Minas Gerais, for liquid chromatography (LC) coupled with mass spectrometry (MS). The HPLC method developed used Aqua C18 column (50 x 2.0 mm, 5 um), and mobile phase (A) water + 0.1% formic acid and (B) methanol + 0.1% formic acid with a flow 0.4 mL / min and a gradient of eluição.O mass spectrometer operated by electrospray ionization, negative ionization mode and the samples were analyzed by multiple reaction monitoring. The method provided good resolution between peaks thiamphenicol, florfenicol and chloramphenicol with 3.9; 5.1 and 6.5 minutes retention time, respectively. The optimal extraction method consisted of only liquid-liquid extraction step with appropriate recovery. The method met the validation parameters (EC657 / 2002), providing CC values of 0.019; 54.81 and 54.933 mg / kg to chloramphenicol, florfenicol and thiamphenicol, respectively. Among the 117 samples analyzed, 12 showed chloramphenicol residues in concentration from 0.02 to 0.49 mg / kg, three of which were above the minimum required performance limit (MRPL) set for chloramphenicol (0.30 mg / kg ), with concentrations of 0.37; 0.42 and 0.49 ug / kg. Thiamphenicol residues were found in two of 117 samples at concentrations below the maximum residue limit (MRL). Florfenicol was detected in all samples, with levels below the MRL. The presence of chloramphenicol residues in food poses a risk to consumer health. Despite thiamphenicol and florfenicol levels found are within acceptable standards must be constant vigilance in the use of these and other antibiotics in fish production for the consequences on public health.