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EFEITOS DA DUPLA TRANSGENIA PARA O EIXO SOMATOTRÓFICO SOBRE O CRESCIMENTO E REPRODUÇÃO DO ZEBRAFISH (Danio rerio)

ANA CECILIA GOMES SILVA.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-205183

Resumo

A aquicultura está assumindo um papel importante no atendimento da crescente demanda por pescado em nível mundial. Atualmente, existe uma interação benéfica entre a aquicultura e a biotecnologia que favorece a otimização da produção através da aplicação de ferramentas biotecnológicas. A transgênese é uma das ferramentas mais promissoras, onde o hormônio do crescimento (GH) tem sido o alvo mais importante na busca de linhagens de peixes geneticamente melhorados. Entretanto, está estabelecido que o excesso de GH ocasiona uma série de efeitos adversos devido à sua ação pleiotrópica. Neste sentido, o objetivo desta tese foi avaliar o efeito da dupla transgenia para o eixo somatotrófico sobre o crescimento e a reprodução do zebrafish (Danio rerio). Desta forma, o primeiro trabalho relata a produção de um duplo-transgênico (GH/GHR) através do cruzamento da linhagem F0104 (que superexpressa GH) com a linhagem Myo-GHR (que superexpressa o gene do receptor do hormônio do crescimento de maneira músculo-específica). No segundo estudo foi avaliado o efeito da dupla transgenia sobre o crescimento e estrutura muscular esquelética. O duplotransgênico apresentou um crescimento comparável ao da linhagem F0104, embora com fator de condição mais baixo. Adicionalmente, houve diminuição na expressão de um gene relacionado com a sinalização intracelular em paralelo com uma forte diminuição na quantidade de fibras musculares grossas. O terceiro trabalho teve como objetivo avaliar os parâmetros reprodutivos de machos de zebrafish duplo-transgênicos. Os resultados mostraram uma melhora significativa em quase todos os parâmetros analisados, evidenciando uma redução dos efeitos negativos do GH sobre a função reprodutiva. Em conclusão, fica claro que o duplo-transgênico é um modelo de estudo interessante que pode gerar novos conhecimentos sobre os efeitos do GH em vários aspectos biológicos e fisiológicos. É necessário observar que a utilização deste hormônio deve respeitar os níveis máximos suportados pelo organismo a ser manipulado de forma que a transgenia do GH possa ser viável como ferramenta biotecnológica na aquicultura.
is assuming an important role in meeting the growing demand for seafood worldwide. Currently there is a beneficial interaction between aquaculture and biotechnology, allowing production to be optimized through the application of biotechnological tools. Transgenesis is one of the most promising tools, where the growth hormone (GH) has been the most important target in the search for genetically improved fish lines. However, it is established that the GH excess causes a series of side effects due to its pleiotropic action. In this sense, the aim of this thesis was to evaluate the effect of double transgenesis for the somatotrophic axis on growth and reproduction of zebrafish (Danio rerio). Thus, the first paper describes the production of a double transgenic (GH/GHR) by crossing the F0104 line (which overexpresses GH) with Myo- GHR line (which overexpresses the growth hormone receptor gene (GHR) in a musclespecific manner). In the second study, we evaluated the effect of double transgenesis on growth and skeletal muscle structure. The double transgenic showed a growth comparable to that of the F0104 line, although with lower condition factor. Additionally, there was a decrease in the expression of a gene related to intracellular signaling in parallel to a strong decrease in the amount of thick muscle fibers. The third study aimed to evaluate the reproductive parameters of double transgenic zebrafish males. The results showed a significant improvement in almost all parameters, showing a reduction of the negative effects of GH on reproductive function. In conclusion, it is clear that the double transgenic is an interesting study model that can generate new knowledge about the effects of GH in several biological and physiological aspects. It should be noted that the use of this hormone should comply with the maximum levels supported by the organism to be manipulated so that GH-transgenesis can be viable as a biotechnological tool in aquaculture.
Biblioteca responsável: BR68.1