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Qualidade de oócitos caprinos após criopreservação em meio alternativo contendo ACP407®

KENNEY DE PAIVA PORFIRIO.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-206178

Resumo

Objetivou-se avaliar a viabilidade de oócitos caprinos submetidos ao processo de criopreservação lenta em meio alternativo contendo ACP-407® após descongelação. Foram coletados 160 ovários, provenientes de 80 cabras púberes oriundas de abatedouros localizados na microrregião homogênea de Teresina. Após o abateos ovários foram imediatamente transportados para o laboratório em garrafa térmica com solução salina fisiológica a 35°C adicionada de 30ug/mL de sulfato de gentamicina. Os oócitos foram aspirados com agulha 21G acoplada a seringa de 5mL, posteriormente o aspirado foi colocado em tubos tipo falconde 15 mL, onde permaneceram durante 15 minutos para que ocorresse a decantação dos Complexos CumulusOócitos (CCOs).O sedimento foi aspirado com o auxílio de uma pipeta de 100L e colocados em placa de petri onde foram avaliados e classificados utilizando estereomicroscópio. Após a classificaçãoos CCOs foram separados em três grupos, Grupo I (Glicerol - Controle), Grupo II (Etilenoglicol) e Grupo III (Etilenoglicol e ACP-407®), e envasados em palhetas francesas de 0,25 mL no qual foramsubmetidos ao processo de criopreservação lenta, em curva de criopreservaçãoespecifica para embriões,em aparelho TK 3000®. Após o período mínimo de 10 dias os oócitos foram descongelados e avaliados através da associação de sondas fluorescentes (iodeto de propídeoediacetato de carboxifluresceina).Foram recuperados 139 CCOs, onde obteve-se uma taxa de recuperação de 1,73CCOs por par de ovários. Em relação a análise de viabilidade com a utilização de sondas fluorescentes o grupo contendo ACP-407® cometilenoglicol apresentou melhores resultados quando comparados ao grupo etilenoglicol ou glicerol, representado uma taxa de viabilidade de 16,6%, 7,4% e 6%, respectivamente. Portanto, a adição de ACP-407® ao crioprotetoretilenoglicolmelhora a viabilidade dos oócitos caprinos pós descongelação.
The aim of this study was to evaluate the viability of goat oocytes submitted to the slow cryopreservation process in an alternative medium containing ACP-407® after thawing. A total of 160 ovaries were collected from 80 pre - pubescent goats from slaughterhouses located in the homogeneous microregion of Teresina. After slaughter the ovaries were immediately transported to the laboratory in a thermos flask with physiological saline solution at 35°C added with 30ug/mL gentamicin sulfate. The oocytes were aspirated with a 21G needle attached to a 5mL syringe, and the aspirate was placed in 15mL falcon tubes, where they remained for 15 minutes for the decantation of Cumulus Oocyte Complexes (COCs). The sediment was aspirated with the aid of a 100L pipette and placed in petri dish where they were evaluated and classified using a magnifying glass. After classification, the COCs were separated into three groups, Group I (Glycerol - Control), Group II (Ethylene Glycol) and Group III (Ethylene Glycol and ACP-407®), and packed in 0.25mL vats in which they were submitted to the slow cryopreservation, in specific curve for embryos In TK 3000® apparatus. After the minimum period of 10 days the oocytes were thawed and evaluated through the association of Fluorescent probes (propionate iodide andcarboxyfluorescein diacetate). 139 COCs were recovered, where a recovery rate of 1.73 COCs per pair of ovaries was obtained. In relation to the feasibility analysis with the use of fluorescent probes the group containing ACP-407®with Ethylene glycol presented better results when compared with the group Ethylene glycol or Glycerol, representing a viability rate of 16.6%, 7.4% and 6%, respectively. Therefore, the addition of ACP-407® to the cryoprotectant ethylene glycol improvement the viability of oocytes goats thawing.
Biblioteca responsável: BR68.1