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DESENVOLVIMENTO E PADRONIZAÇÃO DE UMA PCR MULTIPLEX PARA A DETECÇÃO DE Aeromonas spp. E Streptococcus spp. EM TILÁPIAS DO NILO (Oreochromis niloticus) NOS MUNICÍPIOS DE JATOBÁ E PETROLÂNDIA EM PERNAMBUCO, BRASIL.

FERNANDO JUN HO PEIXOTO KIM.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-206623

Resumo

O cultivo da tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) vem crescendo atualmente no Brasil e em Pernambuco. O sistema de cultivo intensivo associado ao manejo inadequado resulta no aparecimento de doenças oportunistas, principalmente as de origem bacteriana. As bactérias dos gêneros Aeromonas ssp. e Streptococcus ssp. são responsáveis pela maioria das mortalidades nas fazendas de peixe, causando morte por septicemia, além de se disseminar rapidamente nos plantéis. Objetivou-se neste estudo desenvolver um diagnóstico rápido por Reação em Cadeia de Polimerase - PCR para bactérias do gênero Aeromonas e Streptococcus, além de analisar a ocorrência dessas bactérias oriundas de tilapiculturas nos municípios de Jatobá e Petrolândia em Pernambuco. Foi padronizada uma PCR multiplex para o gênero Aeromonas e para a espécie Aeromonas hydrophila, com temperatura ideal de anelamento de 57.6°C e limite de detecção até 10-10 g/L de DNA extraído diretamente das colônias em cultivo microbiológico, utilizando como alvos os genes 16S rRNA e a citotoxina enterotóxica aerolisina (aer). Também foram estudadas a ocorrência de bactérias do gênero Aeromonas e Streptococcus oriundas de tilapiculturas localizadas nos municípios de Jatobá e Petrolândia no sertão de Pernambuco. Todos os 70 peixes coletados e todas as 16 amostras de água apresentaram isolados de Aeromonas spp. e Aeromonas hydrophila com prevalência dos fatores de virulência aerolisina (aer) e enterotoxina citotóxica (act) de 53,6% e 52,9%, respectivamente. Não foram encontrados isolados de Streptococcus ssp. tanto nos peixes como na água das tilapiculturas estudadas. A padronização de técnicas de diagnóstico bem como a ocorrência de aeromoniose em peixes cultivados no sertão de Pernambuco, demonstra a importância de pesquisas nessa área com objetivo de impulsionar a tilapicultura no Estado e otimizar o diagnóstico de doenças bacterianas.
Culture os nile tilapia (Oreochromis niloticus) is currently expanding in Brazil and Pernambuco. Intensive culture systems are associated with inadequate management, which results in the ocorrence of opportunistic bacterial diseases. The bacterial genera Aeromonas ssp. and Streptococcus ssp. are responsible for mortality in fish farms, due to septicemia and rapid spread of infection among animals. The aim of this study was to develop a quick assay for diagnosis by Polimerase Chain Reaction - PCR for Aeromonas ssp. and Streptococcus ssp., to investigate the occurrence of these bacterias from tilapia culture in Jatobá and Petrolândia - PE. It was standardized a mPCR for Aeromonas hydrophila and Aeromonas genus, with annealing temperature 57.6 °C and 10-10 g/L detection limit of DNA extracted directly from colonies in microbiological culture, using as targets the 16S rRNA genes and the virulence gene enterotoxic cytotoxin aerolysin (aer). Were also studied the occurrence of Aeromonas ssp. and Streptococcus ssp. colected from tilapia cultures located on Jatoba and Petrolândia - PE. All 70 collected fish and 16 water samples showed Aeromonas spp.and Aeromonas hydrophila isolates, with prevalence of virulence factors (aer) and cytotoxic enterotoxin (act) of 53.6% and 52.9%, respectively. None Streptococcus ssp.isolates were identify. The diagnostic techniques standardization and the occurrence of Aeromoniosis in fish farmed in Pernambuco demonstrates the importance of research in this area with the objective of boosting tilapicultura in the state and optimize the bacterial diseases diagnosis.
Biblioteca responsável: BR68.1