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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-207434

Resumo

O espermograma assume grande importância na avaliação da aptidão reprodutiva de um macho destinado à reprodução, pois permite a predição da qualidade do reprodutor, visto que ele demonstra sua potentia generandi. A criopreservação de sêmen é uma importante biotécnica reprodutiva, tendo em vista que promove a conservação de germoplasma por tempo indeterminado. Através da criopreservação de sêmen será possível resgatar populações que, por algum motivo, possam ter se extinguido e que tenham importantes características para a pecuária nacional. Dessa forma, o presente trabalho visa analisar o efeito da época do ano sobre as características físicas e morfológicas do sêmen de caprinos localmente adaptados visando à conservação do material genético dessas raças. Foram utilizados 18 reprodutores caprinos adultos, com idade entre 2 e 5 anos, das raças Azul (AZ), Canindé (CD) e Moxotó (MX). Todos os animais foram submetidos a uma avaliação clínica e andrológica preliminar. As coletas de sêmen foram realizadas no turno da manhã, pelo método da vagina artificial, com auxílio de fêmea estrogenizada. Após a coleta, um pool dos ejaculados foram formados para análise, onde uma alíquota de cada amostra foi avaliada quanto aos parâmetros seminais físicos. Outra alíquota foi diluída em solução de formol salino para mensuração da concentração espermática e análise morfológica posterior. O sêmen foi diluído em meio Tris-Gema de acordo com a concentração espermática e congelado em máquina TK 3000 em curva específica para a espécie, e posteriormente armazenado em botijão criogênico a -196ºC. Após a descongelação em banho maria a 37ºC por 30 segundos, foi avaliado a longevidade espermática através do teste de termorresistência (TTR), mensurando a motilidade e vigor espermáticos em 0, 60, 120 e 180 minutos pós-descongelação. O sêmen descongelado foi submetido ao teste de funcionalidade da membrana plasmática pelo HOST. Para análise estrutural dos espermatozoides foram utilizadas sondas fluorescentes, determinando a integridade de membrana plasmática, integridade acrossomal e atividade mitocondrial das células espermáticas. A cinética espermática pós-descongelação foi mensurada pelo sistema computadorizado de análise seminal (CASA). A análise morfológica dos defeitos espermáticos foi feita pela contagem de 200 células em preparação úmida, quantificando-se os defeitos de cabeça, defeitos de peça intermediária, defeitos de cauda, defeitos maiores e defeitos totais. O volume de sêmen das raças AZ e MX (0,52mL; 0,69mL) foram superiores à da raça CD (0,40mL), no entanto as raças CD e MX apresentaram vigor espermático (2,95; 3,04) superior à raça AZ (2,5). Na época chuvosa (EC) ocorreu menor percentagem de defeitos de cabeça (0,5%), também na EC ocorreu maior proporção de defeitos totais (10,2%). No TTR, ocorreu maior porcentagem de motilidade e maior vigor na EC. O grupo AZ apresentou menor motilidade e vigor espermático. Na análise estrutural observou-se maior atividade mitocondrial espermática durante a época seca (ES), sendo as raças CD e MX com maior proporção de células com atividade mitocondrial. Ocorreu maior integridade acrossomal durante a ES e maior funcionalidade de membrana durante a EC. Pela análise computadorizada houve maior percentagem de espermatozoides com motilidade não progressiva (MNP) durante a EC e maior frequência de batimentos de cauda (BCF).

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The spermogram is of great importance in the evaluation of the reproductive capacity of a male intended for breeding, because it allows the prediction of the reproducer quality, since it demonstrates its potentia generandi. Semen cryopreservation is an important reproductive biotechnology because it promotes conservation of germplasm for an indefinite time. Through the semen cryopreservation it will be possible to rescue populations that, for some reason, may have become extinct and which have important characteristics for national livestock. In this way, the present work aims at analyzing the effect of the time of year on the physical and morphological semen characteristics from locally adapted goats aiming at the conservation of these breeds genetic material. Were used eighteen adult goat breeds, aged 2 to 5 years, of the races, Azul (AZ), Canindé (CD) and Moxotó (MX). All animals were submitted to a preliminary clinical and andrological evaluation. The semen collections were performed in the morning shift, using the artificial vagina method, with the aid of estrogenized female. After a collection, a pool of ejaculates were formed for analysis, where an aliquot of each sample was evaluated for the physical seminal parameters. Another aliquot was diluted in saline formaldehyde solution to measure the sperm concentration and subsequent morphological analysis. The semen was diluted in Tris-Egg Yolk medium according to sperm concentration and frozen in TK 3000 machine in a specific curve for the species, and later stored in a cryogenic canister at -196ºC. After thawing in a 37 ° C water bath for 30 seconds, the sperm longevity was evaluated through the thermoresistance test (TTR), measuring sperm motility and vigor at 0, 60, 120 and 180 minutes after thawing, the thawed semen was subjected to the plasma membrane functionality test by HOST. Fluorescent probes were used for structural analysis of spermatozoa determining the integrity of plasma membrane, acrosomal integrity and mitochondrial activity of sperm cells, the post-thaw sperm cells kinetics were measured by computerized system for semen analysis (CASA). The morphological analysis of the spermatic defects was made by counting 200 cells in wet preparation, quantifying head defects, intermediate part defects, tail defects, major defects and total defects. The semen volume of the breeds AZ and MX (0.52mL, 0.69mL) were higher than the CD (0.40mL), however the CD and MX breeds had spermatic vigor (2.95, 3.04) higher than the AZ (2,5). In the rainy season (RS) there was a lower percentage of head defects (0.5%), also in the RS there was a higher proportion of total defects (10.2%). In TTR, there was a higher percentage of motility and higer vigor in the RS. The AZ group presented lower motility and spermatic vigor. In structural analysis showed a higher sperm mitochondrial activity during the dry season (DS), where the CD and MX races with the highest proportion of cells with mitochondrial activity. Higer acrosomal integrity occurred during DS and higer membrane functionality during RS. By computerized analysis there was a higher percentage of spermatozoa with non-progressive motility (NPM) during RS and higer frequency of tail beats (BCF).

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