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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-207701

Resumo

A leptospirose em bovinos determina principalmente falhas reprodutivas, porém o mecanismo envolvido na doença reprodutiva ainda não está elucidado. Apesar de demonstrada a potencial transmissibilidade sexual (macho-fêmea) em bovinos, a presença de leptospiras no ambiente vaginal é pouco estudada. Sendo assim, o presente estudo avaliou por meio de métodos bacteriológicos e moleculares a ocorrência de portadores vaginais e renais de Leptospira sp. entre bovinos abatidos em matadouro frigorífico no estado do Rio de Janeiro. Foram coletadas amostras de urina (cultura e PCR) e fluido vaginal (FV; cultura e PCR) de 275 animais durante o abate. Em um primeiro momento foi feita uma avaliação preliminar de um novo coquetel de antibióticos (STAFF) adicionado ao meio de cultura EMJH para obtenção de cultura pura de leptospiras a partir de amostras clínicas bovinas. Após esta primeira avaliação, excluiu-se os machos (n=21) para os estudos posteriores. Com o uso de EMJH suplementado com o novo coquetel, foram obtidas dez estirpes de Leptospira, onde cinco correspondiam à espécie L. santarosai sorogrupo Sejroe. À análise de sequência do gene secY, estas estirpes mostraram proximidade genética com estirpes Guaricura isoladas no Brasil. Foi observado um percentual de 60,3% de animais com DNA leptospírico em pelo menos uma das amostras. Em 26/254 (11,3%) vacas o DNA foi detectado somente nas amostras de urina e em 67/254 (29,2%), somente no FV. Com os resultados foi possível concluir que a detecção do DNA leptospírico e a recuperação de leptospiras viáveis do fluido vaginal (principalmente os pertencentes ao sorogrupo Sejroe) em um elevado número de vacas assintomáticas ressalta a ocorrência da infecção vaginal por leptospiras entre bovinos. Neste contexto o coquetel de antimicrobianos STAFF se mostrou um avanço na obtenção de culturas puras a partir de amostras clínicas bovinas. Com a obtenção em grande número de novos isolados foi possível observar que outros membros do sorogrupo Sejroe que não Hardjo, particularmente genótipos de L. santarosai sorovar Guaricura, estão difundidos nos rebanhos bovinos brasileiros, mesmo que ainda não se tenha clara a participação destes na leptospirose reprodutiva.

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Bovine leptospirosis determines mainly reproductive failures, however its mechanisms have not been elucidated. Despite evidence of the potential venereal transmissibility (male-female) in cattle, leptospiral presence in vaginal environment is poorly studied. Therefore, the purpose of the present study was to evaluate by bacteriological and molecular methods, the occurrence of vaginal carriers of Leptospira sp. among slaughtered cows in Rio de Janeiro, Brazil. Samples of urine (culture and PCR) and vaginal fluid (VF, culture and PCR) were collected from 275 animals during slaughter. First, a preliminary study was conducted to evaluate a new antibiotic cocktail (STAFF) added to the EMJH medium to obtain pure cultures of leptospires from bovine clinical samples. After this first evaluation, males (n = 21) were excluded for the following studies. Ten Leptospira pure cultures were obtained using EMJH supplemented with the new cocktail, five of them belonging to L. santarosai species from serogroup Sejroe. Analysis of secY gene sequence showed genetic proximity to Guaricura strains isolated in Brazil. On PCR, 60.3% of cows showed leptospiral DNA at least in one sample. From those, 26 (11.3%) cows were PCR positive only in urine samples and 67 (29.2%) only in VF. In conclusion, detection of leptospiral DNA and the recovery of viable leptospires from vaginal fluid (manly those belonging to serogroup Sejroe) in a large number of asymptomatic cows highlights the occurrence of leptospiral vaginal infection in cattle. It was suggested that the venereal transmission (female-male) could occur in these animals. In this context, STAFF antimicrobial cocktail showed to be an advance in obtaining pure cultures from clinical bovine samples. The obtaining of new isolates showed that other members of serogroup Sejroe, particularly Guaricura genotypes from L. santarosai, may be widespread in Brazilian cattle.

Biblioteca responsável: BR68.1