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CARACTERIZAÇÃO DE ANTÍGENOS E IMUNOGENICIDADE DE Porcine circovirus 2 E Mycoplasma hyopneumoniae

MARCUS REBOUCAS SANTOS.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-207746

Resumo

Mycoplasma hyopneuminae e Porcine circovirus 2 (PCV2) são dois dos principais patógenos causadores de doenças em suínos, representando grandes prejuízos a suinocultura mundial. A vacinação é a principal medida de controle de ambas infecções. Considerando as vacinas de nova geração e a importância dos dois patógenos a suinocultura comercial, este trabalho apresenta dois estudos relacionados a importantes proteínas de Mycoplasma hyopneumoniae e do PCV2. No primeiro capítulo, escrito em formato de artigo, foi utilizada a técnica de phage display para seleção e identificação de regiões de epítopos do capsídeo do PCV2. Especificamente, o peptídeo denominando PC12, correspondente a região 164CKPVLDSTIDY-173 da cap-PCV2 foi capaz de estimular a produção de IgG total e IgG1. O peptídeo PC12 foi também capaz de discriminar soros de animais infectados com o PCV2 de soros de animais negativos para esse vírus. No segundo capitulo foram desenhadas três quimeras proteicas (Q1, Q2 e Q3) compostas de domínios potencialmente imunogênicos de proteínas de Mycoplasma hyopneumoniae. As proteínas foram expressas em sistema bacteriano e purificadas através da cauda de histidina. A avaliação da imunogenicidade foi realizada em modelo murino. Os animais inoculados com as quimeras apresentaram IgG e IgG1 contra as proteínas nativas de Mycoplasma hyopneumoniae cepa J. Variados padrões de produção de citocinas foram observados nos esplenócitos dos animais inoculados com as quimeras. Os resultados do presente estudo indicam que as quimeras podem ser utilizadas em futuros ensaios vacinais com suínos por apresentarem promissora capacidade imunogênica. Já os peptídeos de regiões antigênicas do PCV2 podem auxiliar no desenvolvimento de novas estratégias de vacinação e de novas moléculas de diagnósticos.
Mycoplasma hyopneuminae and Porcine circovirus 2 (PCV2) are the major pathogens that causes swine diseases and represents great losses to the pig farming in the world. The main control measure for both infections is vaccination. Considering the new generation vaccines and the importance of these two pathogens to the commercial pig farming, this work showed two studies related to important proteins of Mycoplasma hyopneumoniae and PCV2. In the first chapter the phage display technique was used to selected and identified regions of PCV2 capsid epitope. Specifically, PC12 peptide which correspond to region 164-CKPVLDSTIDY173 from PCV2 capsid that was capable of stimulate IgG total and IgG1 production. Also, PC12 peptide was capable to discriminate sera of animals infected with PCV2 from sera of animals negative to PCV2. In the second chapter were drawn three protein chimeras (Q1, Q2 and Q3) composed by potentially immunogenic domains of Mycoplasma hyopneumoniae proteins. The chimera proteins were expressed in bacterial system and purified using the histidine tail. The immunogenicity evaluation was performed in murine model. The animals inoculated with the chimeras presented IgG and IgG1 against Mycoplasma hyopneumoniae strain J native proteins. Several patterns of cytokine production were observed in the splenocytes of animals inoculated with chimeras. The results of the present study indicate that chimeras can be used in future vaccine trials with swine because they presented promising immunogenicity. And the PC2 peptides from antigenic regions can assist in the development of new vaccination strategies and in new diagnostic molecules.
Biblioteca responsável: BR68.1