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TIFIPICAÇÃO MOLECULAR DE Salmonella SPP. E RESISTÊNCIA AOS ANTIMICROBIANOS DE CEPAS ISOLADAS DE CARCARÇAS E MATADOUROS DE SUÍNOS NA REGIÃO NOROESTE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO.

CLADIUS COUTO CABRAL.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-207986

Resumo

A salmonelose é uma das principais doenças veiculadas por alimentos (DTA) no Brasil e no mundo, sendo veiculada principalmente mediante o consumo de ovos e produtos que o contenham em sua composição, assim como carnes. Juntamente com as aves, os suínos estão entre os principais animais de produção carreadores assintomáticos desta bactéria, podendo durante o processo de obtenção de carne contaminar o ambiente de abate e também as carcaças. No estado do Rio de Janeiro, poucos estudos foram conduzidos relativos a contaminação de carcaças de suínos por Salmonella spp., sendo que este estudo avalia pela primeira vez a região noroeste fluminense. Realizou-se ainda o perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos das cepas isoladas assim como o perfil clonal mediante pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Foram selecionados três matadouros em duas diferentes cidades, com duas visitas em cada para coleta de amostra. Em cada visita, oito carcaças foram selecionadas mediante amostragem aleatória sistemática. Foram colhidas amostras da superfície da papada, da pleura e do pernil após a serragem das carcaças, mediante swab estéril, assim como foram retirados para análise os respectivos linfonodos mesentéricos e submandibulares. Os intestinos das carcaças eram separados para posterior coleta das fezes. Antes do início do abate, colheu-se também mediante swab amostras da superfície de facas de sangria, de evisceração, da serra, depiladeira (somente dois estabelecimentos possuíam este equipamento) e da água de lavagem de carcaça. Além disso, foi colhido amostra do tanque de escalda (somente dois estabelecimentos realizavam esta operação), um litro, armazenado em garrafa de vidro previamente esterilizada. Da pocilga de matança, foram colhidas amostras da água dos cochos (um litro) e do chão mediante swab de arraste. Do total de 344 amostras coletadas, foi possível isolar Salmonella spp. de 36 (10,5%), sendo 10/48 isolamentos a partir de carcaças, 19/96 de linfonodos, 4/48 de fezes, 2/6 de amostras de água de lavagem de carcaça e 1/6 isolamento a partir de uma faca de sangria, sendo que com a ocorrência de mais de um isolamento por amostra, obteve-se no final do estudo 55 cepas. A sorotipagem revelou grande ocorrência do sorotipo Typhimurium (26 isolados), juntamente de S. Abony e S. Give (10 e 7 cepas isoladas, respectivamente). Três cepas pertenciam ao sorotipo Heidelberg e uma ao sorotipo Infantis. Nove cepas foram apenas parcialmente sorotipificadas, tendo sido possível apenas a determinação de seu antígeno O, assim como três cepas formaram colônias rugosas, não tipáveis. Todas as cepas isoladas foram submetidas ao teste de sensibilidade aos antimicrobianos, que detectou grande quantidade de microrganismos resistentes, sendo os principais antimicrobianos pertencentes ao grupo dos aminoglicosídeos, fluoroquinolonas, anfenicóis, tetraciclinas e sulfonamidas. Das 55 cepas isoladas, 36 (65%) apresentaram resistência ao menos a um antibiótico, sendo que 24 (44%) destas podem ser classificados como multirresistentes (resistência a pelo menos uma molécula de três classes diferentes). Os principais antimicrobianos com mais cepas resistentes foram: ácido nalidíxico (26/36 cepas resistentes), cefalotina (10/36), ciprofloxacina (15/36), cloranfenicol (19/36), enrofloxacina (18/36), estreptomicina (16/36), florfenicol (18/36), gentamicina (12/36), tetracilina (20/36), sulfonamidas (28/36) e trimetoprim (26/36). A análise de 15 cepas de S. Typhimurium e três de S. Heidelberg por PFGE identificou sete perfis de macrorestrição (pulsotipos). Destes, houve predominância de um perfil com cinco cepas, juntamente de outros quatro contendo ao menos duas cepas em cada de diferentes fontes de obtenção. O perfis clonal 6 do sorotipo Typhimurium foi detectado em matadouros diferentes em cada uma das duas cidades, enquanto quatro perfis foram encontrados dentro do mesmo matadouro em amostras de linfonodos de diferentes animais do mesmo lote, indicando a dispersão destes clones nas granjas de origem. Os resultados deste estudo, o primeiro em matadouros de suínos no noroeste do estado do Rio de Janeiro, indicam a contaminação por Salmonella spp. em carcaças de suínos abatidos nestes estabelecimentos, com grande quantidade de cepas multirresistentes e alta variabilidade genética do sorotipo Typhimurium. Espera-se que estes dados impulsione ações dos órgãos competentes para a região estudada, em virtude da baixa qualidade microbiológica da carne suína produzida nestes estabelecimentos.
Salmonellosis is one of the main foodborne diseases (DTA) in Brazil and in the world, being mainly transmitted through consumption of eggs and products that contain it in its composition, as well as meats. Along with roosters, pigs are among the main animals of production that may be asymptomatic carriers of this bacterium, being able to contaminate the environment of slaughtering and the carcasses during the process of obtaining meat. In the state of Rio de Janeiro, few studies were conducted regarding contamination of pork carcasses by Salmonella spp., with this study evaluating for the first time the northwest region of the state. The antimicrobial susceptibility profile of the strains isolated as well as the clonal profile by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) was also performed. Three slaughterhouses were selected in two different cities, with two visits in each for sample collection. At each visit, eight carcasses were selected using systematic random sampling. Samples were collected from the surface of the jowl, pleura and ham after the sawing step with sterile swab, as well as the respective mesenteric and submandibular lymph nodes which were removed for analysis. The intestines of the carcasses were separated for later collection of feces. Prior to the beginning of the slaughtering, samples of the surface of the bleeding and evisceration knives, the splitting saw, shaving machines (only two establishments had this equipment) and the carcass washing water were also collected by swab. A sample of the scalding tank (only two establishments performed this operation) was collected, one liter, stored in previously sterilized glass bottle. From the slaughterhouse, samples were taken from the water troughs (one liter) and from the killing pen floor by drag swab. From a total of 344 samples collected, it was possible to isolate Salmonella spp. From 36 (10.5%), with 10/48 isolates from carcasses, 19/96 from lymph nodes, 4/48 from faeces, 2/6 from the carcass washing water samples and 1/6 isolation from a bleeding knife, being that with the occurrence of more than one isolate per sample, 55 strains were obtained at the end of the study. Serotyping revealed a high occurrence of Typhimurium serotype (26 isolates), together with S. Abony and S. Give (10 and 7 isolates, respectively). Three strains belonged to the Heidelberg serotype and one to the serotype Infantis. Nine strains were only partially serotyped, and it was only possible to determine their O antigen, as well as three strains which formed rough, non-typing colonies. All strains isolated were submitted to the antimicrobial susceptibility test, which detected a large number of resistant microorganisms, being the main antimicrobials belonging to the group of aminoglycosides, fluoroquinolones, amphiphiles, tetracyclines and sulfonamides. Of the 55 strains isolated, 36 (65%) presented resistance to at least one antibiotic, 24 (44%) of which could be classified as multiresistant (resistance to at least one molecule of three different classes). The major antimicrobials with the most resistant strains were: nalidixic acid (26/36 resistant strains), cephalothin (10/36), ciprofloxacin (15/36), chloramphenicol (19/36), enrofloxacin (18/36), streptomycin 16/36), florfenicol (18/36), gentamicin (12/36), tetracycline (20/36), sulfonamides (28/36) and trimethoprim (26/36). Analysis of 15 strains of S. Typhimurium and three strains of S. Heidelberg by PFGE identified seven macrorestriction profiles (pulse types). Of these, one single profile predominated with five strains, along with four other pulsetypes containing at least two strains in each of different sources of production. One clonal profile of the Typhimurium serotype were detected in different slaughterhouses in each of the two cities, while four profiles were found inside the same slaughterhouse in lymph node samples from different animals of the same batch, indicating a great dispersion of these clones in the farms of origin. The results of this study, the first in swine slaughterhouses in the northwest of the state of Rio de Janeiro, indicate the contamination by Salmonella spp. In pig carcasses slaughtered at these establishments, with a large number of multiresistant strains and high genetic variability of the Typhimurium serotype. It is expected that these data will impel actions of the competent organs for the region studied, due to the low microbiological quality of the meat produced in these establishments. Key-words: Salmonella spp.; swine carcass; slaughterhouse; northwestern Rio de Janeiro
Biblioteca responsável: BR68.1