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Amblyomma sculptum: IDENTIFICAÇÃO DE ALOMÔNIO EM HOSPEDEIRO RESISTENTE (Equus asinus) E OLFATOMETRIA PARA CANDIDATOS À SEMIOQUÍMICOS Lorena

LORENA LOPES FERREIRA.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-208067

Resumo

Amblyomma sculptum é um carrapato de importância médico-veterinária que parasita diversas espécies, principalmente capivaras, equinos e pode parasitar humanos. Atualmente o controle de carrapatos é um desafio visto as desvantagens do controle convencional, por isso, métodos alternativos são desejáveis. Os semioquímicos, que são substâncias capazes de modular o comportamento de carrapatos, podem ser utilizados para este fim. O uso de feromônios, cairomônios assim como a utilização de compostos de espécies não-hospedeiras (alomônios) para controlar carrapatos já foi evidenciado. Na literatura se tem descrito semioquímicos que poderiam atuar no comportamento de A. sculptum e sabe-se também que asininos (Equus asinus) são mais resistentes ao parasitismo por esta espécie que os equinos (Equus caballus). A partir disto foi proposto olfatometria com ninfas e adultos não alimentados de A. sculptum frente a 15 candidatos a semioquímicos (CO2 apenas a 5%, benzaldeído, ácido benzóico, ácido nonanóico, nonanal, ácido salicílico, 2,6 diclorofenol, R-limoneno, S-limoneno, metil salicilato, 1-octen-3-ol, acetona, hidróxido de amônio, ácido isobutírico e ácido lático) em quatro concentrações (10, 5, 2,5 e 1,25%) e teste a campo com os compostos que forem atraentes. Foi também investigado se os asininos (Equus asinus) produzem compostos que podem atuar como repelentes para A. sculptum e olfatometria com ninfas não alimentadas de A. sculptum utilizando os compostos identificados em diferentes concentrações (1,0, 0,5, 0,25 e 0,125M). Quanto aos candidatos a semioquímicos, o CO2 foi atraente para todos os estágios testados. As ninfas foram repelidas pelo benzaldeído e R-limoneno ambos a 10% e pelo ácido isobutírico a 10 e 5%. E foram atraídas pelo ácido benzóico, ácido salicílico e metil salicilato a 1,25% e pelo hidróxido de amônio a 2,5%. Machos foram atraídos pelo ácido benzóico na concentração de 2,5%, enquanto fêmeas foram repelidas pelo benzaldeído a 5%. Foram testadas quatro misturas (v/v) com os compostos atraentes para ninfas, porém nenhuma atividade foi observada. Os compostos que causaram atratividade no olfatômetro (CO2, metil salicilato, ácido benzóico, ácido salicílico e hidróxido de amônio) foram testados a campo. Armadilhas com estes compostos foram colocadas em uma pastagem naturalmente infestada por A. sculptum. O CO2 foi o composto que capturou mais carrapatos (p >0,05). Para verificar a produção de voláteis repelentes pelos animais resistentes ao A. sculptum foi feita uma colheita de sebo de equinos e asininos e foram identificados por meio de cromatografia gasosa e espectofotometria de massa nas duas espécies cinco principais compostos, sendo dois predominantes em cavalos: etil decanoato e etil octanoato, três predominantes em asininos: hexanal, heptanal e trans-2-decenal. Um composto, trans-2-octenal, foi identificado exclusivamente em asininos e os animais produzem uma média de 12,398 g.mg-1 deste composto. Na olfatometria apenas o trans-2-octenal foi repelente em todas as concentrações testadas (10, 5, 2,5 e 1,25M). E ao ser adicionado um composto atraente (hidróxido de amônio) a substância manteve-se repelente. Os resultados indicam que o ácido benzoico deve ser mais investigado visto seu desempenho em laboratório e a campo. O ácido isobutírico e R-limoneno devem ser melhor explorados devido a repelência causada no ensaio comportamental. E o semioquímico identificado aqui modula o comportamento do carrapato e, portanto, é um composto potencial a ser transformado em uma nova tecnologia para controlar A. sculptum.
Amblyomma sculptum is a tick that has medical-veterinary importance and parasites a variety of hosts like capybaras, horses and humans. The tick control is a challenge due the disadvantages caused by conventional control so an alternative is desirable. Semiochemicals are potencial tools to be used once they modulate tick behavior and the use of pheromones, kairomones as well as the use of non-host species (allomones) to control ticks has already been demonstrated. Some semiochemicals have already been described in the literature that could act in A. sculptum behavior. It is also known that donkeys (Equus asinus) are more resistant to the parasitism of this tick specie than horses (Equus caballus). For this, four concentrations (10, 5, 2.5 and 1.25%) of 15 semiochemical candidates (CO2 only at 5%, benzaldehyde, benzoic acid, nonanoic acid, nonanal, salicylic acid, 2.6 diclorophenol, R-limonene, S-limonene, methyl salicylate, 1-octen-3-ol, acetone, ammonium hydroxide, isobutyric acid and lactic acid) were tested in non fed A. sculptum nymphs and adults using a Y-tube olfactometer. And here we investigated if donkeys could produce compounds that can act as repellent to A. sculptum. The CO2 was attractive to all stages tested. Nymphs were repelled by benzaldehyde and R-limonene both at 10% and isobutyric acid at 10 and 5%. Were attracted by methyl salicylate, benzoic acid and salicylic acid all at 1.25% and ammonium hydroxide at 2.5%. Males were attracted by benzoic acid at 2.5%. Females were repelled by benzaldehyde at 5%. Mixtures with the attractive compounds were done but no attraction was observed. The compounds that caused attractiveness in the olfactometer assay (CO2, methyl salicylate, benzoic acid, salicylic acid and ammonium hydroxide) were taken to the field and traps with these compounds were placed in a pasture naturally infested with A. sculptum ticks. The dry ice (CO2) is still the best substance to attract ticks in the field (p>0.05). To verify if non hosts produce repellents volatiles, odors from donkeys and horses were extracted from the dry sebum extract. So the compounds were identified by gas chromatography (GC) and coupled GC-mass spectrometry. Five main compounds were identified in both species being two predominant on horses: ethyl decanoate and ethyl octanoate, three predominant on donkeys hexanal, heptanal and trans-2-decenal. One compound trans-2-octenal occurring almost exclusively on donkeys was also identified and donkeys produced an average of 12,398 g.mg-1. In olfactometer tests only the trans-2-octenal was repellent at different concentrations (10, 5, 2.5 and 1.25M). When an attractive substance (ammonium hydroxide) was added the compound still repellent. The results indicated that benzoic acid should be further investigated since their results as attractant in laboratory and field. The isobutyric acid and R-limonene should be better exploited because of the repellent role presented in the behavioral test. And that the semiochemical identified here could be used to interfere in tick behavior and is therefore a potential compound to be transformed in a new technology to control A. sculptum.
Biblioteca responsável: BR68.1