Haemonchus contortus: EFEITO OVICIDA DE Senecio brasiliensis E CARACTERIZAÇÃO DE UM ISOLADO FRENTE A COMPOSTOS COMERCIAIS

RESUMO

A haemoncose é um problema que assola propriedades criadoras de ovinos em âmbito global e o controle do nematódeo Haemonchus contortus é dificultado devido à presença de isolados resistentes aos anti-helmínticos. A resistência anti-helmíntica (RA) fez surgir muitas linhas de estudo para o desenvolvimento de alternativas de controle da haemoncose, como a fitoterapia, além de testes in vitro para a detecção da RA e screening de novos compostos com potencial antiparasitário. Os objetivos deste trabalho foram analisar o potencial anti-helmíntico do extrato aquoso da planta Senecio brasiliensis em um isolado de H. contortus e caracterizar este mesmo isolado frente a princípios ativos comerciais. Em relação à planta, o extrato aquoso da planta seca e a fração alcaloidica da planta seca tiveram potencial ação ovicida, acarretando na falha da eclosão de H. contortus. Na análise cromatográfica, as substâncias encontradas em maior quantidade nas frações alcaloidicas foram os alcaloides pirrolizidínicos (APs), porém, quando isolados, os mesmos não tiveram maior efeito do que quando combinados, sugerindo que os APs possuem participação na ação ovicida, porém outros compostos presentes na planta podem potencializar este efeito. O extrato aquoso de S. brasiliensis poderá ser uma ferramenta no controle da haemoncose e estudos futuros deverão levar em consideração formas de administração deste fitoterápico que não causem toxicidade ao animal e não sofram metabolização pelo organismo do mesmo. A segunda parte do estudo consistiu em caracterizar o mesmo isolado utilizado na primeira parte, frente a diferentes concentrações de medicamentos comerciais. O composto tiabendazole foi utilizado para avaliação da inibição da eclodibilidade larvar, no intervalo de concentrações entre 5000 e 0,32 µg.mL-1 e as EC50 e EC90 (EC Concentração Eficaz) encontradas foram 0,1561 e 0,431 µg.mL-1 respectivamente, com intervalo de eficácia de 3% a 98%. Detectou-se a resistência in vitro do isolado testado ao tiabendazole. Já para avaliar efeitos na migração larvar, os medicamentos monepantel, ivermectina e levamisole foram utilizados. Não foi possível avaliar a eficácia do monepantel na inibição da migração larvar. Foi detectada a suspeita de resistência do isolado à ivermectina, que precisará ser confirmada posteriormente in vivo. Já em relação ao levamisol, a EC50 e EC90 foi 1,469 e 3,754 µg.mL-1 respectivamente, com um intervalo de eficácia que variou entre 7% e 96% (0,1 12,5 µg.mL-1 ). Os resultados e a curva dose-resposta do levamisol e do tiabendazole poderão ser usados tanto para comparação com experimentos posteriores como para melhor validação e padronização das técnicas in vitro, realizadas para estudos da RA em rebanhos ovinos.

ABSTRACT

Haemonchosis is a problem that plagues sheep-producing properties globally and the control of Haemonchus contortus is compromised by the presence of anthelmintic-resistant isolates. Anthelminthic resistance (AR) has led to many lines of study for the development of alternatives to control haemoncosis, such as phytotherapy, in vitro tests for the detection of RA and screening of new compounds with antiparasitic potential. The objectives of this work were the analysis of the anthelminthic potential of the aqueous extract of the plant Senecio brasiliensis in an isolate of H. contortus and the characterization of this same isolate against commercial active principles. Regarding the plant, the aqueous dry plant extract and alkaloid fraction of the dry plant had ovicidal action, causing failing eclosion of H. contortus. In the chromatographic analysis of alkaloid fraction of both extracts, the most found substances were pyrrolizidine alkaloids (PAs), but when isolated in the fractions, they had no greater effect than when together in extract, suggesting that PAs have a role in ovicidal action, but other compounds present in plant can potentiate this effect. The aqueous extract of S. brasiliensis may be a tool in the control of haemonchosis and future studies should take into account forms of administration of this plant extract that do not cause toxicity to the animal and that are not metabolized by the animals organism. The second part of the study consisted of characterizing the same isolate used in the first part, against different concentrations of commercial drugs. Thiabendazole compound was used to evaluate in inhibition of egg hatching, in the concentration range between 5000 and 0.32 g.mL -1 and the EC50 and EC90 (EC Effective Concentration) found were 0.1561 and 0.431 g.mL-1 respectively, With a range of effectiveness of 3% to 98%. In vitro resistance of the tested isolate to thiabendazole was detected. In order to evaluate effects on larval migration, monepantel, ivermectin and levamisole were used. The efficacy of monepantel in the inhibition of larval migration could not be evaluated. The suspected resistance of the isolate to ivermectin was detected, which will need to be confirmed later in vivo. Levamisole, EC50 and EC90 were 1.469 and 3.754 g.mL-1, respectively, with a range of efficacy ranging from 7% to 96% (0.1-12.5 g.mL-1). The results and the dose-response curve of levamisole and thiabendazole can be used both for comparison with later experiments and for better validation and standardization of in vitro techniques performed for AR studies in sheep herds.