CARACTERIZAÇÃO DA POPULAÇÃO DE FOLÍCULOS OVARIANOS PRE-ANTRAIS DE FETOS BOVINOS E CULTIVO IN VITRO DE TECIDO OVARIANO ASSOCIADO A PROTEÍNA MORFOGENÉTICA ÓSSEA 9

RESUMO

Aumentaraeficácia docultivo invitrodefolículos pré-antrais aindaéum grandedesafio pois as condições dedesenvolvimentoin vivoenvolvemdiversos fatores ainda desconhecidos.Paraisso,são necessárias pesquisas visando aperfeiçoar esimplificarametodologia eas condições decultivo durante as várias etapas do processo. Diante destesmotivos, esta tesecompõe-sedetrês capítulos, quetiveram como objetivo principal avaliar o desenvolvimento in vitrodefolículos pré-antrais de fetos bovinos inclusos em fragmentos, em meios decultivo suplementados com aproteína morfogenéticaóssea9 (BMP-9) em três concentrações (50, 100 e200 ng/ml) durante 7 dias. Oprimeirocapítuloabordaconsideraçõesgerais referentesaostemas abordadosnos demais capítulos. Osegundo capítuloobjetivoucaracterizar apopulação folicularpré-antraldefetos bovinos, paraservirem dereferênciaparao experimento descritono terceiro capitulo. Estepropôs um meio decultivo parasuportarocrescimento defolículos pré-antrais defetos bovinos. Adicionou-seaproteína morfogenéticaóssea9(BMP-9) aomeio e mensurou-seseus efeitos nas característicashistológicas enasobrevivência eviabilidadein vitrodefolículos pré-antrais bovinos.Concluímosquefetos bovinosapartir dequatro meses deidadeapresentam população defolículos pré-antraisformadacom processos deativaçãofolicularassociados,podendoser utilizados em biotecnias. Concluiu-setambém queaadição de50ng/ml deBMP-9 aomeio decultivoexerceumaação benéficanapreservação daviabilidadedefolículos primordiais,além deumefeito inibitório na ativação folicular durante o período de cultivo.

ABSTRACT

Increasing the efficiencyof in vitro cultureofpreantral follicles is stillamajorchallengeas in vivo development conditions involve several unknown factors.For this purpose, itis necessaryresearches aimingto improveand simplifythemethodologyandconditions of cellcultureduringthe various stages of theprocess. Dueto thesereasons, thisthesis is composed ofthreechapters, that had as main objectiveto evaluatethein vitrodevelopment of preantral follicles of bovine fetuses included in fragments, in culturemediasupplemented with bonemorphogeneticprotein 9 (BMP-9) at threeconcentrations (50, 100and 200 ng/ml) for 7 days. Thefirstchapter addresses general considerations regarding the topics covered in the other chapters. Thesecond chapteraimed to characterizehistologicallythe ovariandevelopment of bovine fetuses, analyzingthemorphological and quantitativeaspects of thefollicularpopulation, to serveas referenceforthe experiment described in the final chapter. This proposed aculturemedium tosupport the growth of preantral follicles of bovine fetuses.Bonemorphogeneticprotein 9(BMP-9) was added tothe medium anditseffects on the histological characteristics and survival and in vitro viabilityof bovine preantralfollicles weremeasured.Weconclude that bovinefetuses from the ageoffour months presentapopulation ofpreantralfollicles formed with associated follicular activation processes,andcan beused in biotechniques. It was also concluded that the addition of 50 ng/mlof BMP-9 to the culturemedium exerts abeneficial effect in preservingthe viabilityof primordial follicles, in addition to an inhibitoryeffect on follicular activation during the cultureperiod.