Portal de Pesquisa da BVS Veterinária

Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-208606

Resumo

Os asnos e seus híbridos são animais versáteis, rústicos e totalmente adaptados às regiões de clima árido. Ainda que nacionalmente o rebanho asinino seja grande e expressivo, há escassos estudos dedicados à reprodução desta espécie. Na Europa, técnicas avançadas de reprodução assistida têm sido utilizadas como importantes ferramentas, na conservação de raças asininas, que se encontram em perigo de extinção, tais como as raças espanholas Andaluza e Zamorano-Leonesa. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da adição de aminoácidos (AA) ao meio crioprotetor na qualidade seminal pós- descongelamento de Asnos Andaluzes. No total, 18 ejaculados foram coletados, provenientes de seis asnos Andaluzes. Eram coletados dois asnos ao dia, as amostras de sêmen foram mescladas em pools (2 ejaculados por pool). Cada pool era dividido em dez alíquotas criopreservadas com Gent A® com 1% de etilenoglicol (Gent-EG), suplementado com 0 (tratamento controle), 20, 40, ou 60 mM de glutamina, prolina ou taurina. Em todos os protocolos, tanto o sêmen fresco como o descongelado foram analisados, para motilidade, morfologia, integridade de acrossoma e integridade de membrana plasmática. O índice de fragmentação de DNA foi avaliado, dinamicamente, em amostras descongeladas. O uso da maior concentração (60 mM) dos aminoácidos glutamina e taurina resultou em melhores parâmetros de motilidade (P<0.001). A adição de glutamina, prolina e taurina não melhorou (P>0.05) os resultados de morfologia espermática (Oldenhof et al.) e de integridade de membrana (MIS), comparando-se às amostras controle. O ganho (P<0.05) foi observado, na integridade de acrossoma (AIS), empregando-se 60 mM de glutamina. Após descongelamento, não houve efeito significativo (P>0.05), na preservação do DNA espermático entre os tratamentos. Entretanto, às 6 h de incubação a 37oC, as amostras adicionadas de 60 mM de glutamina e 40 mM de taurina apresentaram menor sDFI (P<0.05) que as amostras controle. Às 24 h de incubação, os valores de sDFI foram inferiores (P<0.05), em todos os grupos suplementados com aminoácidos, em comparação com o grupo controle, com exceção somente para 20 mM de prolina. Conclui-se que a suplementação do crioprotetor Gent-EG com glutamina ou taurina, na concentração de 60 mM, incrementa a qualidade seminal pós-descongelamento em asnos.

---

The donkeys and their hybrids are versatile animals, rustic and totally adapted to the regions of arid climate. Although nationally the herd is large and expressive, there are scarce studies dedicated to the reproduction of this species. In Europe, advanced assisted reproduction techniques have been used as important tools in the conservation of endangered asinine breeds such as the Spanish Andalusian and Zamorano-Leonesa donkey breeds. The aim of this study was to evaluate the effect of amino acid (AA) addition to the freezing medium on post-thaw quality of donkey semen. In total, 18 ejaculates were collected from six Andalusian donkeys. Two donkeys were collected per day, the two collected semen samples were mixed in pools (2 ejaculates per pool), divided into ten aliquots, and cryopreserved in Gent A® containing 1% ethylene glycol (Gent-EG) supplemented with 0 (as control), 20, 40, or 60 mM for each glutamine, proline, or taurine. Fresh and frozen-thawed semen samples were assessed for sperm motility, morphology, acrosome integrity and plasma membrane integrity. The DNA fragmentation index (sDFI) was dynamically accessed in the thawed samples. The high concentration (60 mM) of the amino acids glutamine and taurine resulted in greater (P<0.001) post-thaw motility. The additives glutamine, proline and taurine did not improve (P>0.05) the mean ASM and MIS values compared with the control samples, while improvement (P<0.05) was observed at 60 mM for AIS when using glutamine. After thawing, there was no significant effect (P>0.05) in DNA preservation between treatments. However, at 6 h of incubation, the samples added 60 mM glutamine and 40 mM taurine presented lower sDFI (P <0.05) than the control samples. At 24 h, the sDFI values were lower (P<0.05) in all supplemented groups than in control extender, except only for 20 mM proline. In conclusion, the supplementation of the Gent-EG extender with glutamine or taurine at concentrations of 60 mM improved post-thaw donkey sperm quality.

Biblioteca responsável: BR68.1