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Frequência, análise de fatores de risco e comparação de técnicas para detecção de oocistos de Cryptosporidium spp. em fezes de animais de companhia na região Sul do Rio Grande do Sul

ANDRIOS DA SILVA MOREIRA.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-208847

Resumo

Cryptosporidium spp. é um parasito oportunista de caráter zoonótico que infecta o trato gastro intestinal de humanos e outros vários animais tendo a diarreia crônica ou intermitente como principal sintoma da doença. O presente estudo objetivou determinar a frequência de oocistos de Cryptosporidium spp. em fezes de cães e gatos na região sul do Rio Grande do Sul, analisar os fatores de risco que envolvem a criptosporidiose, bem como comparar as técnicas de coloração para o diagnóstico de Cryptosporidium spp. em animais de companhia. Foi disponibilizado um questionário de caráter epidemiológico, abordando perguntas inerentes a possíveis fatores de risco. As variáveis analisadas foram: idade do animal, tipo de alimentação consumida, tipo de água ingerida, moradia, tipo de chão, acesso à rua, interação com outros animais e presença de diarreia. Também foi realizada uma comparação e análise de concordância entre as técnicas de concentração por sedimentação acetato de etila e formalina-éter, e entre os métodos de coloração Kinyoun, Ziehl- Neelsen e safranina para visualização de oocistos de Cryptosporidium spp. em fezes desses animais. Os resultados mostraram que, das 128 amostras (110 cães, 18 gatos), uma frequência verdadeira de 24,6% (25 cães, 2 gatos) foi observada. Quando separadas as espécies de animais, a frequência verdadeira para cães e gatos foi de 26,7% e 12,1%, respectivamente. Nenhuma das quatro amostras de fezes diarreicas obtidas no presente estudo apresentou oocistos. As variáveis que representaram fator de risco foram: comida de preparo, água não tratada e circular exclusivamente em terreno gramíneo. A interação com outros animais, principalmente bovinos, representou 38,5% dos positivos, indicando fator de risco. Na comparação entre as técnicas de coloração, foi possível observar um nível de concordância suficiente a boa entre os dois métodos de concentração por sedimentação como técnica preliminar para coloração de auramina e uma concordância excelente desses mesmos métodos como preliminares para Kinyoun, Ziehl-Neelsen e safranina. A comparação entre os métodos de coloração de Kinyoun e Ziehl-Neelsen para microscopia de luz apresentou fraca concordância, independente do uso de acetato de etila ou formalina-éter. Os métodos de Kinyoun e Ziehl-Neelsen não tiveram qualquer concordância com o método de safranina. Concluíu-se que a frequência de animais de companhia infectados por Cryptosporidium spp. é relevante, destacando que todos os animais positivos do presente estudo não apresentaram diarreia, contribuindo para a contaminação do ambiente e manutenção da infecção. Ademais, pode-se concluir que as técnicas de coloração para microscopia de luz apresentam baixa concordância, indicando diferença de resultados entre um método e outro. O emprego de acetato de etila ou formalina-éter é indiferente para a microscopia ótica.
Cryptosporidium spp. is a facultative parasite that infects the gastrointestinal tract of humans and other animals in which chronic or intermittent diarrhea is the main symptom of the disease. The aim of this study was to investigate the frequency of dogs and cats infected by Cryptosporidium spp. in southern of Rio Grande do Sul using a technique for detecting oocysts in the feces of these animals. In addition, an epidemiological questionnaire with questions considering possible risk factors was made available. We evaluated the following variables: animals age, type of food, water type, home, type of floor, access to the street, interaction with other animals, and presence of diarrhea. We also performed a comparison and concordance analysis between sedimentation concentration techniques (ethyl acetate and formalin ether) and among methods of staining of Cryptosporidium oocysts in the feces. The fenified auramine test was applied to screen the samples because it had excellent specificity and sensitivity. The results showed that of the 128 samples analyzed (110 dogs, 18 cats), a real frequency was 24.6% (25 dogs, cats 2). The true frequency for dogs and cats, separately, was 26.7% and 12.1%, respectively. The four samples of diarrheal feces evaluated in this study did not present oocysts. The variables that represented a risk factor were: Homemade food (p=0.004; OR=3.533, IC.95%=1.442-8.652), non-piped water (0.007; OR=0.291, CI.95%=0.115-0.738) and to transit exclusively on grassy floor (p=0,021, OR=2,778, CI.95%=1.147-6.728). Access to the street showed a protection factor (p = 0.027, OR = 0.242, CI.95% = 0.067-0.868), given that the highest number of parasitized animals consisted of those that did not have access (29.3%). The interaction with other animals, mainly cattle, represented 38.5% of positivity, point to a risk factor (p = 0.010, OR = 3.333, CI.95% = 1.366-8.136). Regarding sedimentation techniques, we observed a satisfactory level of agreement between the two concentration methods, both preliminary to auramine staining (P = 0.000; K = 0.629, CI 95% = 0.457-0.801). The agreement was excellent for the same methods when preliminary to Kinyoun, Ziehl-Neelsen and safranine staining. Comparison between the Kinyoun and Ziehl-Neelsen staining methods to light microscopy showed low agreement regardless of the use of ethyl acetate or formalin ether (p = 0.026, K = 0.391, 95% CI = 0.013-0.769). The methods of Kinyoun and Ziehl-Neelsen did not show agreement with the safranin method. We conclude that the frequency of Cryptosporidium-infected animals is relevant, emphasizing that all the positive animals of this research did not present diarrhea, contributing, consequently, to environmental contamination and maintenance of infection. Moreover, we can conclude that the staining techniques for light microscopy have low correlation, point to difference in results between one and another method. The use of ethyl acetate or formalin-ether is imperceptible to optical microscopy.
Biblioteca responsável: BR68.1