Portal de Pesquisa da BVS Veterinária

Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-208963

Resumo

Neste trabalho foi desenvolvido um método analítico simples e rápido para determinar o teor total de chumbo (Pb) e cádmio (Cd) em amostras de peixe por espectrometria de absorção atômica em forno de grafite (GFAAS), após solubilização da amostra com hidróxido de tetrametilamônio (TMAH). As condições ótimas para a determinação de Pb foram estabelecidas utilizando planejamento fatorial fracionário (FFD) 2_IV((6-2)), sendo estudadas as variáveis tempo de solubilização (tS), temperatura do banho-maria (TB), massa da amostra (MA), temperatura de pirólise (TP), tempo de pirólise (tP) e temperatura de atomização (TA); sendo posteriormente otimizadas por meio do planejamento composto central (CCD) as variáveis TB e TP, que se mostraram significativas no FFD. Para a determinação de Cd, o CCD foi aplicado para otimizar as variáveis TP e TA, usando as condições de preparo da amostra que foram otimizadas para Pb. No método otimizado, pesou-se com precisão 750,0 mg de amostra de peixe diretamente em tubos cônicos de 50,0 mL. Em seguida, adicionou-se 1,0 mL de solução de TMAH a 25% (v/v) à amostra, incubou-se o sistema a 70 C durante 30 min e o volume final foi completado até 10,0 mL com uma solução de H3PO4 1% (v/v). A solução resultante foi introduzida diretamente no tubo de grafite por meio de amostrador automático. O método foi validado seguindo procedimentos e critérios de aceitabilidade requeridos aos Laboratórios Nacionais de Agricultura e Pecuária (LANAGRO) do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA). O método não apresentou efeito de matriz, sendo utilizada então curva de calibração por padrões externos cuja linearidade foi constatada. O limite de detecção e quantificação foram de 7,8 e 26,0 ?g kg-1 para Pb, 1,2 e 4,1 ?g kg-1 para Cd, respectivamente. A veracidade e a precisão foram avaliadas utilizando Material de Referência Certificado (MRC) de músculo de peixe, com recuperação entre 91,4 e 114,4% (n = 9) e desvios padrão relativos não superiores a 9,8%. O estudo de robustez indicou que o método apresenta restrições relacionadas à etapa de preparo de amostras, desta forma, atenção especial deve ser dada a esta etapa. A estimativa da incerteza padrão combinada foi baseada na incerteza associada à concentração do analito na solução de ensaio, ao volume final da solução de abertura da amostra, à massa bruta da amostra e à recuperação. O método foi utilizado com sucesso nas análises de amostras de peixes coletadas em caráter fiscal no estado de Minas Gerais e oriundas do Laboratório de Aquacultura (LAQUA) da Escola de Veterinária da UFMG, apresentando também resultados satisfatórios frente a comparações interlaboratoriais simuladas. Uma avaliação de todos os parâmetros analíticos demonstrou que o procedimento desenvolvido produz resultados satisfatórios de acordo com requisitos internacionais.

---

In this work a simple and rapid analytical method was developed to determine the total content of lead (Pb) and cadmium (Cd) in fish samples by graphite furnace atomic absorption spectrometry (GFAAS), after solubilization of the sample with tetramethylammonium hydroxide (TMAH). The optimum conditions for the determination of Pb were established using 2_IV <(>(6-2)) fractional factorial design (FFD), being studied the variables solubilization time (tS), water bath temperature (TB), sample mass (MA), pyrolysis temperature (TP), pyrolysis time (tP) and atomization temperature (TA); being later optimized through the central composite design (CCD) the variables TB and TP, which were shown to be significant in the FFD. For the determination of Cd, the CCD was applied to optimize the TP and TA variables, using the sample preparation conditions that were optimized for Pb. In the optimized method, 750.0 mg of fish sample was accurately weighed directly in 50.0 mL conical tubes. Then, 1.0 mL of 25% v/v TMAH solution was added to the sample, the system was incubated at 70°C for 30 min and the final volume was completed to 10.0 mL with a 1% v/v H3PO4 solution. The resulting solution was introduced directly into the graphite tube by means of an autosampler. The method was validated following procedures and criteria of acceptability required by the National Agriculture and Livestock Laboratories (LANAGRO) of the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA). The method did not present matrix effect, and the calibration curve was then used by external standards whose linearity was verified. The limits of detection and quantification were 7.8 and 26.0 ?g kg-1 for Pb, 1.2 and 4.1 ?g kg-1 for Cd, respectively. Trueness and precision were assessed using Fish Muscle Certified Reference Material (MRC), with recovery between 91.4 and 114.4% (n = 9) and relative standard deviations not exceeding 9.8%. The robustness study indicated that the method presents restrictions related to the preparation stage of samples, in this way, special attention should be given to this step. The estimate of the combined standard uncertainty was based on the uncertainty associated with the analyte concentration in the test solution, the final volume of the sample solution, the gross mass of the sample and the recovery. The method was successfully used in the analyzes of fish samples collected in the state of Minas Gerais and from the Aquaculture Laboratory (LAQUA) of the Veterinary School of the Federal University of Minas Gerais (UFMG), and also presented satisfactory results compared to simulated interlaboratory comparisons. An evaluation of all analytical parameters demonstrated that the procedure developed yields satisfactory results in accordance with international requirements.

Biblioteca responsável: BR68.1