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CONCENTRAÇÃO INIBITÓRIA E BACTERICIDA MÍNIMA DE ÁCIDOS ORGÂNICOS, ASSOCIADOS OU NÃO, FRENTE À Escherichia coli E Salmonella spp

PRISCILA ESTELA ROSIQUE JOPPERT.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-212470

Resumo

Os ácidos orgânicos e alguns extratos herbais apresentam efeito antimicrobiano, sendo assim podem possuir controle na Escherichia coli e Salmonella spp. São os principais causadores da síndrome da diarreia em bezerros jovens e importante causa de morbidade e mortalidade, resultando em perdas econômicas consideráveis aos pecuaristas. Nesta casuística, vários enteropatógenos podem estar envolvidos, isoladamente ou em associação, sendo a Escherichia coli e Salmonella spp., dois dos principais agentes causadores desta síndrome. Nesse sentido, os ácidos orgânicos e alguns extratos herbais podem ser uma alternativa no controle da diarreia em bezerros neonatos, uma vez que apresentam efeito antimicrobiano. Porém, os ácidos e sais orgânicos são populares e muito bem documentados na produção de suínos e aves, mas informações sobre os eventuais efeitos destes compostos no controle de diarreia em bezerros são ainda desconhecidas. Este estudo visou determinar a atividade antimicrobiana de uma mistura de ácidos orgânicos, associados ou não com extrato herbal, no controle in vitro de Escherichia coli e Salmonella spp., agentes causadores de diarreia em bezerros lactentes. Para o estudo, foram utilizadas as linhagens padrões: Escherichia coli O157:H7 ATCC 43888 e Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhi CCCD S003, sendo reativadas em meio agarizado de Tayer e incubadas por 24 horas a 37 C. O blend de ácidos orgânicos foi composto por 25% de ácido benzoico, 30% de ácido fórmico, 25% de ácido fumárico e 20% de dióxido de sílica. Já o blend de ácidos orgânicos associado ao extrato vegetal foi composto por 21,2% de ácido benzoico, 25,5% de ácido fórmico, 21,2% de ácido fumárico, 17,1% de dióxido de sílica e 15% de extrato vegetal. Por sua vez, o extrato de plantas foi composto por 50% de castanha portuguesa (Castanea sativa) e 50% de acácia negra (Acacia decurrens). Ambos foram testados em concentrações de 0,00%; 0,40%; 1,70%; 3,20%; 6,25%; 12,50%; 25,00%; 50,00% e 100,00%. A atividade antibacteriana foi feita pela técnica de disco-difusão e diluição em caldo. A determinação da concentração inibitória mínima (CIM) foi realizada pela técnica da microdiluição em caldo, utilizando-se microplacas de 96 poços. Para a concentração bactericida mínima (CBM) foram inoculadas em meio Tayer Martin, desprovido de antimicrobianos, realizado em triplicata, sendo considerada CBM a menor concentração do blend de ácidos orgânicos que apresentou subcultivo negativo ou média de 0,1 UFC. Determinada a CBM, a concentração inibitória mínima foi utilizada para avaliar o crescimento das bactérias na presença dos ácidos orgânicos em função do tempo, determinando-se as curvas de sobrevivência da Escherichia coli e Salmonella spp. Após a realização das análises, verificouse que, para as cepas de Escherichia coli testadas, a concentração inibitória mínima (CIM) foi de 50%, tanto para o produto composto pelo blend de ácidos orgânicos quanto para o blend de ácidos orgânicos com adição do extrato de plantas. Já a concentração bactericida mínima (CBM) foi de 100% para ambos os produtos testados, isto é, foi necessário o emprego dos produtos puros. Em relação às cepas de Salmonella spp. estudadas, verificou-se que tanto a concentração inibitória mínima (CIM) quanto a concentração bactericida mínima (CBM) foram de 100% para os produtos avaliados. Também foi observado que o efeito bactericida do blend de ácidos orgânicos frente a Escherichia coli e Salmonella spp. depende tempo de exposição ao produto. Para E. coli, observou-se que o tempo necessário para eliminar 100% das cepas foi de quatorze horas na presença do blend de ácidos orgânicos e de treze horas no composto de ácidos orgânicos mais extrato de plantas. Já quando cepas de Salmonella spp. foram expostas ao blend de ácidos orgânicos em diferentes tempos, o tempo de sobrevivência foi de onze horas na presença dos ácidos orgânicos e treze horas no composto de ácidos orgânicos mais extrato de plantas
Organic acids and some herbal extracts have an antimicrobial effect, so they may have control in Escherichia coli and Salmonella spp. They are the main cause of diarrhea syndrome in young calves and an important cause of morbidity and mortality, resulting in considerable economic losses to cattle ranchers. In this series, several enteropathogens may be involved, alone or in association, with Escherichia coli and Salmonella spp. Being two of the main causative agents of this syndrome. In this sense, organic acids and some herbal extracts may be an alternative in the control of diarrhea in neonatal calves, since they present antimicrobial effect. However, organic acids and salts are popular and very well documented in swine and poultry production, but information on the possible effects of these compounds on the control of diarrhea in calves is still unknown. This study aimed to determine the antimicrobial activity of a blend of organic acids, associated or not with herbal extract, in the in vitro control of Escherichia coli and Salmonella spp., agents that cause diarrhea in lactating calves. For the study, standard strains were used: Escherichia coli O157: H7 ATCC 43888 and Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhi CCCD S003, reactivated in Tayer's agar medium and incubated for 24 hours at 37 ° C. The blend of organic acids employed was composed of 25% benzoic acid, 30% formic acid, 25% fumaric acid and 20% silica. The blend of organic acids associated with the plant extracts was composed of 21.2% benzoic acid, 25.5% formic acid, 21.2% fumaric acid, 17.1% silica dioxide and 15% vegetable. In turn, the plant extract was composed of 50% Portuguese chestnut (Castanea sativa) and 50% black acacia (Acacia decurrens). Both were tested in concentrations of 0.00%, 0.40%, 1.70%, 3.20%, 6.25%, 12.50%, 25.00%, 50.00% and 100.00%. The antibacterial activity was done by the disc-diffusion technique and dilution in broth. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined using the microdilution technique in broth, using 96-well microplates. The minimum bactericidal concentration (MBC) was inoculated in Tayer Martin medium, devoid of antimicrobials, carried out in triplicate, being CBM the lowest concentration of the blend of organic acids that presented negative subculture or a mean of 0.1 CFU. The minimum inhibitory concentration was determined to determine the growth of bacteria in the presence of organic acids as a function of time, and the survival curves of Escherichia coli and Salmonella spp were determined. After the analyzes, it was verified that for the Escherichia coli strains tested, the minimum inhibitory concentration (MIC) was 50%, both for the product composed of the blend of organic acids and for the blend of organic acids with addition of the plant extract. The minimum bactericidal concentration (MBC) was 100% for both products tested, that is, it was necessary to use the pure products. In relation to the strains of Salmonella spp. studied, it was verified that both the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bacterial concentration (CBM) were 100% for the evaluated products. It was also observed that the bactericidal effect of the blend of organic acids againstEscherichia coli and Salmonella spp. depends on time of exposure to the product. For E. coli, it was observed that the time required to eliminate 100% of the strains was fourteen hours in the presence of the blend of organic acids and thirteen hours in the compound of organic acids plus plant extract. When strains of Salmonella spp. were exposed to the blend of organic acids at different times, the survival time was eleven hours in the presence of organic acids and thirteen hours in the compound of organic acids plus plant extract.
Biblioteca responsável: BR68.1