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Efeitos do Enriquecimento Nutricional com Riboflavina na Virulência e Resposta de Fungos Entomopatogênicos a Fatores Abióticos de Estresse

JAIME AUGUSTO ALVES RODRIGUES.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-212777

Resumo

Os fatores abióticos de estresse (estresse térmico, radiação UV) podem limitar a eficiência de agentes biológicos utilizados para o controle de artrópodes e por isso discute-se o biocontrole dentro de um contexto de manejo integrado de pragas (MIP), que busca aliar as boas características das diferentes abordagens de controle. Os fungos entomopatogênicos são os maiores representantes do controle microbiano de pragas e o enriquecimento nutricional com diferentes moléculas durante seu cultivo pode influenciar a resposta fisiológica do microrganismo em relação à sua virulência e resposta ao estresse biótico e abiótico. Destaca- se a riboflavina, vitamina que foi capaz de conferir fotoproteção aos conídios de Metarhizium spp. e aumentar a secreção de enzimas envolvidas em processos celulares de tolerância ao estresse. O trabalho buscou evidenciar efeitos de termotolerância, aumento da atividade de proteases e aumento da virulência em três espécies de fungos entomopatogênicos suplementação do substrato com riboflavina. A análise da virulência foi realizada através do cálculo da %mortalidade corrigida de larvas L3 de Tenebrio molitor L. infectadas por imersão Metarhizium robertsii, Beauveria bassiana e Isaria javanica ocasionados pela 5 -1 7 -1 em suspensão de conídios (10 conídios/mL foi observada após estresse térmico (45ºC). A atividade proteolítica do extrato bruto também foi acessada, por espectrofotometria. A atividade proteolítica de I. javanica demonstrou-se ou 10 conídios/mL ). A germinação de conídios variável quanto ao pH, substrato e temperatura de incubação das amostras, demonstrando a variedade biológica de exoenzimas produzidas pelo microrganismo. Ademais, a adição de riboflavina ao substrato foi capaz de aumentar a atividade de proteases do microrganismo. Conídios de fungos cultivados em meio suplementado com a vitamina mostraram-se até 40,8% mais viáveis, após estresse térmico. A virulência variou de acordo com o isolado observado, concentração de conídios e com a suplementação do meio de cultura. A radiação UV-B foi capaz de interferir negativamente na virulência de B. bassiana e I. javanica (p < 0,05). Ademais, a suplementação foi capaz de manter a virulência (p < 0,05) de Beauveria e Isaria (a partir do sétimo e décimo dias, respectivamente), mesmo após exposição à radiação. Estudos proteômicos devem ser realizados para evidenciar o mecanismo pelo o qual a vitamina confere tais efeitos ao fungo.
Abiotic stress factors (heat, UV radiation) may limit the efficacy of biological agents used to control arthropods and, thus, biocontrol is discussed into an integrated pest management (IPM) scenario, Entomopathogenic fungi are important representatives of pest microbial control, and enriched nutritional conditions during cultivation with different molecules might influence the microorganism physiological response, regarding virulence and response against biotic and abiotic stress factors. Among them, riboflavin stands out. The vitamin was capable of protecting Metarhizium spp. conidia against radiation and enhancing secretion of enzymes which allies good characteristics of the different controlling approaches. involved in cellular stress tolerance processes. The study aimed to highlight thermotolerance effects as well as enzymatic activity and virulence enhancement on three different species of entomopathogenic fungi Metarhizium robertsii, Beauveria bassiana e Isaria javanica caused by substrate supplementation with riboflavin. The virulence analysis has been performed through the calculus of %corrected mortality of Tenebrio molitor L. L3 larvae 5 -1 7 -1 immersed in suspensions of conidia (10 conidia/mL germination of conidia has been assessed after thermal stress (45ºC). Enzymatic activity of the crude extract was assessed, via spectrophotometry. Enzymatic activity of I. javanica varied or 10 conidia/mL ). Relative depending on the pH and temperature range, and substrate, demonstrating biological variability of exoenzymes produced by the organism. Furthermore, supplementation with riboflavin enhanced enzymatic activity. Fungi grown in supplemented conditions produced 40.8% more viable conidia after thermal stress. Virulence has varied according to the strain, conidia concentration and substrate supplementation. UV-B radiation was able to interfere in B. bassiana e I. javanica virulence (p < 0,05). In addition, supplementation with riboflavin has maintained virulence (p < 0.05) of Beauveria e Isaria (from seventh and tenth days on, respectively) after radiation exposure. Proteomic studies must be performed in order to highlight the mechanism by which the vitamin is able to confer those effects to the fungi.
Biblioteca responsável: BR68.1