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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-212887

Resumo

O Prochilodus brevis (curimatã comum), espécie de peixe reofílico, vem tendo a sua população natural reduzida devido às ações antrópicas, e apesar de possuir potencial aquícola, sua produção em cativeiro ainda não está bem estabelecida. Portanto, os objetivos deste trabalho foram determinar a dose inseminante e o volume de água (solução ativadora) para otimizar a reprodução em cativeiro de P. brevis; resfriar embriões desta espécie em diferentes soluções crioprotetoras e fases do desenvolvimento embrionário; e caracterizar morfometricamente os embriões. O experimento 1 foi dividido em duas etapas. Na etapa 1, determinou-se a proporção de espermatozoides:ovócito, testando-se seis proporções distintas (3 × 104; 15 × 104; 3 × 105; 3 × 106; 5 × 106; e 1 × 107). Após a definição da melhor dose encontrada na etapa 1, a etapa 2 foi realizada testando-se diferentes volumes de água como solução ativadora (25, 50, 75, 100, 125 e 150 mL de água.2mL de ovócitos-1). Nas duas etapas, foi analisado as taxas de fertilização e eclosão para a definição da melhor dose inseminante e volume da solução ativadora. No experimento 3, foram testadas diferentes soluções crioprotetoras associadas (metanol, DMSO, na concentração de 4,5% ou 9% associados a duas concentrações de sacarose 8,5 e 17% e glicose 8,5%) a dois diferentes estágios do desenvolvimento embrionário (fechamento do blastóporo e aparecimento de vesícula óptica) para a elaboração de um protocolo de resfriamento de embriões. No experimento 1, com resultados obtidos na etapa 1 e 2 observou-se que a proporção de 9,28 ×105 espermatozoides:ovócito e o volume ideal da solução ativadora estimado de 75.64 mL.2mL-1 garantiram boas taxas de fertilização. No experimento 3, não houve interação entre os crioprotetores e o estágio do desenvolvimento embrionário submetido ao resfriamento, podendo ser selecionado ambos os estágios para o resfriamento. Comparando os tratamentos, observou-se que os continham sacarose 17,1% associados ao metanol (4,5% ou 9%) e DMSO (4,5%) apresentaram a menor taxa de embriões degenerados após o resfriamento em relação aos tratamentos com sacarose + glicose 8,5% + 9% DMSO e somente água destilada. No entanto, tais resultados não diferiram dos tratamentos contendo sacarose 17,1% + 9% DMSO e sacarose + glicose 8,5% + 9% metanol. Com resultados obtidos na presente pesquisa, conclui-se que relação de 9,28 ×105 espermatozoides:ovócito associado com o volume de 75,64 mL de água.2mL de ovócitos-1, garantem boas taxas de fertilização na reprodução assistida de P. brevis. Além disso, os embriões de P. brevis podem ser resfriados utilizando sacarose 8,5% ou 17,1% associada a metanol 9% ou a glicose 8,5% + metanol 4,5% + DMSO 4,5% por seis horas de estocagem a -8ºC.

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Prochilodus brevis (Brazilian bocachico), a species of reophilic fish, has had its natural population reduced due to anthropic actions, and despite having aquaculture potential, its captive production is not yet well established. Therefore, the objectives of this work were to determine the inseminating dose and water volume (activating solution) to optimize the captive breeding of P. brevis; cooling embryos of this species in different cryoprotective solutions and stages of embryonic development; and morphometrically characterize the embryos. Experiment 1 was divided into two steps. In step 1, the sperm: oocyte ratio was determined by testing six distinct ratios (3 × 104; 15 × 104; 3 × 105; 3 × 106; 5 × 106; and 1 × 107). After defining the best dose found in step 1, step 2 was performed by testing different volumes of water as activating solution (25, 50, 75, 100, 125 and 150 mL of water.2mL of oocytes-1). In both steps, fertilization rates were analyzed to define the best inseminating dose and volume of activating solution. In experiment 3, different associated cryoprotective solutions (methanol, DMSO at a concentration of 4.5% or 9% associated with two concentrations of sucrose 8.5 and 17% and glucose 8.5%) were tested at two different stages of development. embryonic (blastopore closure and appearance of the optic vesicle) for the elaboration of an embryo cooling protocol. In experiment 1, with results obtained in steps 1 and 2, it was observed that the ratio of 9.28 × 105 sperm: oocyte and the ideal volume of the estimated activating solution of 75.64 mL.2mL-1 guaranteed good fertilization rates. In experiment 3, there was no interaction between cryoprotectants and the stage of embryonic development submitted to cooling, and both stages could be selected for cooling. Comparing the treatments, it was observed that they contained 17.1% sucrose associated with methanol (4.5% or 9%) and DMSO (4.5%) presented the lowest rate of degenerate embryos after cooling compared to treatments with sucrose + 8.5% glucose + 9% DMSO and distilled water only. However, such results did not differ from treatments containing sucrose 17.1% + 9% DMSO and sucrose + 8.5% glucose + 9% methanol. With results obtained in the present research, it can be concluded that a ratio of 9.28 × 105 sperm: oocyte associated with the volume of 75.64 mL of water.2mL of oocytes-1, guarantee good fertilization rates in assisted reproduction of P. brevis In addition, P. brevis embryos may be cooled using 8.5% sucrose or 17.1% associated with 9% methanol or 8.5% glucose + 4.5% methanol + 4.5% DMSO for six hours. storage at -8ºC.

Biblioteca responsável: BR68.1