SPERM CRYOPRESERVATION THROUGHOUT THE SPAWNING SEASON IN Prochilodus lineatus
Thesis
em En
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| ID: vtt-213176
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BR68.1
RESUMO
O objetivo deste trabalho foi determinar a qualidade do sêmen de curimba (Prochilodus lineatus) criopreservado ao longo do período reprodutivo (novembro a março). O sêmen foi coletado mensalmente dos animais (43 machos) após indução hormonal com extrato bruto de hipófise de carpa. O sêmen fresco foi avaliado subjetivamente quanto a sua motilidade, vigor, duração da motilidade e morfologia. O sêmen foi criopreservado em palhetas de 0,5 mL (n=258) utilizando-se metilglicol como crioprotetor e solução de glicose como diluidor. O sêmen descongelado foi avaliado quanto a sua motilidade, velocidades (curvilínea VCL, linear progressiva VSL, média VAP) e frequência de batimento flagelar cruzado (BCF) por meio de um sistema de análise espermática computadorizada (CASA). O sêmen descongelado também foi analisado quanto a sua morfologia, estresse oxidativo (peroxidação lipídica LPO, espécies reativas de oxigênio ROS, superóxido desmutase SOD e catalase CAT) e capacidade de fertilização (taxas de fertilização e eclosão). O plasma seminal foi analisado quanto ao seu pH, osmolalidade e concentração iônica (Na+, K+, Ca2+ e Mg2+). O sêmen fresco de curimba apresentou alta qualidade durante o período reprodutivo, com taxa de motilidade espermática superior a 80%, e a qualidade do sêmen congelado foi afetada ao longo da estação reprodutiva. O sêmen criopreservado apresentou maiores (p<0.05) motilidade e VCL de dezembro a março. Correlações negativas (p<0.01) foram observadas entre a concentração espermática e a motilidade espermática, concentração espermática e a VCL, e concentração de íons Ca2+ no plasma seminal e motilidade espermática. A concentração espermática foi positivamente correlacionada (p<0.01) com a concentração de íons Ca2+ no plasma seminal, CAT e ROS. CAT e fertilidade também se correlacionaram positivamente (p<0.05). O aumento da CAT foi eficiente em reduzir as ROS e a LPO nas amostras criopreservadas em novembro, e manteve a capacidade de fertilização espermática, apesar de a atividade das ROS ter afetado a motilidade e a VCL. Fatores climáticos registrados no período que antecedeu a estação reprodutiva também afetaram a qualidade das amostras criopreservadas no início do período. Apesar de o sêmen fresco e criopreservado terem apresentado baixo percentual de células normais em março, as amostras apresentaram boa qualidade neste mês, com alta motilidade, vigor e VCL. O sêmen de P. lineatus criopreservado de dezembro a março exibe características mais favoráveis para ser submetido ao estresse induzido pela criopreservação.
ABSTRACT
The aim of this study was to determine the quality of Prochilodus lineatus sperm cryopreserved throughout the reproductive season (November to March). Males (n=43) were monthly handstripped after carp pituitary treatment. Fresh sperm was subjectively analyzed for its motility rate, motility quality score, duration of motility and morphology. Sperm was cryopreserved on 0.5 mL straws (n=258) using methyl glycol as cryoprotectant and glucose solution as extender. Post-thaw sperm was analyzed for its motility rate, velocities (curvilinear VCL; straight-line VSL; average path VAP), and beat cross frequency (BCF) using a Computer-Assisted Sperm Analyzer (CASA). Frozen sperm morphology, oxidative stress (lipid peroxidation LPO; reactive oxygen species ROS; superoxide dismutase SOD; catalase CAT), and fertilization capacity (fertilization and hatching rates) were also evaluated. Seminal plasma was analyzed for pH, osmolality and ion concentration (Na+, K+, Ca2+ and Mg2+). P. lineatus fresh sperm presented good quality during the reproductive season, exhibiting motility rates above 80%, and post-thaw sperm quality was affected throughout the spawning season. Post-thaw sperm yielded higher (p<0.05) motility and VCL on December to March. Negative correlations were observed between sperm concentration and frozen sperm motility, sperm concentration and VCL, and Ca2+ concentration on seminal plasma and frozen sperm motility (p<0.01). Sperm concentration was positively correlated with Ca2+ concentration, CAT and ROS (p<0.01). CAT and fertility correlated positively (p<0.05). Increased CAT was efficient in reducing ROS and LPO in samples frozen in November, and maintained sperm fertilization capacity, although ROS activity affected sperm motility and VCL. Climate factors registered before the reproductive season also affected the quality of samples frozen at the beginning of the season. Although both fresh and post-thaw semen presented lower percentages of normal sperm cells on March, samples yielded good quality parameters such as motility rate, motility quality score, and VCL on this month. P. lineatus sperm cryopreserved from December to March exhibits better characteristics to undergo the stress induced by cryopreservation.
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VETTESES
Idioma:
En
Ano de publicação:
2019
Tipo de documento:
Thesis