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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-213725

Resumo

A doença de Marek (Mareks disease, MD), é uma enfermidade oncogênica e imunossupressora, causada pelo Gallid alphaherpesvirus 2 (GaHV-2), que possui uma significativa importância econômica para a indústria avícola. Os encargos econômicos são por perdas diretas de mortalidade, condenações das carcaças de frangos ao abate, queda na produção de ovos e, bem como, indiretas pelo custo de prevenção da utilização generalizada de vacinas e medidas de controle. Os surtos esporádicos e repetidos nos últimos anos, principalmente em lotes de poedeiras comerciais e matrizes pesadas vacinadas, tem ocorrido em diferentes países e continentes. No Brasil, há poucos relatos e informações a respeito da ocorrência da enfermidade. O diagnóstico da MD e diferencial a outras doenças oncogênicas, envolve os sinais clínicos, lesões macroscópicas, histopatologia e técnicas moleculares. Novas abordagens como a metagenômica têm sido propostas para auxiliar no conhecimento do agente etiológico e suas interações com o microbioma das aves. O sequenciamento de alto desempenho (high throughput sequencing; HTS) ou de nova geração (Next Generation Sequencing; NGS), com o apoio de ferramentas de bioinformática, tornam possível a utilização da abordagem metagenômica para identificar o microbioma de uma determinada amostra biológica, independentemente de cultivo dos microrganismos. Visando contribuir para o conhecimento da MD no Brasil e a interação do vírus imunossupressor GaHV-2 sobre o microbioma das aves, no presente trabalho foi apresentado um relato de um surto esporádico da MD em poedeiras comerciais e análises metagenômicas de órgãos de poedeiras comerciais saudáveis ou afetadas pela MD. A tese está dividida em três capítulos. O primeiro capítulo apresenta uma revisão bibliográfica sobre a MD. O segundo capítulo, intitulado Um surto da doença de Marek em poedeiras comerciais vacinadas, no sul do Brasil, descreve um relato sobre os achados epidemiológicos, clínicos, patológicos e moleculares em um surto esporádico da MD em poedeiras comerciais vacinadas. Os resultados demonstraram que o surto esporádico foi caracterizado como MD tardia em poedeiras comerciais adultas, na epidemiologia pela ocorrência às 38 semanas de idade, e classificado como síndrome neoplásica induzida pelo MDV. A presença de uma cepa patogênica do GaHV-2 foi confirmada e maiores cargas virais encontrads em tecidos com lesões e tumores. A infecção pelo GaHV-2 continua causando, mesmo em aves vacinadas para a MD, sinais clínicos e lesões características, e consequentemente, pela mortalidade e queda na produção de ovos, perdas econômicas aos produtores e a indústria de ovos, no sul do Barsil. A ocorrência deste surto esporádico da MD sugere estar associada as falhas de biosseguridade e vacinação. Por fim, o terceiro capítulo, intitulado Análises metagenômicas em poedeiras comerciais saudáveis ou afetadas pela doença de Marek descreve a utilização do NGS para analisar o microbioma de órgãos de poedeiras comerciais saudáveis e comparar estes achados com os obtidos em aves afetadas pela MD. Os achados deste estudo indicam que poedeiras comerciais afetadas pela MD possuem maior abundância de genomas representativos de famílias virais e bacterinas em órgãos, do que aves saudáveis. A infecção pelo GaHV-2 conduziu a uma modulação do microbioma dos órgãos das aves, favorecendo coinfecções por bactérias patogênicas de interesse em saúde pública.

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Marek's disease (MD) is an oncogenic and immunosuppressive disease, caused by Gallid alphaherpesvirus 2 (GaHV-2), which is of significant economic importance to the poultry industry. The economic burden is due to direct losses of mortality, condemnation of chicken carcasses to slaughter, drop in egg production and, as well as, indirect by the cost of preventing the widespread use of vaccines and control measures. The sporadic and repeated outbreaks in recent years, especially in flocks of vaccinated commercial layers and broiler breeders, have occurred in different countries and continents. In Brazil, there are few reports and information regarding the occurrence of the disease. The diagnosis of MD and differential to other oncogenic diseases involves clinical signs, macroscopic lesions, histopathology and molecular techniques. New approaches such as metagenomics have been proposed to assist in the knowledge of the etiological agent and its interactions with the microbiome of birds. High throughput sequencing (HTS) or Next Generation Sequencing (NGS), with the support of bioinformatics tools, make it possible to use the metagenomic approach to identify the microbiome of a given biological sample, regardless of the culture of the microorganisms. Aiming to contribute to the knowledge of DM in Brazil and the interaction of the immunosuppressive virus GaHV-2 on the bird microbiome, in the present study a report of a sporadic outbreak of DM in commercial layers and metagenomic analyses of healthy or MD affected commercial layers organs was presented. The thesis is divided into three chapters. The first chapter presents a literature review on DM. The second chapter, entitled "An outbreak of Marek disease in vaccinated commercial layers in southern Brazil," describes a report on epidemiological, clinical, pathological and molecular findings in a sporadic outbreak of DM in vaccinated commercial layers. The results showed that the sporadic outbreak was characterized as late MD in adult commercial layers, in epidemiology by occurrence at 38 weeks of age, and classified as MDV-induced neoplastic syndrome. The presence of a pathogenic strain of GaHV-2 was confirmed and higher viral loads were found in tissues with lesions and tumors. GaHV-2 infection continues to cause, even in birds vaccinated for MD, clinical signs and characteristic lesions, and consequently, by mortality and decline in egg production, economic losses to producers and the egg industry in southern Barsil. The occurrence of this sporadic outbreak of MD suggests that biosecurity and vaccination failures are associated. Finally, the third chapter, entitled "Metagenomic analysis in commercial layers healthy or affected by Marek disease" describes the use of NGS to analyze the microbiome of healthy commercial layer organs and compare these findings with those obtained in birds affected by MD. The findings of this study indicate that commercial layers affected by DM have greater abundance of genomes representative of viral and bacterial families in organs than healthy birds. GaHV-2 infection led to a modulation of the bird organ microbiome, favoring co-infections by pathogenic bacteria of public health interest.

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