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Ovarian aging in growth hormone receptor knockout mice supplemented with 17-Estradiol

JOSE VICTOR VIEIRA ISOLA.
Tese em Inglês | VETTESES | ID: vtt-213748

Resumo

Camundongos knockout para o gene do receptor do hormônio de crescimento (GH) (GHRKO) têm atividade de GH ausente. Estes camundongos são o principal modelo para acessar os efeitos do GH e são conhecidos por terem maior longevidade e as fêmeas apresentarem vida reprodutiva prolongada. O 17-estradiol (17-E2) é um hormônio capaz de prolongar a longevidade dos camundongos. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a reserva ovariana, em ovários de camundongos normais e GHRKO suplementados ou não com 17-estradiol. Nossa hipótese era que o knok out do GHR e o tratamento com 17-estradiol diminuiriam a ativação de folículos primordiais de forma complementar em camundongos.Seis camundongos GHRKO e seis camundongos wild-type (WT) foram divididos em quatro grupos: camundongos normais GHRKO (GHRKO; n = 3), camundongos GHRKO suplementados com 17-E2 (GHRKO-E2; n = 3), wild-type (WT) camundongos com dieta normal (WT; n = 3) e camundongos WT suplementados com 17-E2 (WT-E2; n = 3). E2 foi fornecido na comida durante quatro meses. Lâminas histológicas foram preparadas a partir dos ovários dos camundongos. Imagens das seções ovarianas foram capturadas por uma câmera acoplada a um microscópio, e os folículos foram contados e medidos. A análise estatística considerou o efeito do genótipo (GHRKO vs WT), tratamento (E2 vs CONT) e sua interação. Tanto o genótipo (p = 0,0117) quanto a dieta (p = 0,0136) tiveram efeito no número de folículos primordiais e na interação entre eles (p = 0,004). O número de folículos primordiais foi maior no grupo GHRKO-CONT (2632 ± 181) do que nos outros grupos. O tratamento com 17a-E2 reduziu o n�ero de fol�ulos primordiais nos ratinhos GHRKO para um n�el semelhante ao WT, mas n� teve efeito nos ratinhos WT. Camundongos WT tiveram um número maior de folículos primários do que ratos GHRKO (p = 0,006). A dieta 17-E2 não exerceu efeito sobre o número de folículos primários (p = 0,785). Em síntese, camundongos GHRKO não tratados tiveram um aumento na reserva ovariana do que os camundongos WT. No entanto, os genótipos tratados com 17-E2 responderam diferentemente. Quando tratado, grupo GHRKO diminuiu a reserva de folículos primordiais enquanto os camundongos WT mantiveram o número de folículos primordiais, o que indica que o 17-E2 tem um papel na ativação folicular que não atua da mesma forma quando os níveis de GH/IGF são baixos.
Mice with growth hormone (GH) receptor gene disruption (GHRKO) have absent GH activity. These mice are the main model to access the effects of GH and are known for having extended lifespan and female reproductive longevity. 17-estradiol (17-E2) is a molecule reported to extend mice lifespan. Hence, the aim of this study was to evaluate the ovarian reserve, in ovaries of normal and GHRKO mice supplemented or not with 17-estradiol. Our hypothesis was that GHR disruption and 17-Estradiol treatment would decrease the activation of primordial follicles in a complementary way in mice. Six GHRKO mice and six wild-type (WT) mice were divided into four groups: GHRKO mice normal diet (GHRKO; n=3), GHRKO mice supplemented with 17-E2 (GHRKO-E2; n=3), WT mice normal diet (WT; n=3) and WT mice supplemented with 17-E2 (WT-E2; n=3). E2 was provided in the food for four months. Histological slides were prepared from the mice ovaries. Images of the ovarian sections were captured by a camera coupled to a microscope, and the follicles were counted and measured. The statistical analysis considered the effect of the genotype (GHRKO vs WT), treatment (E2 vs CONT) and its interaction. Both genotype (p=0.0117) and diet (p=0.0136) had effects on the number of primordial follicles count as well as the interaction between them (p=0.004). The number of primordial follicles was higher on the GHRKO-CONT group (2632±181) than in the other groups. 17-E2 treatment reduced the number of primordial follicles in the GHRKO mice to a level similar to WT, but had no effect on WT mice. WT mice had a higher number of primary follicles than GHRKO mice (p=0.006). 17-E2 diet exerted no effect on the number of primary follicles (p=0.785). In summary, non-treated GHRKO mice had an increased primordial follicle reserve than WT mice. However, the genotypes treated with 17-E2 responded differently, GHRKO decreased the primordial follicle reserve and WT mice maintained the primordial follicles number, which indicates that 17-E2 has a differential role on follicle activation when there is a lack of GH /IGF-I.
Biblioteca responsável: BR68.1