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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-213750

Resumo

Problemas de infertilidade são comuns em vacas leiteiras, principalmente naquelas com alta produtividade, que possuem um metabolismo acelerado metabolizam mais rapidamente hormônios esteroides, como estradiol (E2) e progesterona (P4). Técnicas como a inseminação artificial intrafolicular (IAIF) e a prolongada exposição a estrógenos em protocolos de indução artificial da lactação (IAL) tem demostrado resultados promissores como alternativas para reverter estes quadros. No primeiro estudo, objetivou-se avaliar a motilidade de espermatozoides após inseminação artificial intrafolicular (IAIF) in vivo ou após incubação em fluído folicular, in vitro. A recuperação do conteúdo folicular foi realizada 1 a 4 h após a IAIF, para avaliação da motilidade espermática in vivo. Posteriormente, os espermatozoides de um pool de doses comerciais foram avaliados quanto à sua cinética após incubação in vitro, puros (em pool) ou em fluído folicular (FF), por até 3 h. A motilidade dos espermatozoides foi reduzida, tanto in vitro como in vivo, permitindo concluir que o folículo ovariano e o FF não proporcionam um ambiente adequado para a manutenção da motilidade dos espermatozoides bovinos. O segundo estudo, teve como objetivo determinar os níveis séricos de E2 e P4 em vacas submetidas a longos períodos de exposição ao estrógeno, bem como identificar as alterações no perfil gênico e celular do endométrio das vacas expostas a IAL. As vacas apresentavam 51,4 ± 11,0 pg/ml de estradiol no dia (D) 0, mas apresentaram níveis maiores nos dias 2, 4, 8, 10 e 13 após o tratamento (P < 0,05), atingindo até 4.000 pg/ml no D4. Os níveis de P4 foram superiores a 6 ng/ml no D0 e, durante o período de aplicação hormonal, as vacas induzidas mantiveram níveis acima de 6 ng/ml, retornando aos níveis basais no D8. Após o tratamento, o receptor OXTR (ocitocina) apresentou menor expressão (P < 0,05), enquanto o receptor PGR (progesterona) e o gene SERPINA14 apresentaram um leve aumento na expressão (P < 0,07). A modulação gênica exercida nos receptores de OXTR, PRG e no gene de SERPINA14 sugerem que a prolongada exposição a estrógenos influencia o ambiente uterino de vacas submetidas a protocolos de IAL, com efeitos positivos sobre sua fertilidade subsequente. A prolongada exposição a estrógenos não foi capaz de induzir modificações no padrão celular e na resposta imune no endométrio de vacas no proestro depois do tratamento. O presente estudo fornece informações a respeito da utilização de IAIF em bovinos para que futuros estudos sejam realizados. Ainda, fornece dados referentes ao perfil endócrino de vacas expostas a prolongada exposição a estrógenos, bem como as alterações promovidas por esta exposição na expressão gênica do endométrio e no seu perfil celular.

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Infertility problems are common in dairy cows, especially on high-yielding cows, who have accelerated metabolism of steroid hormones, such as estradiol (E2) and progesterone (P4). Techniques such as intrafollicular artificial insemination (IFAI) and prolonged exposure to estrogens in artificial lactation induction (ALI) protocols have shown promising results as alternatives to reverse previous infertility. In a first study, the objective was to evaluate sperm motility in vivo after IFAI or after incubation in follicular fluid in vitro. Aspiration to recover follicular content was conducted 1 to 4 h after IFAI to evaluate sperm motility. Thereafter, kinetics of pooled spermatozoa from commercial frozen-thawed semen doses were evaluated after incubation in follicular fluid (FF) or pure (control) for 1 to 3 h. Reduced sperm motility was observed both in vitro and in vivo, leading to the conclusion that both ovarian follicles and FF do not provide an adequate environment to maintain bull sperm motility. The second study had the objective to determine the serum levels of E2 and P4 in cows submitted to long periods of estrogen exposure and to identify changes in the gene and cell profile of the endometrium of cows exposed to ALI. Cows presented 51.4 ± 11,0 pg/ml of E2 at the D0, but achieved greater levels at days 2, 4, 8, 10 and 13 (P <0.05), reaching up to 4,000 pg/ml at D4. Levels of P4 were greater than 6 ng/ml at D0 and during the entire treatment period, returning to basal levels at D8. After treatment, the OXTR receptor (oxytocin) presented lower expression (P <0.05), whereas the PGR (progesterone) receptor and the SERPINA14 gene presented a slightly increased expression (P <0.07). The gene modulation of the OXTR, PRG and SERPINA14 receptors suggests that prolonged estrogen exposure influences the uterine environment of cows submitted to ALI, with positive effects on their subsequent fertility. Prolonged estrogen exposure was not able to induce modifications in the cell pattern and immune response in the endometrium of cows in proestrus after treatment. The present study provides information on the use of IFAI in cattle for future studies. Furthermore, it provides data regarding the endocrine profile of cows exposed to prolonged exposure to estrogens, as well as the changes promoted by this exposure in the gene expression of the endometrium and its cellular profile.

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