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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-215203

Resumo

Neste estudo o sêmen de Hypancistrus zebra foi avaliado pela primeira vez, sendo caracterizado quanto aos parâmetros de qualidade espermática: taxa e duração da motilidade espermática, vigor espermático, integridade de membrana e morfologia espermática. Essa avaliação foi realizada em quatro momentos de coleta do sêmen no período de um ano (março de 2016; outubro de 2016; dezembro de 2016 e março de 2017), gerando o Capítulo I deste estudo. No Capítulo II, foram testadas a ativação e a inibição da motilidade espermática, soluções diluidoras e o resfriamento do sêmen de H. zebra, servindo de base para definir os protocolos de congelamento a serem testados. Estes, por sua vez, são abordados no Capítulo III, o qual testou o tempo de equilíbrio e a concentração das soluções crioprotetoras. Em todos os experimentos, os parâmetros de qualidade espermática foram avaliados antes e após a exposição aos tratamentos. Os espermatozoides de H. zebra apresentaram vigor espermático intermediário (3,00 ± 0,13) e uma longa duração da motilidade (14,72 ± 1,31 minutos), características incomuns de serem observadas em peixes de água doce. Os resultados obtidos no Capítulo I permitem concluir que o sêmen de H. zebra é de boa qualidade em qualquer época do ano, possibilitando o seu uso para a reprodução artificial e criopreservação. No Capítulo II, determinamos que a solução ativadora adequada ao sêmen de H. zebra é o NaCl 0,3%. O teste de inibição da motilidade mostrou que as soluções com osmolalidade inferior a 287,5 mOsm kg-1 são ativadoras e as soluções com osmolalidade superior são inibidoras da motilidade espermática para o sêmen da espécie. A solução de Hank (HBSS) foi o meio diluidor mais eficiente, podendo o sêmen permanecer estocado resfriado por até 72 horas. Os resultados do Capítulo III confirmam que o espermatozoide de H. zebra é muito sensível à exposição aos crioprotetores, sendo o tempo de equilíbrio de 5 minutos o mais adequado. Foi alcançado êxito no congelamento do sêmen utilizando os crioprotetores dimetilformamida 5% e dimetilsulfóxido 10%, resultando em aproximadamente 25% de células vivas. Esse resultado torna possível a formação de um banco de germoplasma para essa espécie ameaçada de extinção, permitindo a estocagem do sêmen e sua utilização para reprodução in vitro.

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In this study, Hypancistrus zebra semen was evaluated for the first time, being characterized in terms of rate and duration of sperm motility, sperm vigor, membrane integrity and sperm morphology. This evaluation was carried out in four moments of semen collection over a year (March 2016, October 2016, December 2016 and March 2017), resulting the Chapter I of this study. In Chapter II, the activation and inhibition of sperm motility, extender solutions and the cooling of the H. zebra semen were tested, serving as the basis for defining the freezing protocols to be tested. These protocols are covered in Chapter III, which tested the equilibrium time and concentration of the cryoprotectant solutions. In all experiments, sperm quality parameters were evaluated before and after exposure to treatments. The spermatozoa of H. zebra presented intermediate sperm vigor (3.00 ± 0.13) and a long duration of motility (14.72 ± 1.31 min), unusual characteristics to be observed in freshwater fish. The results obtained in Chapter I allow us to conclude that H. zebra semen is of good quality at any time of the year, allowing its use for artificial reproduction and cryopreservation. In Chapter II, we determined that the adequate activating solution to the H. zebra semen is 0.3% NaCl. The motility inhibition test showed that solutions with osmolality lower than 287.5 mOsm/kg are activators and solutions with higher osmolality are inhibitors of sperm motility for the species. Hank's solution was the most efficient extender medium, and the semen could be stored for up to 72 hours. The results of Chapter III confirm that the spermatozoa of H. zebra are very sensitive to exposure to cryoprotectants, with the equilibrium time of 5 minutes being the most adequate. Success in semen freezing was achieved using 5% dimethyl formamide and 10% dimethyl sulfoxide as cryoprotectants, resulting in approximately 25% live cells. This result makes possible the formation of a germplasm bank for this endangered species, allowing the semen storage and its use for in vitro reproduction.

Biblioteca responsável: BR68.1