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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-216290

Resumo

Quando comparado ao leite bovino, o leite bubalino apresenta vantagens nutricionais, tais como altos níveis de gordura, proteínas e minerais. Devido ao alto valor agregado e da menor disponibilidade do leite bubalino, há ocorrência de fraudes em seus derivados por adição de leite bovino. Além disso, a riqueza nutricional do leite também favorece a proliferação de diversos micro-organismos, com destaque para Listeria monocytogenes, agente causador da listeriose, uma doença grave, que pode atingir principalmente gestantes, neonatos, idosos e imunodeprimidos. Entre os métodos de detecção de fraudes e de agentes microbianos, a PCR multiplex surge como uma ferramenta para a detecção simultânea de várias sequências de DNA diferentes, em uma única reação. Por esta razão, o objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma PCR multiplex para a detecção simultânea de Listeria monocytogenes e de fraude em queijos bubalinos por adição de leite bovino, através da produção de queijos fraudados e contaminados experimentalmente. Para isso foram produzidos queijos com diferentes porcentagens de leite bubalino e bovino, os quais foram contaminação com cepa padrão de Listeria monocytogenes e que, posteriormente, foram submetidos a extração de DNA, a fim de se determinar o limite de detecção da mPCR proposta. Com os resultados obtidos, pode-se concluir que é possível a detecção simultânea das três espécies em uma única reação, sendo a metodologia proposta uma alternativa para a análise de queijos comercialmente disponíveis.

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Cheese is one of the main dairy products, being widely appreciated and consumed by a large part of the population. The production of buffalo milk and its derivatives has recently been gaining prominence because, when compared to bovine milk, buffalo milk has superior nutritional advantages, such as high levels of fat, protein and minerals. Due to the high value added and the lower availability of buffalo milk, frauds in their derivatives are occurring by addition of bovine milk. The nutritional richness of milk also favors the proliferation of several microorganisms, especially Listeria monocytogenes, a causative agent of listeriosis, a serious disease that can reach mainly pregnant women, neonates, the elderly and immunosuppressed women. Multiplex PCR appears as a tool for the simultaneous detection of several different DNA sequences in a single reaction. The objective of the present work was to develop a multiplex PCR for the simultaneous detection of Listeria monocytogenes and cheese cheeses by the addition of bovine milk through the production of cheeses experimentally contaminated. For this, cheeses with different percentages of buffalo and bovine milk will be produced, which were contaminated with the standard strain of of Listeria monocytogenes and subjected to DNA extraction to determine the limit of detection through PCR. With the obtained results, it is possible to conclude that it is possible the simultaneous detection of the three species in a single reaction, being the proposed methodology an alternative for the analysis of commercially available cheeses.

Biblioteca responsável: BR68.1