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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-216341

Resumo

Resumo: A refrigeração é a forma mais utilizada para a preservação do sêmen suíno empregado nas inseminações artificiais. Substâncias protetoras presentes nos diluidores comerciais atuam cada vez mais em favor da manutenção da viabilidade celular durante esta etapa. Entretanto, embora alterações estruturais e principalmente funcionais muitas vezes não sejam identificadas nas análises empregadas rotineiramente para avaliação da qualidade seminal, a ocorrência das mesmas em resposta as baixas temperaturas de armazenamento e seus efeitos diretos sobre a capacidade fertilizante do espermatozoide tem sido relatados. Em paralelo, uma gama de estudos buscando identificar possíveis ações do plasma seminal sobre a célula espermática in vitro, gera ainda resultados bastante controversos. Diante disso, o presente trabalho buscou avaliar como a presença ou não do plasma seminal durante o processo de refrigeração pode influenciar sobre a resposta do espermatozoide suíno aos eventos de capacitação e hiperativação espermática. Para isso, após serem mantidos sobre refrigeração à 17 °C por 72 horas, na presença ou não do plasma seminal, espermatozoides foram submetidos à capacitação in vitro e ao decorrer desta, avaliados quanto às características de motilidade pela análise computadorizada do sêmen (CASA); e funcionalidade celular por citometria de fluxo. Resultados obtidos à partir das análises de desordem lipídica, translocação da fosfatidilserina e permeabilidade da membrana plasmática mostraram que espermatozoides suínos refrigerados são capazes de responder à capacitação in vitro de forma semelhante, independente de prévia manutenção ou não, com o plasma seminal. Para os parâmetros de motilidade, bem como o estudo da população espermática hiperativada, foram apresentados resultados semelhantes entre ambos os grupos, o que demonstra a não influencia da prévia exposição ao plasma seminal sobre a mudança do padrão de motilidade espermática. Além disso, parâmetros qualitativos avaliados neste estudo suportam nossa afirmação de que, a ausência de interação entre o espermatozoide suíno e os componentes do plasma seminal durante seu armazenamento não reflete em qualquer efeito prejudicial sobre a qualidade do espermatozoide quando avaliada sob condições de capacitação in vitro, podendo ainda ser observada maior resistência às lesões de acrossoma em espermatozoides preservados sob esta condição (P < 0,05). O presente trabalho concluiu que a remoção do plasma seminal previamente ao seu armazenamento à 17 °C por 72 horas não é prejudicial à qualidade e funcionalidade espermática.

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Abstract: Liquid storage is the main form of preservation of boar sperm prior to its use in artificial insemination. Commercial extenders increasingly work in favor of maintaining sperm viability during this period by its protective substances. However, although structural and mainly functional changes are often not identified in the routine semen evaluation, their occurrence in response to low storage temperatures and their direct effects on sperm fertilizing ability have been reported. In view of this, in vitro studies aiming to identify possible actions of seminal plasma as modulator of sperm function have yielded controversial results. Therefore, the present work aimed to evaluate how the presence or absence of seminal plasma during the liquid storage may influence the responsiveness of spermatozoa to capacitation and hyperactivation events. For this, liquid boar sperm stored at 17 °C for 72 hours in the presence or not of the seminal plasma were submitted to in vitro capacitation. During the course, sperm motility characteristics were evaluated by Computer-Assisted Semen Analysis (CASA) and sperm functionality by flow cytometry. Results obtained from lipid disorder, phosphatidylserine translocation and plasma membrane permeability analyzes have shown that liquid boar sperm stored in the presence or not of seminal plasma are able to respond to in vitro capacitation in a similar way. For motility parameters including the study of hyperactivated boar sperm, results were similar for both groups, demonstrating that previous exposure to seminal plasma was not able to influence on sperm motility pattern. In addition, semen quality parameters evaluated in this study support our current observations that the absence of interaction between spermatozoa and components of seminal plasma during liquid storage does not reflect any detrimental effect on sperm quality when evaluated under conditions of in vitro capacitation. Furthermore, boar sperm stored under this condition present a greater resistance to acrosome damages when compared to others (P < 0.05). Therefore, the present study concluded that the removal of seminal plasma prior to liquid storage at 17 °C for 72 hours is not detrimental to sperm quality and functionality.

Biblioteca responsável: BR68.1