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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-216427

Resumo

O vírus da leucemia viral felina (FeLV) tem distribuição mundial e pode causar diferentes tipos de alterações no organismo, sejam elas neoplásicas (linfoma, fibrossarcoma e doenças mieloproliferativas) ou não neoplásicas como anemia regenerativa ou arregenerativa. Além disso, podem causar imunossupressão e tornar os gatos mais susceptíveis às infecções oportunistas, como coinfecções com protozoários. A transmissão da FeLV ocorre principalmente pela saliva contaminada. Os objetivos do presente estudo foram avaliar as alterações hematológicas relacionadas ao vírus da FeLV, descrever as características funcionais, citológicas e imunofenotípicas das células hematopoéticas da medula óssea em gatos negativos e positivos para FeLV, assim como determinar a ocorrência dos retrovírus FIV (vírus da imunodeficiência felina) e FeLV e a coinfecção pelos protozoários Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Sarcocystis neurona em gatos no sul do Brasil. Para isso, o presente trabalho foi divido em três capítulos. No primeiro capítulo, um total de 142 gatos domésticos foram testados por PCR em tempo real (qPCR) para detectar a infecção pelo vírus da FeLV e pelo vírus da imunodeficiência felina (FIV). No segundo capítulo, foram coletadas amostras de medula óssea de 19 gatos, sendo 12 negativos e sete positivos para FeLV, considerando resultados por imunoabsorção enzimática (ELISA) e qPCR, e realizado mielograma, ensaio clonogênico, imunofenotipagem por citometria de fluxo e análise de carga viral, sendo esta última avaliada no sangue também. No terceiro capítulo, em 167 gatos domésticos foi realizado teste sorógico por ELISA para detecção de FIV e FeLV, e realizadas sorologia por reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para detecção de T. gondii, N. caninum e S. neurona. Dos 142 gatos do primeiro capítulo, o vírus da FeLV foi encontrado em 41 (28,8%) animais. Entre os animais positivos, 27 (19%), 55,5% tinham anemia. As alterações mais prevalentes nestes 41 gatos positivos para FeLV foram anemia, anisocitose, neutrofilia e linfopenia. Nas amostras de medula óssea do segundo capítulo não houve diferença com relação ao crescimento de unidades formadoras de colônias em gatos portadores ou não do vírus. Das sete amostras de medula óssea dos gatos FeLV positivos, em duas verificou-se hipoplasia granulocítica e hiperplasia eritróide. No gato com hiperplasia eritróide foi encontrada a maior carga viral/mL no sangue (2.352.025.174,98) e na medula óssea (1.640.070.897,77). Na caracterização imunofenotípica os marcadores que apresentaram diferença foram o CD8, CD19 e o CD45 que foram mais expressivos em gatos infectados pelo vírus da FeLV. Verificou-se que em gatos infectados pelo vírus da leucemia felina na medula óssea, não houve interferência no desenvolvimento de células precursoras. A maior carga viral foi observada na medula óssea de um gato com hiperplasia eritróide e anemia não regenerativa, demonstrando que apesar da alta produção de células eritróides na medula óssea, o vírus em alta quantidade não permite a maturação das células no sangue periférico. Dos 167 gatos do terceiro capítulo, 27% (45/167) foram soropositivos para T.gondii; 29,3% (49/167) para N. caninum e 3,6% (6/167) para S.neurona. O vírus da FeLV foi detectado em 24,6% e da FIV em 1,7% destes gatos. Os gatos do sul do Brasil foram expostos aos protozoários T. gondii, N. caninum e S. neurona. Observou-se maior ocorrência de anticorpos para T. gondii do que em estudos anteriores realizados na mesma região. O presente estudo demonstrou a maior ocorrência de anticorpos anti N.caninum em gatos do Brasil. A soropositividade para S. neurona é o primeiro relato em gatos no sul do Brasil. Verificou-se coinfecção por mais de um protozoário. Foi observada soropositividade com diferença estatística (p<0,05) entre o protozoário N. caninum e o retrovírus FeLV. Foi notável a maior ocorrência (p=0,1) da FeLV em gatos semidomiciliados, condizente com o estudos que observaram o acesso a rua como fator de risco para este vírus. Entre os machos e fêmeas, não foi observada maior positividade para os agentes, exceto para S. neurona que foi observada maior prevalência para fêmeas. A análise da carga viral da medula óssea, das alterações hematológicas, e das coinfecções relacionadas ao vírus da FeLV devem ser realizadas com mais frequência em estudos científicos e na rotina clínica. Estes dados são de extrema importância para entendermos o modo de ação do vírus e, conseqüentemente, obter prognósticos mais precisos e, futuramente, tratamento.

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Feline viral leukemia virus (FeLV) has a worldwide distribution and can cause different types of abnormalities in the body, whether they are neoplastic (lymphoma, fibrosarcoma and myeloproliferative diseases) or non-neoplastic, such as regenerative or arregenerative anemia. In addition, they can cause immunosuppression and make cats more susceptible to opportunistic infections, such as coinfections with protozoa. The transmission of FeLV occurs mainly by contaminated saliva. The objectives of the present study were to evaluate the hematological changes related to the FeLV virus, to describe the functional, cytological and immunophenotypic characteristics of hematopoietic cells of the bone marrow in FeLV positive and negative cats, as to determine the occurrence of the retrovirus FIV (feline immunodeficincy virus) and FeLV and coinfection by the protozoa Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Sarcocystis neurona in cats in southern Brazil. For this, the present work was divided in three chapters. In the first chapter, a total of 142 domestic cats were tested by real-time PCR (qPCR) to detect infection by FeLV virus and feline immunodeficiency virus (FIV). In the second chapter, bone marrow samples were collected from 19 cats, 12 negative and 7 positive for FeLV, considering results by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and qPCR, and myelogram, clonogenic assay, flow cytometric immunophenotyping and load analysis viral activity, the latter being evaluated in the blood as well. In the third chapter, 167 domestic cats were tested by ELISA for FIV and FeLV, and indirect immunofluorescence (IFR) serology was performed for the detection of T. gondii, N. caninum and S. neurona. Of the 142 cats in the first chapter, FeLV virus was found in 41 (28.8%) animals. Among the positive animals, 27 (19%),55.5% had anemia. The most prevalent changes in these 41 FeLV positive cats were anemia, anisocytosis, neutrophilia and lymphopenia. In the samples of bone marrow of the second chapter there was no difference with respect to the growth of colony forming units in cats with or without virus. Of the seven bone marrow samples from FeLV-positive cats, two showed granulocytic hypoplasia and erythroid hyperplasia. In the cat with erythroid hyperplasia, the highest viral load / mL was found in the blood (2.352.025.174.98) and in the bone marrow (1.640.070.897.77). In the immunophenotypic characterization the markers that showed difference were the CD8, CD19 and CD45 that were more expressive in cats infected with FeLV virus. It was found that in cats infected with the feline leukemia virus in the bone marrow, there was no interference in the development of precursor cells. The highest viral load was observed in the bone marrow of a cat with erythroid hyperplasia and non-regenerative anemia, demonstrating that despite the high production of erythroid cells in the bone marrow, the virus in high quantity does not allow the maturation of the cells in the peripheral blood. Of the 167 cats in the third chapter, 27% (45/167) were seropositive for T.gondii, 29.3% (49/167) for N. caninum and 3.6% (6/167) for S. neurona. FeLV virus was detected in 24.6% and FIV in 1.7% of these cats. Cats from southern Brazil were exposed to protozoa T. gondii, N. caninum and S.neurona. There was a higher occurrence of antibodies to T. gondii than in previous studies conducted in the same region. The present study demonstrated the highest occurrence of N. caninum antibodies in Brazilian cats. Seropositivity for S. neurona is the first report in cats in southern Brazil. Coinfection was observed by more than one protozoan. Seropositivity was observed with statistical difference (p<0.05) between the protozoan N. caninum and the retrovirus FeLV. A highest occurrence (p=0.1) of FeLV in semi-domiciled cats was notable, consistent with studies that observed access to the street as a risk factor for this virus. Among males and females, no higher positivity was observed for the agents, except for S. neurona that a higher prevalence was observed for females. Analysis of bone marrow viral load, haematological abnormalities, and coinfections related to FeLV virus should be performed more frequently in scientific studies and clinical routine. These data are extremely important to understand the mode of action of the virus and, consequently, to obtain more accurate prognoses and, in the future, treatment.

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