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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-216633

Resumo

Klebsiella pneumoniae são bactérias oportunistas encontradas no trato intestinal de animais e humanos, bem como no ambiente. Em animais de produção, o patógeno é causa importante de mastite clínica bovina e, em humanos, figura entre os patógenos mais frequentes envolvidos em infecções nosocomiais. A multirresistência dos isolados aos antimicrobianos convencionais é preocupação emergente em saúde animal e saúde pública. Atualmente, merece destaque os estudos com a produção de carbapenemases por K. pneumoniae, que são enzimas relacionadas a resistência aos antimicrobianos do grupo dos carbapenêmicos. O presente estudo investigou os escores de gravidade clínica de mastite (leves, moderados e graves), o período do ano (estações) de maior isolamento, a ocorrência de multirresistência dos isolados a 19 antimicrobianos (pertencentes a 10 grupamentos), bem como a presença dos genes blaKPC, blaNDM e blaOXA-48, associados a produção de carbapenemases, em 60 K. pneumoniae isoladas do leite de vacas com mastite clínica. Os casos ocorreram principalmente nos meses de verão (28/60=46,7%) e outono (24/60=40%). As informações sobre a gravidade clínica da mastite foram obtidas de 30 (50,0%) vacas, das quais 20 (66,6%) apresentaram casos de mastite leves (score 1), 8 (26,7%) moderados (score 2) e 2 (6,7%) graves (score 3). A maior sensibilidade dos isolados no teste de difusão com discos foi observada para marbofloxacino (100%), levofloxacino (95%), norfloxacino (93,3%), ceftriaxona (85%) e sulfametoxazole/trimetoprim (80%). Em contraste, alta resistência dos isolados foi observada para rifampicina (100%) e azitromicina (96,4%), com grande variedade de perfis de resistência. O índice de resistência múltipla aos antimicrobianos - IRMA (0,3) foi observado em 50,0% (30/60) dos isolados. No teste de difusão com discos para identificação fenotípica de K. pneumoniae produtores de carbapenemases foram encontrados 71,6% (43/60) parcialmente sensíveis e 11,7% (7/60) resistentes ao imipeném; 55,0% (33/60) parcialmente sensíveis e 3,3% (2/60) resistentes ao meropenem e 15% (9/60) parcialmente sensíveis ao ertapenem. Em contraste, nenhum isolado foi considerado produtor de carbapenemases no teste de concentração inibitória mínima com fitas impregnadas utilizando o imipeném, ertapenem e meropenem. A detecção molecular por PCR detectou 1,66% (1/60) dos isolados carreando blaKPC, 1,66% (1/60) blaNDM e 5% (3/60) blaOXA-48. Não foi observada associação estatística (P>0,05) entre as variáveis estações do ano de isolamento do patógeno, escores de gravidade clínica, resistência aos antimicrobianos, testes de difusão para identificação de produção de carbapenemases e detecção dos genes. A multirresistência aos antimicrobianos e a presença de genes produtores de carbapenemases em K. pneumoniae isolados de vacas com mastite reforça a preocupação, de âmbito mundial, com o crescimento da resistência bacteriana em isolados obtidos de animais domésticos, bem como a necessidade do uso racional de antimicrobianos no tratamento/profilaxia da mastite bovina. Na literatura consultada refere-se pela primeira vez na América do Sul, a detecção dos genes de resistência aos carbapenêmicos blaKPC, blaNDM e blaOXA-48 em K. pneumoniae isoladas de casos clínicos de mastite em vacas.

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Klebsiella pneumoniae are opportunistic bacteria found in the intestinal tract of animals and humans, as well as in the environment. In livestock animals the pathogen is an important cause of bovine clinical mastitis, and in humans represent one of the most frequent pathogens involved in nosocomial infections. The pandemic scenario of multidrug resistance of the pathogen to conventional antimicrobials is an emerging concern in animal and humans. Currently, studies with the K. pneumoniae carbapenemase (KPC)-producing, which are enzymes related to resistance to antimicrobials, particularly of the carbapenemics group, deserve attention. The present study investigated the severity of clinical mastitis (mild, moderate and severe), occurrence of cases in different seasons, multidrug to 19 antimicrobials belonging to 10 groups, as well as the presence of the genes blaKPC, blaNDM and blaOXA-48 associated with the production of carbapenemases in 60 K. pneumoniae isolated from clinical mastitis in cows. The highest sensitivity of the isolates in the disk diffusion test was observed for marbofloxacin (100%), levofloxacin (95%), norfloxacin (93.3%), ceftriaxone (85%) and sulfamethoxazole / trimethoprim (80%). In contrast, the highest resistance of the isolates was observed for rifampicin (100%) and azithromycin (96.4%) with great variety of resistance profiles. The multiple antibiotic resistance (MAR) index (0.3) was observed in 50% (30/60) strains. In the disk diffusion test, which is used for phenotypic identification of the K. pneumoniae carbapenemase-producing bacteria, the findings among the total isolates were as follows: 71.6% (43/60) partially sensitive and 7 (11.7%) resistant to imipenem; 55% (33/60) were partially sensitive and 3.3 (2/60) resistant to meropenem; and 15% (9/60) were partially sensitive to ertapenem. In contrast, no isolates were carbapenemases-producing in the minimal inhibitory concentration test (MIC) using imipenem, ertapenem, and meropenem. PCR molecular detection of the three resistance genes revealed one (1.66%) isolated carrying blaKPC, one (1.66%) blaNDM, and three (5%) blaOXA-48. No statistical association (P>0,05) was observed between seasons, scores of clinical severities, multidrug resistance of isolates, diffusion disk test to carbapenemase-production, and detection of the genes studied. The multidrug resistance and the presence of K. pneumoniae carbapenemase(KPC)-producing isolated from cows with mastitis, highlights the global concern with the growth of antimicrobial resistance of bacteria from domestic animals, as well as the need for the rational use of antimicrobials in the treatment/prophylaxis of bovine mastitis. To our knowledge, the detection of the genes blaKPC, blaNDM and blaOXA-48 in K. pneumoniae isolated from clinical cases of bovine mastitis is reported for the first time in South America.

Biblioteca responsável: BR68.1