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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-217269

Resumo

O câncer define-se, em geral, como a proliferação anormal e descontrolada das células, por alterações no DNA que leva à formação de tumores. O câncer de mama é o tipo mais comum e o segundo mais letal na população feminina no mundo todo, devido principalmente à presença de metástases, que caracterizam o tipo mais agressivo da doença. Diversos estudos têm mostrado que interações entre células tumorais e macrófagos no microambiente tumoral são relevantes para aquisição de um fenótipo mais agressivo. Entretanto, até o momento, são inexistentes os trabalhos mostrando a produção de vesículas extracelulares (EVs) durante estas interações. Assim, o intuito do presente trabalho foi avaliar e caracterizar vesículas extracelulares produzidas por células de adenocarcinoma mamário 4T1 antes e após interação com macrófagos em modelo in vitro. Para isto, EVs produzidas por células 4T1 antes e após interação com macrófagos RAW 264.7 foram coletadas e submetidas, tanto a análises físico-químicas como biológicas, para sua caracterização e avaliação de seus efeitos sob macrófagos. Análises de microscopia eletrônica de varredura e quantificação proteica mostraram que células 4T1 após contato com macrófagos tem redução na produção de EVs e possuem menor capacidade de migração quando comparadas com células 4T1 que não entraram em contato com macrófagos. A caracterização das EVs por análises de rastreamento de nanopartículas (NTA) e por citometria de fluxo revelaram que as EVs produzidas são em maioria de tamanhos entre 100 a 200 nm com quantidades semelhantes de exossomos e microvesículas. Em relação ao efeito biológico, macrófagos tratados com EVs principalmente, aquelas produzidas por células 4T1 antes da interação com macrófagos apresentaram aumento tanto no índice fagocítico como na capacidade de eliminação do material fagocitado. Em conjunto, os resultados aqui apresentados sugerem que macrófagos modulam a produção de EVs nas células 4T1, estas EVs por sua vez, podem ser as responsáveis diretas pelo perfil mais agressivo das células 4T1. Portanto, a redução da produção de EVs por células 4T1, induzida pelo contato com macrófagos pode ser um mecanismos promissor para o controle de tumores altamente agressivos, como é o adenocarcinoma mamário.

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Cancer is defined as an abnormal and uncontrolled proliferation of cells by changes in the DNA that leads to tumor formation. Breast cancer is the most common type and the most lethal type in the female population worldwide, mainly due to the presence of metastases, which characterize the most aggressive type of the disease. Several studies have presented the interactions between tumor cells and macrophages not tumor microenvironments are relevant to obtain a more aggressive phenotype. However, to date, the production of extracellular vesicles (EVs) during these interactions has been lacking. Thus, the purpose of the present study was to evaluate and characterize the extracellular cells by 4T1 adenocarcinoma mammary cells before and after interaction with macrophages in vitro model. For this, EVs produced by 4T1 cells before and after interaction with RAW 264.7 macrophages were collected and submitted to both physico-chemical and biological analyzes for their characterization and evaluation of their effects under macrophages. Scanning electron microscopy and protein quantification analyzes showed that 4T1 cells after contact with macrophages had a reduction in the production of EVs and had a lower migration capacity when compared with 4T1 cells that did not come into contact with macrophages.The characterization of EVs by Nanoparticle Trace Analysis (NTA) and by flow cytometry revealed that the EVs produced are on average between 100 and 200 nm with the name of exosomes and microvesicles. Regarding the biological effect, macrophages treated with EVs mainly, those produced by 4T1 cells before the interaction with macrophages showed increase in both the phagocytic index and in the elimination capacity of phagocytic material. The results presented here suggest that macrophages modulate the production of EVs in 4T1 cells, this EVs in turn may be directly responsible for the more aggressive profile of 4T1 cells. Reducing the production of EVs by 4T1 cells induced by contact with macrophages may be one of the promising mechanisms for the control of highly aggressive tumors such as adenocarcinoma mammary.

Biblioteca responsável: BR68.1