Caracterização molecular de Leptospira sp., a partir de amostras do trato geniturinário de ovinos deslanados abatidos no estado da Paraíba

RESUMO

A leptospirose é uma enfermidade de caráter zoonótico, com ampla distribuição mundial, sendo apontada como uma das enfermidades que provocam distúrbios reprodutivos nos pequenos ruminantes. Os objetivos do presente estudo foram determinar a frequência de ovinos soropositivos para pesquisa de anticorpos anti-Leptospira sp., utilizando como ponte de corte 150, bem como identificar os sorogupos predominantes no Semiárido paraibano assim como detectar a presença de DNA leptospírico no trato reprodutivo e urinário de ovinos fêmeas destinadas ao abate no matadouro público de Patos, PB. Foram coletados 430 (n= 58 machos, n= 372 fêmeas) soros de ovinos, não vacinados, das Microrregiões de Cajazeiras, Quixaba e Paulista nos quais foram realizadas as avaliações sorológicas através da Soroaglutinação Microscópica, utilizando como referência o ponto de corte 150. Nos ovinos destinados ao abate no Matadouro Público de Patos foi realizado a avaliação molecular através da Reação em cadeia da polimerase (PCR). Sendo realizado cultivo bacteriológico em todas as amostras destinadas a PCR. A frequência sorológica encontrada foi de 10,7%, com títulos variando entre 150 a 1400. O Icterohaemorragiae foi o mais frequente nesse estudo (8,1%), seguido por Sejroe (1,2%), Australis (1,2%) e Autumnalis (0,2%). Foi encontrado DNA leptospírico em 61 (54,9%) amostras do trato genital e em cinco (4,4%) amostras do trato urinário, com diferença significativa entre as proporções (P < 0,001). Foi possível sequenciar o gene de uma amostra de tuba uterina e outra de bexiga. Os genes sequenciados demonstraram 99% de similaridade com a Leptospira interrogans. O cultivo bacteriano foi negativo para todas as amostras. Conclui-se que considerando a rusticidade dos animais e as condições ambientais da região, um menor ponto de corte na Soraglutinação Microscopia (SAM) pode ser adotado para ovinos criados em condição de clima semiárido, com a finalidade de aumentar a capacidade de detecção de animais positivos. Os resultados encontrados na PCR reforçam a importância do trato reprodutivo como local de colonização extra renal, sugerindo a hipótese de transmissão venérea nessa espécie.

ABSTRACT

Leptospirosis is a disease of a zoonotic nature, with a wide distribution worldwide, being pointed out as one of the diseases that provoke reproductive disorders in the small ruminants. The objectives of the present study were to determine the frequency of seropositive sheep for anti-Leptospira sp. Antibodies using the 150 cut-off bridge, as well as to identify the predominant serogroups in the semi-arid region of Paraiba and also to detect the presence of leptospiric DNA in the treatment reproductive and urinary control of female sheep intended for slaughter in the public slaughterhouse of Patos, PB. A total of 430 (n = 58 males, n = 372 females) were collected from the non-vaccinated sheep of the Cajazeiras, Quixaba and Paulista Microregions in which the serological evaluation was performed using Microscopic Soroagglutination using a cut-off point of 150. In the sheep destined to the slaughter in the Public Dump of Ducks the molecular evaluation was realized through Polymerase Chain Reaction (PCR). A bacteriological culture was carried out on all samples destined for PCR. The serological frequency was 10.7%, with titers ranging from 150 to 1 400. Icterohaemorragiae was the most frequent in this study (8.1%), followed by Sejroe (1,2%), Australis (1,2%) and Autumnalis (0,2%). Leptospiral DNA was found in 61 (54.9%) samples from the genital tract and in five (4.4%) urinary tract samples, with a significant difference between the proportions (P <0.001). It was possible to sequence the gene from one sample of uterine tube and one from bladder. Sequenced genes demonstrated 99% similarity to Leptospira interrogans. The bacterial culture was negative for all samples. It is concluded that considering the rusticity of the animals and the environmental conditions of the region, a lower cut-off point in the SAM can be adopted for sheep reared in semi-arid climate conditions, in order to increase the detection capacity of positive animals. The results found in the PCR reinforce the importance of the reproductive tract as a site of extra renal colonization, suggesting the hypothesis of venereal transmission in this species.