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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-217331

Resumo

O estudo buscou avaliar diferentes alternativas para o congelamento do sêmen de jundiá amazônico e de pintado e a melhoria da qualidade pósdescongelamento, contribuindo para o desenvolvimento de protocolos para as duas espécies. Entre as abordagens avaliadas foram: (1) a caracterização morfológica dos espermatozoides de jundiá amazônico com o uso de microscopia eletrônica de varredura e de transmissão; (2) a utilização de diferentes agentes crioprotetores, para o jundiá amazônico: metanol, dimetilsulfóxido e etilenoglicol a 10%, associados a solução de glicose a 5% e para o pintado: metanol, dimetilsulfóxido e dimetilacetamida a 5%, 7,5% e 10%, associados a solução de BTS a 5%; e (3) a adição de substâncias antioxidantes nos meios de congelamento para o pintado: trealose 100 mM, ácido ascórbico 1 mM e -tocoferol 0,1 mM. Para ambas espécies, o sêmen foi envasado em palhetas de 0,25 mL e congelado em vapor de nitrogênio, utilizando botijão dry shipper, e descongelado a 40ºC por 12 segundos. No jundiá amazônico, o espermatozoide apresentou o comprimento total de 25,46 ± 2,54 m, cabeça esférica (1,51 ± 0,18 m) ausência de acrossoma, peça intermediária de formato cônico, ligeiramente assimétrica com presença de vesículas, e comprimento de 0,93 ± 0,17 m, e flagelo com arranjo típico e comprimento de 21,48 ± 2,45 m. O sêmen descongelado apresentou valores mais altos (p<0,05) para duração, vigor e taxa de motilidade espermática com os crioprotetores metanol 10% e dimetilsulfóxido 10% quando comparado com o etilenoglicol 10%. No pintado, o sêmen criopreservado com metanol 7,5% e 10% apresentou valores para duração e taxa de motilidade maiores (p<0,05) comparado com o dimetilsulfóxido e dimetilacetamida. O tratamento com os três antioxidantes associados proporcionou taxa de motilidade maior (p<0,05) em relação ao tratamento sem antioxidantes. Para os parâmetros de duração e taxa de motilidade foi observada interação significativa (p<0,05) entre o ácido ascórbico e o -tocoferol. Assim, os resultados obtidos na criopreservação de sêmen de jundiá amazônico não foram suficientes para estabelecer um protocolo para a espécie. Na criopreservação de sêmen de pintado é recomendado o uso do metanol a 7,5% associado à solução de BTS a 5%, e a adição conjunta dos antioxidantes trealose (100mM), ácido ascórbico (1mM) e -tocoferol (0,1mM).

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This study aimed to evaluate different alternatives for the semen freezing of amazon catfish and spotted catfish, contributing to the development of protocols for both species increasing the process efficiency in both species. Among the approaches used are (1) morphological characterization of amazon catfish spermatozoa using scanning and transmission electron microscopy; (2) use of different cryoprotectant agents, 10% methanol, dimethylsulfoxide and ethyleneglycol, associated 5% glucose solution in amazon catfish, and 5%, 7,5% e 10%, methanol, dimethylsulfoxide and dimethyacetamide, associated 5% BTS solution in spotted catfish; and (3) addition of antioxidants in the freezing media, trehalose (100 mM), ascorbic acid (1 mM) and -tocopherol (0.1 mM) in spotted catfish. In both especies, semen samples were loaded in 0.25 mL plastic straws, frozen in nitrogen vapour (dry shipper) and thawed at 40ºC for 12 seconds. In the amazon catfish, fresh spermatozoon was 25.46 ± 2.54 m long, head was spherical (1.51 ± 0.18 m) with no acrosome, midpiece was coneshapped with presence of vesicles, slightly asymmetric, 0.93 ± 0.17 m long and the single fagellum was 21.48 ± 2.45 m long with the typical arrangement. Post-thawed semen presented higher values (p<0.05) for duration, vigor and sperm motility rate with cryoprotectants 10% methanol and 10% DMSO, when compared to 10% ethyleneglycol. In the spotted catfish, the cryopreserved semen with 7,5% and 10% methanol presented higher values (p<0.05) for latency time and motility rate compared to dimethylsulfoxide and dimethyacetamide. The treatment with associated antioxidants provided a higher motility rate (p<0.05) compared to the antioxidant-free treatment. For the parameters of latency time and motility rate, a significant interaction (p<0.05) was observed between ascorbic acid and - tocopherol. In conclusion, the results observed in semen cryopreservation of amazon catfish were not satisfactory to establish a protocol for the specie. For the semen cryopreservation of spotted catfish, it is recommended the use of 7.5% methanol with the 5% BTS solution and the addition of the antioxidants trehalose (100 mM), ascorbic acid (1 mM) and -tocopherol (0.1 mM).

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