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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-217384

Resumo

O interesse pela ação farmacológica de produtos naturais tem crescido e encontrado significativa aceitação popular. Nas culturas de organismos aquáticos, os fitoterápicos são utilizados para diversas finalidades, como estimuladores de apetite e do sistema imunológico e como proposta de cultivos mais saudáveis e orgânicos. Mas, são problemas de surtos de mortalidade causados por Aeromonas spp. em cultivos, que levaram a proposições de novas com o extrato etanólico bruta (EEB) de Hymenaea martiana (Jatobá) contra fatores de virulência ligados as infecções por esse micro-organismo. O extrato foi testado em modelos in vitro e ex vivo, utilizado como substrato ex vivo, epitélio de Tilápia do Nilo exposto em placas de Petri à inóculos de Aeromonas spp. e ao extrato testado. Para a confirmação da presença de cinco genes de virulência importantes na aderência, fixação e invasão principalmente, foram feitos testes moleculares, onde 90% dos isolados apresentaram pelo menos um dos cinco genes analisados, sendo selecionados para o teste ex vivo os 14 isolados que apresentaram o maior número de genes pesquisados. O EEB de jatobá apresentou efetividade como antimicrobiano, possuindo como concentração bactericida mínima 781,3g/ml, onde foi analisado napesquisa a metade desse valor (concentração sub-inibitória). O modelo ex vivo foi avaliado em três ensaios laboratoriais (A, B e C), onde no grupo A (com EEB e sem icóculo), foi confirmado por histologia, que o EEB não se mostrou tóxico no epitélio, enquanto no grupo B (com inóculo e sem EEB) a aderência bacteriana foi associada ao grande desgaste do tecido, contrário do observado no Grupo C(com EEB e inóculo) onde a presença do EEB possibilitou a diminuição da aderência bacteriana e assim interferindo na freqüência da autólise tecidual. Foi confirmada a eficácia do EEB de jatobá contra fatores relacionados com a aderência e fixação da A. spp., não agredindo o epitélio da tilápia cultivada. O modelo ex vivo ainda possibilitou, com o uso de um meio mais complexo do que o caldo Muller Hinton (MH) usado no modelo in vitro, de observar reações do extrato, utilizando menos animais em uma proposta mais ética, abordando valores de redução, refinamento e substituição do uso de animais em pesquisas.

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Interest in the pharmacological action of natural products has grown and found significant popular acceptance. In cultures of aquatic organisms, these herbal remedies have found several uses, such as appetite stimulators and the immune system. But they are problems of mortality outbreaks caused by Aeromonas spp. in cultures that lead the research to propose 72 new interventions with the crude ethanolic extract of the leaf of Hymenaea martiana against virulence factors linked to the infections by this microorganism. The methodologies tested were in vitro and ex vivo models, where the latter was used as substrate, Nile Tilapia epithelium, the most cultivated sweet fish in Brazil. To confirm the presence of five important virulence genes in adherence, fixation, invasion among others, molecular tests were performed. All the evaluated isolates had at least three of the five analyzed genes. The H. martiana CEE, known as jatobá, showed antimicrobial effectiveness, with a minimum bactericidal concentration of 781.3 g / ml and half of this value (subinhibitory concentration) was evaluated ex vivo in three different laboratory tests, where in group A, after histopathological analysis, confirmed that CEE was not toxic in the epithelium, while in group B, without its presence bacterial adhesion was one of the causes for the great tissue wear, contrary to that observed in Group C, where the presence of CEE allowed the reduction of bacterial adhesion and thus the frequency of tissue autolysis. The H. martiana BSE confirmed its efficacy against factors related to the adhesion and fixation of A. spp., Not attacking the cultured tilapia epithelium. The ex vivo model also made it possible, through a more complex medium than the Muller Hinton broth used in the in vitro model, to observe extract reactions, using fewer animals and thus less suffering in a more ethical proposal, approaching values of reduction, refinement and replacing the use of animals in research.

Biblioteca responsável: BR68.1