DINÂMICA DA INFECÇÃO EXPERIMENTAL POR Neospora caninum NO MODELO DE RECRUDESCÊNCIA EM CABRAS GESTANTES E AVALIAÇÃO DE TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO DA NEOSPOROSE EM CAPRINOS

RESUMO

Neste estudo objetivou-se aprofundar os conhecimentos sobre a dinâmica da infecção experimental por Neospora caninum na cabra gestante, utilizando um modelo de recrudescência e ainda, avaliar diferentes técnicas de diagnóstico sorológico. No modelo de recrudescência, dez fêmeas foram experimentalmente inoculadas e pariram doze animais nascidos vivos (12/14), um natimorto (1/14) e outro com óbito pré-maturo (1/14). Nos tecidos das cabras inoculadas, foi detectado DNA de N. caninum em 33,3% (3/9) dos cérebros, 22,2% (2/9) do linfonodos uterinos e 40% (4/10) das placentas. Nas amostras das crias, o DNA foi detectado em 21,42% (3/14) dos cérebros, 28,57% (4/14) dos fígados e 21,42% (3/14) dos músculos esqueléticos foram positivos. Em segundo experimento objetivou-se avaliar a soroprevalência de caprinos naturalmente infectados por N. caninum em três técnicas sorológicas (RIFI, NAT e ELISA) e avaliar a concordância entre estas técnicas. As soroprevalências de anticorpos anti-N. caninum foram de 3,2% no NAT, 4,6% na RIFI e 6,4% no ELISA. Utilizando a RIFI como técnica de referência NAT e ELISA foram considerados fraco e substancial, respectivamente; foram obtidos valores de sensibilidade de 91,3% e 97,7% de especificidade no ELISA; NAT apresentou resultados de sensibilidade de 26,1% e de especificidade de 97,9%. Estes resultados incrementam dados sobre a patogenia da neosporose caprina com a verificação da transmissão vertical de N. caninum comprovada através da PCR. E ainda sugerimos que a RIFI permaneça como técnica de escolha no diagnóstico sorológico da neosporose caprina em amostras individuais com as as recomendações e pontos de corte adotados neste estudo.

ABSTRACT

The purpose of this study was to obtain new insights about the dynamic of experimental infection by Neospora caninum in pregnant goats by the recrudescence model and the performance of diferentes serological techniques. In recrudescence model, ten females were experimental inoculated and delivered twelve animals born alive (12/14), one stillborn (1/14) and another died shortly after birth (1/14). The N. caninum DNA was detected in tissues of infected goats as described 33.3% (3/9) of the brains, 22.2% (2/9) of the uterine lymph node and 40% (4/10) of the placentas. In the offspring samples, DNA was detected as described 21.42% (3/14) of brains, 28.57% (4/14) of livers and 21.42% (3/14) of skeletal muscles were positive. In the second experiment, the aimed to measure the serological response of goats infected with N. caninum by assessing the diagnostic performance and agreement between three techniques (IFAT, NAT and ELISA). In the field serum samples tested, the seroprevalences of anti-N. caninum antibodies were 3.2%, 4.6%, and 6.4% in the NAT, IFAT and ELISA, respectively. Using the IFAT as the gold standard, the NAT and the ELISA were considered weak and strong, respectively; ELISA showed 91.3% sensitivity and 97.7% specificity; NAT presented sensitivity of 26.1% and specificity of 97.9%. These results provide data about the pathogenesis of caprine neosporosis by the observation of the vertical transmission of N. caninum. Accordingly, the IFAT should remains the assay of choice for studies about N. caninum infection in goats in individual serum samples with our recomendations of cut-off points.