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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-219534

Resumo

O objetivo do presente estudo foi avaliar se a suplementação do meio de criopreservação com antioxidantes promoveria melhorias na qualidade seminal após o processo de congelação e descongelação do sêmen de bovinos pantaneiros. Foram utilizados 5 touros do grupamento genético pantaneiros (Bos taurus) em idade reprodutiva. A coleta de sêmen foi realizada por eletroestimulação e as amostras foram imediatamente avaliadas quanto à motilidade e vigor espermático, integridade e funcionalidade das membranas plasmática e acrossomal. Após avaliação, cada amostra seminal foi dividida em quatro alíquotas. Cada alíquota foi diluída em um dos quatro tratamentos descritos a seguir: Controle: meio comercial Triladyl® (MB) sem suplementação; TE: MB + 0,25 mM de Trolox®; TC: MB + 0,18 mM/mL de ácido ascórbico; TEC: MB + 0,25 mM de Trolox® e 0,18 mM/mL de ácido. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,5 mL (20x106 espermatozoide viáveis/palheta), resfriadas, congeladas e armazenadas em nitrogênio líquido até análise. Após descongelação, o sêmen foi submetido à análise computadorizada da cinética espermática (CASA), atividade citoquímica mitocondrial (DAB), análise de integridade de membrana plasmática e acrossomal, potencial de membrana mitocondrial, fragmentação do DNA e status oxidativo. O experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado sendo os dados analisados pelo programa SAS 9.3, as médias analisadas com nível de significância de 5%. O controle apresentou maior percentual de células móveis em relação aos tratamentos suplementados com ácido ascórbico, porém não diferiu do tratamento suplementado somente com Trolox (TE) (35,12 ± 2,76 e 28,25 ± 2,67; p=0,0043), respectivamente. Ambos os grupos também apresentaram maiores concentrações de células com alta atividade mitocondrial (DABI) (68,64 ± 5,33 e 70,75 ± 5,10; p=0,0001). A integridade das membranas plasmática e acrossomal, potencial de membrana mitocondrial, fragmentação do DNA e status oxidativo não diferiram entre os grupos. Sendo assim, concluiu-se que a suplementação do meio de criopreservação com Trolox® e ácido ascórbico individualmente ou em associação na dosagem de 0,25 mM e 0,18 mM/mL respectivamente, foram ineficientes na redução de danos causados pela criopreservação em sêmen de bovinos pantaneiros.

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The aim of the present study was to evaluate whether supplementation of the cryopreservation medium with antioxidants would improve semen quality of post-thawed semen of Pantaneiro breed cattle. Thus, 5 healthy Pantaneiro bulls (Bos taurus) at reproductive age were used. Semen collection was performed by electrostimulation and samples were immediately evaluated for sperm motility and vigor, integrity and functionality of the plasma and acrosomal membranes. After evaluation, each semen sample was divided in four aliquots. Each aliquot was extended with one of the four treatments: Control: Triladyl® commercial base medium (MB) without supplementation; TE: MB + 0.25 mM Trolox®; TC: MB + 0,18 mM/mL ascorbic acid; TEC: MB + 0.25 mM Trolox® and 0,18 mM/mL acid. Samples were packed in 0.5 mL straws (20x106 viable sperm / straw), chilled, frozen and stored in liquid nitrogen until analysis. Post-thawed samples were subjected to computerized analysis of sperm kinetics (CASA), mitochondrial cytochemical activity (DAB), plasma and acrosomal membrane integrity analysis, mitochondrial membrane potential, DNA fragmentation and oxidative status. The experiment was carried out in a completely randomized design, with the data analyzed by the SAS 9.3 program and evaluated for the normality of the residues and homogeneity of the variances, being transformed, if necessary, the averages analyzed with a significance level of 5%. The Control had a higher percentage of mobile cells in comparison to samples treated with ascorbic ácid, however it did not differ from samples supplemented only with Trolox (TE) (35.12 ± 2.76 and 28.25 ± 2.67, respectively) (p = 0.0043). Both groups also showed higher concentrations of cells with high mitochondrial activity (DABI) (68.64 ± 5.33 and 70.75 ± 5.10; p = 0.0001). Plasma and acrosomal membrane integrity, mitochondrial membrane potential, DNA fragmentation and oxidative status did not differ between groups. In conclusion, supplementation of the cryopreservation medium with Trolox® and ascorbic acid individually or in association at the dosage of 0.25 mM and 0,18 mM/mL, respectively, were inefficient in reducing injuries caused by cryopreservation in the semen of Pantaneiro cattle.

Biblioteca responsável: BR68.1