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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-219899

Resumo

Com o crescimento atual da piscicultura no cenário nacional e internacional, têm-se a intensificação dos sistemas de produção. Apesar de mais lucrativo, este sistema deve ser acompanhado de boas práticas de manejo, caso contrário, atua como facilitador da instalação de enfermidades. Dentre as doenças que podem acometer peixes, destacam-se as bacterioses. Por serem consideradas limitadoras de produtividade, comumente são tratadas com antimicrobianos e quimioterápicos de forma indiscriminada. Como resultado, tem-se observado aumento da resistência bacteriana aos antimicrobianos. Nesse sentido, a busca por produtos naturais com atividade antimicrobiana e sua associação com antimicrobianos sintéticos de interesse para piscicultura faz-se necessária. Portanto, o objetivodeste estudo foi avaliar as atividades antimicrobianas, antibiofilme e sinérgica de cinco óleos essenciais (OEs) com florfenicol contra Aeromonas hydrophila e Aeromonas jandaei isoladas de tambaqui (Colossoma macropomum). As cepas bacterianas foram identificadas por sequenciamento do gene 16S rRNA¸ e destas foram selecionadas três cepas A. hydrophila e uma de A. jandaei para o estudo. Os OEs das espécies de Aloysia triphylla, Croton cajucara morfotipo vermelho, Croton cajucara morfotipo branco, Cymbopogon citratus e Lippia gracilis apresentaram como constituinte majoritário o composto -pineno (22,1%), germacreno D (11,5%), linalol (23%), geranial (45,7%) e carvacrol (42,2%), respectivamente. Para a determinação das concentrações inibitórias mínimas (CIM) foi utilizada a técnica de microdiluição em placas de 96 poços e, para a determinação da concentração bactericida mínima (CBM) dos OEs, foram realizadas semeaduras em meio ágar Muller Hinton (MHA). Para a atividade sinérgica foi utilizada a técnica de tabuleiro de xadrez checkerboard. Os cinco OEs avaliados foram classificados com fraca atividade antimicrobiana, apresentando ação bactericida frente aos patógenos alvos,com CIM variando de 5.000 a 640.000 ug mL1 . Os OEs de L. gracilis e C. citratus apresentaram as menores concentrações contra os patogenos investigados (CIM e CBM de 5.000 ug mL-1 ). Os OEs interferiram no biofilme inicial e no consolidado quando comparados ao controle negativo (E. coli), passando de produtores fracos para não produtores. Os OEs de A. triphylla, C. citratus, C. cajucara morfotipo branca e L. gracilis combinados com o florfenicol reduziram a CIM, e o índice de concentração inibitória fracionada variou entre 0,38 e 0,50, indicando efeito sinérgico. Nesta dissertação, foi possível demonstrar o efeito sinérgico de quatro OEs com o florfenicol, reduzindo a dose deste antimicrobiano e dos OEs. Considerando o custo dos tratamentos em piscicultura que ainda são altos, este trabalho contribuiu para a redução da quantidade dos fármacos utilizados (sintéticos e naturais) e, consequentemente, redução do custo do tratamento. Além disso, a diminuição de antimicrobianos sintéticos na água de cultivo torna o tratamento mais sustentável ao meio ambiente, reduzindo, inclusive, a seleção de cepas bacterianas resistentes ao antimicrobiano

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With the current growth of fish farming on the national and international scene, there is an intensification of production systems. Although more profitable, this system must be accompanied by good management practices, otherwise it acts as a facilitator for the installation of diseases. Among the diseases that can affect fish, bacteriosis stand out. As they are considered productivity limiting, they are commonly treated with antimicrobials and chemotherapy indiscriminately. As a result, an increase in bacterial resistance to antimicrobials has been observed. In this sense, the search for natural products with antimicrobial activity and their association with synthetic antibiotics of interest to fish farming is necessary. Therefore, the aim of this study was to evaluate the antimicrobial, antibiofilm and synergistic activities of five essential oils (EOs) with florfenicol against Aeromonas hydrophila and Aeromonas jandaei isolated from tambaqui (Colossoma macropomum). Bacterial strains were identified by sequencing the 16S rRNA¸ gene and from these, three A. hydrophila and one A. jandaei strains were selected for the study. The EOs of the species of Aloysia triphylla, Croton cajucara morphotype red, Croton cajucara morphotype white, Cymbopogon citratus and Lippia gracilis had as major constituent the compound -pinene (22.1%), germacrene D (11.5%), linalool ( 23%), geranial (45.7%) and carvacrol (42.2%), respectively. To determine the minimal inhibitory concentrations (MIC) the microdilution technique in 96-well plates was used, and to determine the minimal bactericidal concentration (CBM) of the EOs, platings were performed in Muller Hinton agar (MHA). For the synergistic activity, the checkerboard technique was used. The five EOs evaluated were classified as having weak antimicrobial activity, showing bactericidal action against target pathogens, with MIC ranging from 5,000 to 640,000 ug mL1 . The EOs of L. gracilis and C. citratus showed the lowest concentrations against the investigated pathogens (MIC and CBM of 5,000 ug mL-1 ). The EOs interfered in the initial and consolidated biofilm when compared to the negative control (E. coli), going from weak producers to nonproducers. The EOs of A. triphylla, C. Citratus, C. cajucara white morphotype and L. gracilis combined with florfenicol reduced the MIC, and the fractional inhibitory concentration index varied between 0.38 and 0.50, indicating a synergistic effect. In this dissertation, it was possible to demonstrate the synergistic effect of four EOs with florfenicol, reducing the dose of this antimicrobial and EOs. Considering the cost of treatments in fish farming that are still high, this work contributed to reducing the amount of drugs used (synthetic and natural) and, consequently, reducing the cost of treatment. In addition, the reduction of synthetic antimicrobials in the water makes the treatment more sustainable for the environment, even reducing the selection of bacterial strains resistant to the antimicrobial.

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