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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-220206

Resumo

Objetivou-se com este trabalho evidenciar o potencial antimicrobiano da água ozonizada em diferentes condições na inativação de Salmonella Heidelberg isolada em um surto de diarreia de suínos. Inicialmente foi realizada análise do perfil de suscetibilidade a 18 antimicrobianos pelo método de Difusão em Disco. Em seguida, foram preparados inóculos bacterianos da cepa na concentração de 2x106 UFC/mL e submetidos aos testes de exposição ao desinfetante a base de glutaraldeído e cloreto de benzalcônio e à água ozonizada em diferentes concentrações (0,5mg/L, 2,4mg/L e 4,4mg/L), de forma que a concentração de ozônio residual foi avaliada por meio de espectrofotômetro portátil. A exposição a estes produtos foi avaliada na presença e ausência de matéria orgânica em três tempos distintos (1, 5 e 10 minutos de exposição). Após cada período, as amostras foram plaqueadas em ágar verde brilhante e a contagem de UFC foi realizada após 24 horas. Além disso, após cada tratamento, o DNA genômico foi extraído e submetido a avaliação de rendimento e integridade, com o auxílio de espectrofotômetro NanoDrop e por meio de eletroforese em gel de agarose. Para a análise estatística, realizou-se análise de variância (ANOVA) seguida pelo teste de Tukey, de forma que valores de p0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Observou-se que após 1 minuto de exposição da água ozonizada a 4,4mg/L não houve crescimento bacteriano na ausência de matéria orgânica, diferentemente dos outros tratamentos. Entretanto, para 5 e 10 minutos de exposição, o desinfetante apresentou eficiência superior aos tratados com ozônio, inibindo o crescimento de Salmonella Heidelberg na presença de matéria orgânica. A matéria orgânica interferiu na atuação da água ozonizada, visto que não houve diferença entre as diferentes concentrações de ozônio após 10 minutos de exposição. Esses resultados acompanham os observados quando se avaliou o rendimento e a integridade de DNA genômico, ao qual após 10 minutos de exposição os tratados por água ozonizada a 2,4 e 4,4mg/L e, pelo desinfetante, apresentaram reduções nas concentrações (ng/L), ao qual foi bem evidenciado pela eletroforese em gel de agarose, com formação de bandas mais claras. Assim, a partir dos resultados obtidos, é notável o potencial biocida da água ozonizada, entretanto, a presença de substrato orgânico, concentração e tempo de exposição são fatores que devem ser levados em consideração para maior eficácia.

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This study aims to demonstrate the antimicrobial potential of ozonated water under different conditions in the inactivation of Salmonella Heidelberg field strain isolated from a salmonellosis outbreak in swine. Initially, an analysis of the susceptibility profile to 18 antimicrobials was performed using the Disc Diffusion method. Then, bacterial inoculants of the strain were prepared at a concentration of 2x106 CFU/mL and then submitted to exposure tests to disinfectant (based on glutaraldehyde and benzalkonium chloride) and to ozonated water in different concentrations (0.5mg/L, 2.4mg/L, and 4.4mg/L). The residual ozone concentration was assessed using a portable spectrophotometer. Exposure to these products was assessed in the presence and absence of organic matter at three different times (1, 5, and 10 minutes of exposure). After each period, the samples were plated on brilliant green agar and the CFU count was performed 24 hours later. Besides, after each treatment, the genomic DNA was extracted and then we performed quality and integrity evaluation, using a NanoDrop spectrophotometer and using agarose gel electrophoresis. For statistical analysis, analysis of variance (ANOVA) was performed followed by the Tukey test, so that p values 0.05 were considered statistically significant. Was observed that after 1 minute of exposure of ozonated water to 4,4mg/L there was no bacterial growth in the absence of organic matter, unlike other treatments. However, for 5 and 10 minutes of exposure, the disinfectant was more efficient than those treated with ozone, inhibiting the growth of Salmonella Heidelberg in the presence of organic matter. Organic matter interfered with the performance of ozonated water since there was no difference between concentrations of ozone after 10 minutes of exposure. These results follow those observed when evaluating the yield and integrity of genomic DNA, which after 10 minutes of exposure those treated with ozonized water at 2.4 and 4.4mg/L and by disinfectant, showed reductions in concentrations (ng/L), which was well evidenced by agarose gel electrophoresis, with lighter bands. Thus, from the results obtained, the biocidal potential of ozonized water is notable, however, the presence of organic matter, concentration, and time of exposure are factors that must be taken into account for greater effectiveness.

Biblioteca responsável: BR68.1