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DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE MOLLICUTES ASSOCIADO A FATORES DE RISCO E QUALIDADE DO LEITE EM BOVINOS LEITEIROS

ANA CAROLINA NUNES DE MORAIS.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-220351

Resumo

A pecuária leiteira é uma das principais atividades do agronegócio brasileiro. Apesar do aumento na produção e consumo de leite, a produtividade dos rebanhos ainda é baixa. Dentre as causas de origem sanitária, destacam-se as mastites e as doenças reprodutivas. Em bovinos, Mollicutes são bactérias relacionadas a tais patologias sendo Mycoplasma bovis o agente de maior importância nas mastites, enquanto Ureaplasma diversum está associado a distúrbios reprodutivos. O objetivo deste estudo foi investigar a presença de Mollicutes em leite e trato reprodutivo de vacas leiteiras, identificar alterações no leite decorrentes da colonização intramamária, determinar fatores de risco associados à colonização intramamária e genital e identificar genotipicamente cepas de ureaplasmas circulantes. Foram obtidas amostras de leite (n=387) e de suabe vaginal (n=392) de vacas em lactação de rebanhos do Sudeste brasileiro, estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo. O leite foi submetido à reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção de Mollicutes e de espécies de micoplasmas associadas à colonização intramamária, à contagem de células somáticas (CCS), análise microbiológica e de composição centesimal. O material de trato reprodutivo, à PCR para detecção de Mollicutes e de U. diversum. Concomitantemente, foi aplicado o questionário epidemiológico para analisar fatores de risco, avaliados pelo teste de Qui-quadrado, sendo as variáveis estatisticamente significativas submetidas ao odds ratio (IC=95%). As amostras positivas para U. diversum foram sequenciadas a partir da região intergênica 16S-23S rRNA. Mollicutes foram detectados em 21% (4/19) dos rebanhos e 4,1% (16/387) dos animais, sendo 1,3% (5/387) positivos para M. bovis e 2,8% (11/387) para M. arginini. Nas propriedades onde houve Mollicutes no leite, rebanho maior que 150 animais [OR=3,51 (IC 95%; 1,11-11,08)], ordenha manual [OR=9,97 (IC 95%; 2,80-35,49)] e ausência de linha de ordenha [OR=6,54 (IC 95%; 1,92-22,29)] foram fatores de risco; as concentrações de gordura (2,27±1,96 g/100g), extrato seco total (11,15±1,91 g/100g) e a CCS (1213,19±2151,98 CS/mL) foram superiores às propriedades onde não houve a detecção (p<0,05). Quanto ao material de trato reprodutivo, 45,4% (178/392) e 21,7% (85/392) das amostras foram positivas para Mollicutes e U. diversum, respectivamente. Rebanho maior que 100 animais [OR=1,95 (95% IC 1,28-2,98)], produção média de leite superior a 500kg [OR=5,79 (IC 95%; 2,31-14,48)], novilhas [OR=4,04 (IC 95%; 1,10-14,85)], raça Holandesa [OR=2,29 (IC 95%; 1,45-3,60)], uso de inseminação artificial associada à transferência de embriões [OR=1,42 (IC 95%; 1,20-1,69)] e histórico de doença reprodutiva [OR=2,28 (IC 95%; 1,37-3,80)] foram associadas à infecção por Mollicutes, enquanto rebanho maior que 100 animais [OR=1,91 (IC 95%; 1,12-3,27)] foi associada com a infecção por U. diversum (p<0,05). A frequência de detecção no leite foi baixa, sendo este o primeiro relato de M. bovis no Rio de Janeiro e de M. arginini nos estados estudados. No trato reprodutivo, a frequência dos agentes foi alta e diferentes cepas de U. diversum estão disseminadas pelos estados, provavelmente pela grande movimentação de animais. Os fatores de risco elencados sinalizam a necessidade de adoção de boas práticas de manejo para evitar a disseminação dos agentes em rebanhos bovinos leiteiros criados sob condições semelhantes.
Dairy farming is one of the main activities of Brazilian agribusiness. Despite the increase in milk production and consumption, productivity in herds is still low. Among the causes of sanitary origin, mastitis and reproductive diseases stand out. In cattle, Mollicutes are bacteria related to such pathologies, Mycoplasma bovis being the most important agent in mastitis, while Ureaplasma diversum is associated with reproductive disorders. The aim of the study was to investigate the presence of Mollicutes in milk and reproductive tract of dairy cows, identify changes in milk resulting from intramammary colonization, determine risk factors associated with intramammary and genital colonization and genotypically identify strains of circulating ureaplasmas. Milk (n=387) and vaginal swab (n=392) samples were collected from lactating cows in herds in Southeastern Brazil, Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo states. Milk was subjected to polymerase chain reaction (PCR) to detect Molicutes and Mycoplasma species associated with intramammary colonization, somatic cell count (CCS), microbiological analysis and chemical composition. The material of reproductive tract, to PCR for detection of Mollicutes and U. diversum. Concomitantly, an epidemiological questionnaire was applied to analyze risk factors, analyzed by Chi-square test, with the variables being statistically related to odds ratio (CI=95%). Positite swab samples for U. diversum were sequenced from 16S-23S rRNA intergenic region. Molicutes were detected in 21% (4/19) of the herds and 4.1% (16/387) of the animals, being 1.3% (5/387) positive for M. bovis and 2.8% (11/387) for M. arginini. In properties where Mollicutes were in milk, herds greater than 150 animals [OR=3.51 (95% CI; 1.11-11.08)], manual milking [OR=9.97 (95% CI; 2.80-35.49)] and absence of a milking line [OR=6.54 (95% CI; 1.92-22.29)] were risk factors; fat concentration (2.27±1.96 g/100g), total dry extract (11.15±1.91 g/100g) and CCS (1213.19±2151.98 CS/mL) were superior to the properties where there was no detection (p<0.05). Considering the reproductive tract material, 45.4% (178/392) and 21.7% (85/392) of samples were positive for Mollicutes and U. diversum, respectively. Herds greater than 100 animals [OR=1.95 (95% CI 1.28-2.98)], average milk production greater than 500kg [OR=5.79 (95% CI; 2.31-14.48 )], heifers [OR=4.04 (95% CI; 1.10-14.85)], Holstein breed [OR=2.29 (95% CI; 1.45-3.60)], use of artificial insemination associated with embryo transfer [OR=1.42 (95% CI; 1.20-1.69)] and history of reproductive disease [OR=2.28 (95% CI; 1.37-3.80 )] were associated with Mollicutes infection, while herds greater than 100 animals [OR=1.91 (95% CI; 1.12-3.27)] was associated with U. diversum infection (p<0.05). The frequency of detection in milk was low, and it was the first report of M. bovis in Rio de Janeiro and M. arginini in the studied states. In the reproductive tract, the frequency of the agents was high and different strains of U. diversum were spread across the states, probably due to the large movement of animals. The listed risk factors highlights the need for the adoption of good management practices to prevent the spread of the agents in dairy cattle herds raised under similar conditions.
Biblioteca responsável: BR68.1