Influência de diferentes substâncias adesivas e da resposta de eficácia do teste in vitro para avaliação do Dinotefuran associado ao Piriproxifen sobre os ovos de Ctenocephalides felis felis (Siphonaptera, Pulicidae)

RESUMO

O presente estudo teve como objetivo avaliar a influência de três substâncias adesivas sobre o desenvolvimento de ovos da pulga Ctenocephalides felis felis até a fase adulta e aplicar esta metodologia para avaliar a ação da formulação contendo dinotefuran e piriproxifen. Na primeira etapa, foram testadas as seguintes substâncias adesivas cola em bastão, silicone líquido e cola adesiva instantânea (cianoacrilato). Para cada substância, foram utilizados 10 ovos por placa, em 10 repetições. Os ovos foram obtidos de uma colônia laboratorial. As larvas que eclodiram foram contadas no dia 7 e incubadas com meio larval a temperatura de 27± 1ºC e 80% de umidade em câmara climatizada e 30 dias depois foi feita a contagem de pulgas adultas. Para o teste de eficácia in vitro, dois animais da espécie felina receberam uma única dose de uma formulação tópica contendo o adulticida dinotefuran e um regulador de crescimento de artrópodes piriproxifen e dois animais não receberam nenhum tratamento, mantidos como controle. As infestações dos animais foram realizadas nos dias +35, +42, +49, +54, +63, +70 e +77 e as coletas de ovos foram feitas sempre 48 horas após infestação, nos dias +37, +44, +51, +56, +65, +72 e +79. Foram preparadas três repetições com 10 ovos cada, de acordo com a metodologia e utilizando a substância adesiva de melhor desempenho na etapa anterior e calculado a eficácia para cada desafio realizado. Os resultados da primeira etapa dos 100 ovos incubados por substância adesiva, 64, 51 e 76 larvas se desenvolveram até o terceiro estágio, respectivamente para os grupos cola em bastão (CB), cianoacrilato (CA) e silicone líquido (SL). Dentre essas larvas incubadas, 59, 45 e 68 adultos se desenvolveram até a fase adulta, respectivamente nos grupos CB, CA e SL. O percentual de adultos recuperados em relação ao número de larvas incubadas, respectivamente à CB, CA e SL, foi de 92,2%, 88,2% e 89,5%, porém, a substância de escolha para a metodologia foi o silicone líquido devido a sua ótima recuperação de larvas em relação aos ovos e a praticidade da técnica de dispor a cola na placa de Petri. Com relação a avaliação de dinotefuran e piriproxifen, o percentual de inibição da eclosão dos ovos foi acima de 90% no D+44 e caiu para 18,5% no D+72 e a eficácia contra emergência de adultos foi de 100% no dia +44 e 23,8% no dia +72. Com base nos resultados, foi possível avaliar que a substância adesiva a base de silicone líquido não influenciou no desenvolvimento das larvas através de uma metodologia in vitro, sendo aplicável para monitorar o desenvolvimento de larvas e pupas de pulgas sob a influência de um regulador de crescimento de insetos, assim como a emergência de adultos. Desse modo, a partir deste método, conclui-se que a associação de dinotefuran e piriproxifen foi eficaz na interrupção do ciclo de Ctenocephalides felis felis.

ABSTRACT

The present study aimed to evaluate the influence of three sticky substances on the development of flea Ctenocephalides felis felis eggs until adulthood and apply this methodology to evaluate the action of the formulation containing dinotefuran and pyriproxyfen. In the first step, the following adhesive substances were tested stick glue, liquid silicone and instant adhesive glue (cyanoacrylate). For each substance, 10 eggs per plate were used, with 10 repetitions. The eggs were obtained from a laboratory colony. The hatching larvae were counted at day 7 and larval medium were placed into incubators maintained at 27 ± 1ºC and 80% relative humidity. The number of adult fleas was counted at day 30. For the in vitro efficacy test, two animals of the feline species received a single dose of a topical formulation containing the adulticide dinotefuran and an insect growth regulator pyriproxyfen and two animals received no treatment, maintained as controls. Animal infestations were carried out on days +35, +42, +49, +54, +63, +70 and +77 and egg collections were always performed 48 hours after infestation, on days +37, +44, + 51, +56, +65, +72 and +79. Three repetitions were prepared with 10 eggs each, according to the methodology and using the sticky substance with the best performance in the previous step and calculating the effectiveness for each time point. The results of the first step of the 100 eggs incubated by each substance, 64, 51 and 76 larvae developed up to the third stage, respectively for the glue stick (CB), cyanoacrylate (CA) and liquid silicone (SL) groups. Among these incubated larvae, 59, 45 and 68 adults developed until adulthood, respectively in the CB, CA and SL groups. The percentage of adults recovered related to the number of incubated larvae, respectively to CB, CA and SL, was 92.2%, 88.2% and 89.5%. However, the substance of choice for the methodology was liquid silicone due to its excellent recovery of larvae compared to eggs incubated and the usefulness of the technique placing the glue on the Petri dish. Regarding the evaluation of dinotefuran and pyriproxyfen, the percentage of egg hatching inhibition was above 90% on D + 44 and dropped to 18.5% on D + 72 and the efficacy against emergence of adults was 100% on the day +44 and 23.8% on the day +72. Based on the results, it was possible to evaluate the liquid silicone sticky substance did not influence the development of larvae through an in vitro methodology, being applicable to monitor the development of fleas larvae and pupas under the influence of an insect growth regulator, as well as the emergence of adults. Therefore, from this method, it is concluded that the combination of dinotefuran and pyriproxyfen was effective in interrupting the cycle of C. felis felis.