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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-220778

Resumo

Na busca de métodos alternativos ao uso de antimicrobianos utilizados na atividade avícola no controle de Salmonella sp., a inativação fotodinâmica (PDI) surge como uma possibilidade de aplicação neste cenário. Este trabalho foi realizado com a finalidade de avaliar a atividade fotodinâmica do azul de metileno (MB) na redução de Salmonella Typhimurium e Salmonella Heidelberg. No primeiro experimento foi avaliada a atividade antimicrobiana do MB in vitro, de forma que os sorovares foram incubados, separadamente, com o fotossensibilizador em três concentrações (10, 20 e 30 M) e irradiados durante 30 minutos. Realizou-se também avaliação da fotodegradação do DNA genômico e alterações nas estruturas celulares. No segundo experimento, foi analisada a capacidade sanitizante da PDI em fragmentos de caixa de transporte e amostras de ração. Esses foram contaminados com Salmonella Typhimurium e Heidelberg e posteriormente, incubados com MB nas concentrações de 10, 20 e 30 M (caixa de transporte) e 1%, 1,5% e 2% (ração) e irradiados por até 45 minutos. A irradiação em ambos experimentos foi realizada com lâmpada halógena com faixa espectral de 400 a 900 nm e a viabilidade bacteriana expressa em UFC/mL. Nos estudos in vitro, o fotossensibilizador testado na concentração de 30 M foi eficaz na completa inativação de Salmonella Typhimurium e Salmonella Heidelberg, após 20 e 30 minutos (156 e 234 J/cm2) de irradiação, respectivamente. A viabilidade bacteriana foi alterada devido aos fotodanos observados no DNA, citoplasma e parede bacteriana. Nos fragmentos de caixa de transporte a menor taxa de sobrevivência bacteriana foi obtida utilizando azul de metileno na concentração de 20 M; enquanto para ração a concentração de 2% de azul de metileno foi a mais eficiente, ambos irradiados durante 45 minutos (351 J/cm2). Os resultados obtidos neste estudo apontam uma possível utilização dessa técnica na avicultura.

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In the search for alternative methods to the use of antimicrobials used in poultry activity to control Salmonella sp., photodynamic inactivation (PDI) appears as a possibility of application. This work was carried out with the purpose of evaluating the photodynamic activity of methylene blue (MB) in the reduction of Salmonella Typhimurium and Salmonella Heidelberg. In the first experiment, the antimicrobial activity of the MB was evaluated in vitro, so that the serovars were incubated separately with the photosensitizer in three concentrations (10, 20 and 30 M) and irradiated for 30 minutes. An evaluation of genomic DNA photodegradation and changes in cell structures were also carried out. In the second experiment, the sanitizing capacity of the PDI was analyzed in fragments of the transport cages and samples of poultry feed. These were contaminated with Salmonella Typhimurium and Heidelberg and later incubated with MB in concentrations of 10, 20 and 30 M (transport cages) and 1%, 1.5% and 2% (feed) and irradiated for up to 45 minutes. The irradiation in both experiments was performed with a halogen lamp with a spectral range from 400 to 900 nm and the bacterial viability expressed in CFU/mL. In in vitro studies, the photosensitizer tested at a concentration of 30 M was effective in completely inactivating Salmonella Typhimurium and Salmonella Heidelberg, after 20 and 30 minutes (156 and 234 J/cm2) of irradiation, respectively. The bacterial viability was altered due to the photodamage observed in the DNA, cytoplasm and bacterial wall. In the fragments of the transport cages, the lowest bacterial survival rate was obtained using methylene blue at a concentration of 20 M; while for feed the concentration of 2% methylene blue was the most efficient, both irradiated for 45 minutes (351 J/cm2). The results obtained in this study point to a possible use of this technique in poultry.

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