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INVESTIGAÇÃO DO EFEITO INIBITÓRIO DO EXTRATO HIDROALCOÓLICO DA Cunila spicata Benth. SOBRE A MIGRAÇÃO CELULAR INDUZIDA POR AGENTES FLOGÍSTICOS NAS VIAS AÉREAS DE CAMUNDONGOS

CAROLINE BALDESSAR DAL MOLIN.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-220872

Resumo

A asma é uma doença respiratória, caracterizada por uma inflamação crônica das vias aéreas, destacando-se em diferentes regiões do Brasil. Fatores genéticos, poluição do meio ambiente, estilo de vida, tabagismo entre outros estão relacionados a esta patologia que desencadeia sintomas como sibilo, asfixia, tosse, levando a supressão de ar. O uso de plantas no tratamento de enfermidades é tão antigo quanto a espécie humana, que tem optado pelo uso de recursos vegetais. Dentre esses recursos está a planta Cunila spicata, (Lamiaceae), chamada de poejo-do-campo, é utilizada na medicina popular para afecções do sistema respiratório e digestório. Ainda que a espécie seja largamente utilizada na terapia alternativa para sintomas respiratórios e, devido ao grande potencial na biodiversidade que o nosso país possui, estudos mais detalhados tornam-se importantes na descoberta de novos fármacos, aprimoramento da terapêutica, bem como na garantia da segurança de quem utiliza. No presente trabalho foi analisada a composição fitoquímica da C. spicata e investigados os efeitos inibitórios do extrato hidroalcoólico da C. spicata (EHCS) sobre a migração de células inflamatórias nas vias aéreas de camundongos. A obtenção do EHCS foi realizada por extração assistida por ultrassom, concentrado em rotaevaporador e seco em estufa. A análise fitoquímica foi através de cromatografia gasosa com espectrometria de massa. Para os estudos in vivo, camundongos Balb-c (25 a 35 g) foram pré-tratados por gavagem com PBS (controle negativo, CN), prednisolona 4 mg/Kg (controle positivo) e diferentes doses (30, 100 e 300 mg/kg) do EHCS. Os animais foram submetidos à nebulização com agentes pró-inflamatórios das vias aéreas tais como carragenina, histamina, capsaicina, bradicinina e composto 48/80 e após 2 horas eutanasiados para a realização do lavado broncoalveolar, onde foi coletado o líquido que foi previamente introduzido nos pulmões submetidas a sedimentação em câmara de suta, para a leitura do número total de células em câmara de Neubauer e preparadas lâminas para contagem de células diferenciais, por microscopia. Foram identificados quatorze fitocompostos, sendo os principais, 2-Bornanone, mentofurano e canfeno no EHCS. Dentre os grupos de animais tratados com o EHCS, todos apresentaram inibição máxima (IM) significativas ao serem desafiados com agentes pró-inflamatórios por nebulização. Os que receberam carragenina, a IM foi de 72,77 ± 3,88% (300 mg/Kg), em relação ao CN. Houve predominância de linfócitos (59,18 ± 4,07%). Para o grupo histamina a IM foi de 64,03 ± 4,33% (300 mg/Kg), em relação ao CN, com predominância no número de macrófagos (76,53 ± 2,78%). No grupo submetido à capsaicina, a IM apresentada, foi de 38,90 ± 11,31% (300 mg/Kg), ocorrendo uma maior migração de macrófagos (80,98 ± 3,44%) na maior dose. Para os animais expostos à bradicinina a IM foi de 48,63 ± 3,95% (300 mg/Kg) com predominância de macrófagos (64,33 ± 10,04%). No grupo que recebeu composto 48/80 houve IM de 40,25 ± 5,30% (100 mg/Kg), com maior ocorrência de macrófagos (72,97 ± 4,23%). Não foram encontradas eosinófilos. Deste modo, conclui-se que, apesar do(s) mecanismo(s) de ação, o EHCS reduziu a inflamação das vias aéreas, sustentando seu uso etnofarmacológico.
Asthma is a respiratory disease characterized by a chronic airway inflammation, observed in different Brazilian regions. Genetic predisposition, environmental pollution, lifestyle, smoking habit, among others, are some factors which are related to this disease, carrying on symptoms such as wheezing, asphyxia and cough. The use of plants on treatment of diseases is as old as human species, which has opted for the use of plant resources. Among that resources, there is the Cunila spicata (Lamiaceae), popularly known as poejo-do-campo, that is a plant used in popular medicine to treat respiratory and gastrointestinal diseases. Even that this species is widely used in popular medicine in cases of respiratory symptoms and, considering the biodiversity of the Brazil, it is important to discover new drugs, improving therapeutics and ensuring safety for consumers. In this study, it was analyzed the phytochemical composition of the C. spicata and investigated the inhibitory effects of the hydroalcoholic extracts from C. spicata (EHCS) on migration of inflammatory cells in airway of mice. The EHCS was obtained by extraction assisted by ultrasound, concentrated in a rotary evaporator and oven dried. The phytochemical analysis was achieved using gas chromatography and mass spectrometry. To perform in vivo studies, Balb-c mice (25 -35 g) were pretreated by gavage with PBS (negative control, NC), prednisone 4mg/Kg (positive control) and different doses of EHCS (30, 100 and 300 mg/kg) within treated group. The mice were submitted to nebulization with proinflammatory agents such as carrageenan, histamine, capsaicin, bradykinin and 48/80 compound. After 2 hours, the mice were euthanized to perform broncoalveolar lavage to obtain samples. The obtained liquid sample was submitted to sedimentation using the Suta chamber. Total number of cells were counted on the Neubauer chamber and differential count were performed by microscopy. Fourteen phytocomponents were identified on EHCS, which the main are 2-Bornanone, menthofuran and camphene. Among mice from the treated group, all of them presented a significant maximal inhibition (MI) when exposed to proinflammatory agents by nebulization. Mice that received carrageenan, MI was 72,77 ± 3,88% (300 mg/Kg) in comparison to CN and there was a predominance of lymphocytes (59,18 ± 4,07%). MI in histamine group was 64,03 ± 4,33% (300 mg/Kg) in comparison to CN and there was a predominance of macrophages (76,53 ± 2,78%). In capsaicin group, MI was 38,90 ± 11,31% (300 mg/Kg) and occurred a greater migration of macrophages (80,98 ± 3,44%) at the highest dose. In mice exposed to bradykinin, MI was 48,63 ± 3,95% (300 mg/Kg) with macrophages predominance (64,33 ± 10,04%) while in the 48/89 compound group, IM was 40,25 ± 5,30% (100 mg/Kg) with a greater migration of macrophages (72,97 ± 4,23%). Eosinophils were not observed. It is possible to conclude that, despite the mechanism of action, the EHCS reduced airway inflammation, supporting its ethnopharmacological uses.
Biblioteca responsável: BR68.1