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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-220913

Resumo

A mastite é uma importante enfermidade de rebanhos bovinos leiteiros que acarreta prejuízos econômicos significativos. Espécies de estafilococos são frequentemente isoladas desse processo infeccioso. Bactérias podem produzir biofilme associado a uma maior capacidade de persistência tanto no organismo hospedeiro quanto no ambiente. A habilidade de produzir biofilme e suas possíveis implicações na disseminação e tratamento da doença são mais estudadas na espécie Staphylococcus aureus, mas para várias outras espécies os estudos são escassos. Desta forma, o presente estudo teve como objetivos investigar a ocorrência da mastite em rebanhos leiteiros de produção familiar no estado do Acre, Brasil, e analisar as espécies de estafilococos envolvidas com mastite bovina, a habilidade da produção de biofilme e a associação de sua produção com multiresistência e intensidade da reação no CMT. Amostras de leite foram coletadas em 23 propriedades leiteiras situadas em cinco municípios do estado do Acre. Um total de 339 vacas mestiças foram testadas pelo CMT, sendo detectados 109 animais (229 tetos) reagentes ao teste. Após isolamento em ágar sangue, os cocos Gram positivos produtores de catalase foram submetidos à identificação por MALDI TOF MS. Um total de 103 estirpes foram identificadas como estafilococos, sendo mais prevalentes as espécies Staphylococcus chromogenes (58,3%) e S. aureus (19,4%). A produção de biofilme foi avaliada quantitativamente pelo teste de aderência em microplaca. Dentre todas as amostras de estafilococos, 71,8% foram produtoras de biofilme. A maioria das amostras de S. chromogenes (68,3%) apresentou capacidade de produzir biofilme, variando de fraco (43.3%), moderado (13.3%) a forte (11,7%) produtor. Entre as amostras de S. aureus, 50% não foram produtoras e nenhuma foi produtora forte. Essa capacidade de produção de biofilme mostrou-se associada à multirresistência a antimicrobianos, além de diminuir a intensidade no teste CMT, podendo mascarar o diagnóstico. Adicionalmente, foi investigada a presença de genes relacionados com produção de biofilme (IcaD, cna, eno, ebpS) em 55 cepas de Staphylococcus spp. produtoras de biofilme. Todos os genes testados foram encontrados simultaneamente apenas na espécie S. chromogenes. Esses resultados podem estar associados à ampla distribuição de casos de mastite bovina por S. chromogenes nos rebanhos estudados, uma vez que a produção de biofilme tem importante papel na adesão e colonização do epitélio mamário, bem como em equipamentos de ordenha, o que favorece a transmissão e dispersão do patógeno e dificulta o controle e tratamento da mastite.

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Mastitis is an important disease of dairy herds that causes significant economic losses. Staphylococcus species are often isolated from this infectious process. The capacity to produce biofilm is related to a greater ability to persist in both the host organism and the environment. Biofilm production has been extensively studied in S. aureus, but little studied in other specie. Thus, the present study aimed to investigate staphylococcal species involved with bovine mastitis in dairy herds in northern Brazil, their ability to produce biofilm and the implications of this virulence factor. Milk samples were collected from 23 dairy farms located in 5 municipalities in the state of Acre. A total of 339 crossbred cows were tested by California Mastitis Test (CMT), with 109 animals (229 udder ceilings) been reactive to the test. After bacterial isolation in blood agar, the catalase-positive and Gram-positive cocci were submitted to identification by MALDI TOF MS. Of 103 strains identified as staphylococci, Staphylococcus chromogenes (58.3%) and S. aureus (19.4%) were the most prevalent species. Biofilm production was quantitatively evaluated by the microplate adherence test. Among all Staphylococcus strains, 71.8% were biofilm producers. Most strains of S. chromogenes (68.3%) had the capacity to produce biofilm, ranging from weak (43.3%), moderate (13.3%) to strong (11.7%) producer. Among S. aureus strains, 50% were non-biofilm producers and none were strong producers. Our data shows an association between biofilm production and multidrug resistance, and an association with the reduction in the response to CMT test, which can mask the diagnosis. Additionally, the presence of genes related to biofilm production (IcaD, cna, eno, ebpS) was investigated in 55 biofilm producers strains of Staphylococcus spp.. All the tested genes were found simultaneously only in the S. chromogenes specie. These results may be associated with the wide distribution of cases of bovine mastitis caused by S. chromogenes on the studied herds, since the production of biofilm has an important role in the adhesion and colonization of the mammary epithelium, as well as in milking equipment, which favors the transmission and dispersion pathogen and makes it difficult to control and treat mastitis.

Biblioteca responsável: BR68.1