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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-220916

Resumo

O desenvolvimento de técnicas reprodutivas que possam ser utilizadas nos animais em vida-livre permite coletar e preservar material genético que convencionalmente não teríamos acesso, permitindo aumentar a variabilidade de amostras em um biobanco. Porém, infelizmente, muitas das técnicas conhecidas e amplamente utilizadas, foram desenvolvidos em ambientes laboratoriais controlados e que quando aplicados a campo, não é possível obter os mesmos resultados, sendo necessário a criação de novos protocolos para essas situações. Entre os meios comerciais, é de maior interesse para uso a campo, um diluente que possa ser armazenado à temperatura ambiente, sem necessidade de armazenamento a 5°C e que obtenha bons resultados com aumento do tempo de equilíbrio. É por isto que neste estudo, objetivou-se avaliar a viabilidade de coletar sêmen de Cachorro-do-mato (Cerdocyon thous), in situ, utilizando a técnica da cateterização uretral após indução farmacológica com medetomidina na dose 0,1 mg/kg e avaliar se o meio de congelamento de sêmen comercial (optiXcell) que permite armazenamento a temperatura ambiente para uso em canídeos, facilitando sua manutenção e utilização a campo. Além disso, testou-se também dois períodos de equilíbrio (duas e quatro horas) no resfriamento com o objetivo de avaliar se é possível prolongar esse tempo para quatro horas, o que tornaria mais favorável seu uso a campo. Com o primeiro experimento, utilizando cães domésticos como modelo experimental, foi avaliado a qualidade seminal pós-descongelamento em três diluentes comerciais (CaniPlus Freeze, Triladyl, OptiXcell) após duas e quatro horas de resfriamento através de análise subjetiva, por sistema computadorizado de análise seminal e por citometria de fluxo. Neste experimento, obtivemos resultados favoráveis ao uso do optixcell com quatro horas de tempo de equilíbrio, este tratamento demonstrou boas taxas de manutenção das membranas espermáticas, além disso obteve resultados próximos aos outros dois meios já utilizados em cães domésticos, podendo ser uma nova opção prática. Para o segundo experimento, a coleta farmacológica em cachorros-do-mato obteve quatro coletas com qualidade para criopreservação, demonstrando que este método pode ser utilizado em momentos que a manipulação digital ou eletroejaculação não possam ser utilizados. Também foi observado que os melhores resultados de coleta foram obtidos nos meses de junho a setembro, podendo indicar sazonalidade reprodutiva. Não foi possível realizar o descongelamento de sêmen de cachorros-do-mato com qualidade, muito provavelmente devido aos intemperes de sua manipulação em ambiente não controlado, demonstrando a necessidade e urgência de estabelecermos protocolos aplicáveis a campo.

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The development of reproductive techniques that can be used in free-living animals allows the collection and preservation of genetic material that we would not conventionally have access to, allowing to increase the variability of samples in a biobank. However, unfortunately, many of the known and widely used techniques were developed in controlled laboratory environments and that when applied to the field, it is not possible to obtain the same results, being necessary to create new protocols for these situations. Among commercial freezing médium for semen, a diluent that can be stored at room temperature, without the need for storage at 5°C and that obtains good results with extended equilibrium time, is of most interest for use in the field. That is why this study aimed to evaluate the viability of collecting semen from Crab-eating-fox (Cerdocyon thous), in situ, using the technique of urethral catheterization after pharmacological induction with medetomidine at a dose of 0.1 mg/kg and evaluate whether the comercial semen freezing medium (optiXcell) that allows storage at room temperature can be used in canids, facilitating their maintenance and use in the field. In addition, two periods of equilibrium (two and four hours) in the cooling were also tested in order to assess whether it is possible to extend this time to four hours making it more effective in the field. With the first experiment, using domestic dogs as an experimental model, the post-thaw seminal quality was evaluated in three commercial diluents (CaniPlus Freeze, Triladyl, OptiXcell) after two and four hours of cooling. They were analyzed through computerized seminal analysis system for sperm motility and by flow cytometry. In this experiment, we obtained favorable results for the use of optixcell in dogs sperm with four hours of equilibrium time, this treatment demonstrated good maintenance rates of sperm membranes, and in addition, the OptiXcell medium obtained results close to the other two extenders already used in domestic dogs, which can be a new practical option. For the second experiment, pharmacological collection in crab-eatingfoxes obtained four collections with quality for cryopreservation, demonstrating that this method can be used at times when digital manipulation or electroejaculation cannot be used. It was also observed that the best collection results were obtained between June and September, which may indicate reproductive seasonality. Although the optixcell medium has been validated for use in domestic dogs, it was not possible to thaw semen from wild dogs withquality and viability of use, most likely due to the weathering of its handling in an uncontrolled environment, demonstrating the need and urgency to establish protocols applicable to the field.

Biblioteca responsável: BR68.1