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EFEITO DO RESVERATROL NA CRIOPRESERVAÇÃO DE SÊMEN DE GARANHÕES DA RAÇA CRIOULA

NATAN DA CRUZ DE CARVALHO.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-221056

Resumo

A possibilidade de transportar material genético por longas distâncias torna o uso de sêmen congelado altamente necessário para a indústria equina, mas os baixos índices de fertilidade decorrentes de danos celulares pelo processamento limitam sua utilização. Os fatores que ocasionam estes danos são diversos, entre eles, destaca-se a produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) e o estresse oxidativo. A adição de antioxidantes no diluente pode minimizar estes danos, preservando parâmetros espermáticos e incrementado a fertilidade do sêmen congelado. O Resveratrol (RSV) é um polifenol derivado de plantas e apresenta algumas propriedades biológicas, entre elas, o efeito antioxidante em diversos sistemas. Deste modo, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a ação de RSV adicionado ao diluente para congelamento de sêmen de garanhões da raça Crioula sobre a viabilidade espermática e o estresse oxidativo. Para tal, doze ejaculados (n = quatro garanhões, três ejaculados cada), coletados com vagina artificial, foram diluídos até a concentração de 50x106 sptz/mL e fracionados em duas alíquotas. As alíquotas foram centrifugadas a 500G por 15min, o sobrenadante descartado e os pellets ressuspendidos e ajustados na concentração de 200x106 sptz/mL com diluente de congelamento: Botucrio® sem suplementação (Controle), ou suplementado com 10 M RSV. Após a manutenção do sêmen em nitrogênio líquido, duas palhetas de cada grupo foram descongeladas e submetidas a avaliações de cinética espermática, longevidade, morfologia, integridade de membrana plasmática, acrossomal e potencial de membrana mitocondrial, produção de ERO e potencial antioxidante total. Com este estudo, conclui-se que a adição de 10 M de RSV em diluente de congelamento não influenciou nos parâmetros cinéticos, bioquímicos e funcionais de espermatozoides descongelados de garanhões da raça Crioula. Mais estudos devem ser realizados para definição de perfis de estresse oxidativo e concentrações adequadas para preservação da qualidade do sêmen descongelado.
The possibility of transporting genetic material over long distances makes the use of frozen semen highly necessary for the equine industry, but the low fertility rates resulting from cellular damage by processing limit its use. The factors that because damages are diverse, among them, the production of reactive oxygen species (ROS) and oxidative stress stand out. The addition of antioxidants in the diluent can decrease damages, preserving sperm parameters and increasing the fertility of frozen semen. Resveratrol (RSV) is a polyphenol derived from plants and has some biological properties, including antioxidant effect in several systems. Thus, the aim of this study was to check the action of RSV added to the diluent for freezing the semen of stallions of the Crioula breed on sperm viability and oxidative stress. For this purpose, four Cioulos stallions, with known fertility, had semen collected three times during the breeding season. The semen free of gel fraction was diluted and fractionation in two aliquots, one frozen in Botucrio® diluent without any supplementation (control), and the other in diluent supplemented with 10 M RSV. After maintaining the semen in liquid nitrogen, two straws from each group were thawed and subjected to evaluations of sperm kinetics, longevity, morphology, plasma membrane integrity, acrosomal and mitochondrial membrane potential, ROS production and total antioxidant potential. With this study, it we concluded that the addition of 10 M of RSV in freezing diluent did not influence the kinetic, biochemical and functional parameters of thawed sperm from Crioulos stallions. Further studies should be carried out to define oxidative stress profiles and adequate concentrations to preserve the quality of thawed semen.
Biblioteca responsável: BR68.1