PESQUISA DE Trypanosoma sp. EM PEIXES DE ÁGUA DOCE

RESUMO

Parasitos do gênero Trypanosoma já foram relatados em diversas espécies de peixes de água salgada e doce, sendo a maioria das espécies descritas com base em características morfológicas. Possuem um ciclo de vida heteroxeno e são transmitidos por hirudíneos. O presente trabalho teve por objetivo verificar a presença de Trypanosoma sp. em peixes de água doce da espécies Hoplias malabaricus no município de Santo Amaro, Maranhão, Brasil. Foram realizadas quatro coletas totalizando 50 peixes. Amostras de sangue e órgãos (baço, fígado, rim e coração) para diagnóstico molecular foram coletadas. Esfregaços sanguíneos também foram confeccionados para a pesquisa do parasita. A prevalência de Trypanosoma nos esfregaços sanguíneos foi de 28% (14/50) e a intensidade de 9,21% (129/14). Com o intuito de identificar as espécies de Trypanosoma por método molecular (PCR), realizou-se extração de DNA das as amostras sangue e órgãos (baço, fígado, rim e coração). Este foi utilizado para amplificação por PCR de um segmento gênico, com um fragmento de 800 pb do gene que codifica a enzima gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase glicossômica (gGAPDH). Na PCR, 15,84% (29/183) amostras foram positivas, os quais foram purificadas e submetidas à clonagem em plasmídeo pGEM-T. Desta forma, obteve-se clones de 13 amostras. Os peixes apresentaram sequências identificadas como uma espécie próxima a Trypanosoma clandestinus e Trypanosoma granulosum, sugerindo que pode haver uma relação entre essas espécie de Trypanosoma em peixes. Estudos futuros, usando sequências V7V8 SSU rRNA e gGAPDH, para uma melhor caracterização molecular são necessários para confirmar a presença das espécies de tripanosomas de peixes encontradas na pesquisa para inserção dentro do clado aquático.

ABSTRACT

Parasites of the genus Trypanosoma have already been listed in several species of freshwater and saltwater fish, most of which are described based on morphological characteristics. They have a heteroxene life cycle and are transmitted by hirudines. The present study aimed to verify the presence of Trypanosoma sp. in freshwater fish of the species Hoplias malabaricus in the municipality of Santo Amaro, Maranhão, Brazil. Four collections were made, totaling 50 fish. Samples of blood and organs (spleen, liver, kidney and heart) for molecular diagnosis were collected. Blood smears were also made to search for the parasite. The prevalence of Trypanosoma in blood smears was 28% (14/50) and the intensity was 9.21% (129/14). In order to identify Trypanosoma species by molecular method (PCR), DNA extraction was performed from the blood and organs samples (spleen, liver, kidney and heart). This was used for PCR amplification of a gene segment, with an 800 bp fragment of the gene that encodes the glyceral glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase enzyme (gGAPDH). In PCR, 15,84% (29/183) samples were positive, which were purified and cloned in plasmid pGEM-T. In this way, clones of 13 samples were obtained. The fish presented sequences identified as a species close to Trypanosoma clandestinus and Trypanosoma granulosum, suggesting that there may be a relationship between these species of Trypanosoma in fish. Future studies, using V7V8 SSU rRNA and gGAPDH sequences, for better molecular characterization are needed to confirm the presence of the fish trypanosome species found in the research for insertion into the aquatic clade.