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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-221624

Resumo

Estudos mais aprofundados dos processos de espermatogênese e maturação epididimária durante a senescência na espécie canina são necessários, permitindo elucidar as características patológicas do ejaculado de cães em idade senil. O presente estudo tem como objetivo comparar entre cães jovens e senis as características vasculares, hemodinâmicas, biométricas e ecogênicas do parênquima testicular e epididimário; a expressão dos receptores de LH, estrógeno e andrógeno no testículo e nos três segmentos epididimários; a morfo-funcionalidade dos espermatozoides provenientes dos três segmentos epididimários e as diferenças histo-morfológicas do parênquima testicular e epididimário. Foram selecionados dez cães jovens em maturidade reprodutiva (1 a 4 anos) e oito cães senis (acima de 7 anos), de diferentes raças, pesando entre 10 e 40 kg, constituindo dois grupos experimentais: Grupo Jovem e Grupo Senil. Os animais foram avaliados por ultrassonografia escrotal bidimensional, Doppler espectral da artéria testicular e Doppler colorido dos testículos e epidídimos. Após orquiectomia, a expressão dos receptores de andrógeno, LH e estrógeno foi avaliada no parênquima testicular e epididimário por meio das técnicas de RT-PCR e imunohistoquímica. Ainda, espermatozoides foram colhidos dos três segmentos epididimários (cabeça, corpo e cauda) e avaliados quanto a motilidade, concentração, morfologia, integridade de membranas acrossomal e plasmática, função mitocondrial e condensação da cromatina espermática. Para análise estatística, foi realizado teste T de Student ou Wilcoxon para comparação entre os grupos e os dados de RT-PCR foram analisados pelo procedimento MIXED, considerando-se P<0,05 para diferenças significativas. O grupo Jovem apresentou maior velocidade de fluxo sanguíneo e menor índice de pulsatilidade na artéria testicular, bem como maior vascularização do parênquima testicular em relação ao Grupo Senil. Os animais senis apresentaram padrão de expressão testicular e epididimário dos receptores de andrógeno, LH e estrógeno alfa distinto dos cães jovens. Não foi constatada a expressão do receptor de estrógeno beta nos testículos e epidídimos de cães. Cães senis apresentaram alterações de concentração espermática, porcentagem de defeitos espermáticos, padrão de motilidade, lesão de membranas plasmática e acrossomal, potencial e atividade mitocondrial e condensação de cromatina dos espermatozoides. Como conclusão, a senescência na espécie canina altera a hemodinâmica da artéria testicular e vascularização dos testículos, sem modificar a biometria e ecogenicidade testicular e epididimária. Ademais, há modificação na expressão diferencial dos receptores hormonais (andrógeno, estrógeno alfa e LH), influenciando o ambiente testicular e epididimário e, por consequência, prejudicando a espermatogênese e maturação espermática no trajeto epididimário, culminando em alterações morfo-funcionais dos espermatozoides em cães.

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The study on the spermatogenesis and epididymal maturation in the canine species during senescence is necessary to further elucidate the pathological sperm features of aged dogs. The present study aims to compare between young and senile dogs the vascular, hemodynamic, biometric and echogenic features of testicular and epididymal parenchyma; the tissue expression of LH, estrogen and androgen receptors in the testis and epididymal caput, corpus and cauda; the morpho-functionality of epididymal sperm and the histo-morphological differences of testis and epididymides parenchyma. Ten young dogs within reproductive age (1 to 4 years) and eight senile dogs (over 7 years), of different breeds, weighing between 10 and 40 kg, were selected and assigned to two experimental groups: Young Group and Senile Group. Dogs were evaluated through B-mode scrotal ultrasound, testicular artery spectral Doppler and color Doppler of the testis and epididymides. After orchiectomy, the expression of androgen, LH and estrogen receptors were evaluated in testis and epididymis parenchyma through RT-PCR and immunohistochemistry. Moreover, sperm were harvested from the caput, corpus and cauda epididymides and evaluated for motility, concentration, morphology, integrity of acrosomal and plasma membranes, mitochondrial functioning and chromatin condensation. For statistical analysis, Student's T test or Wilcoxon was performed to compare between the groups and the RT-PCR data were analyzed using proc MIXED, considering P<0.05 as significant different. The Young group showed higher testicular artery blood flow speed and lower pulsatility index, as well as higher testicular vascularization compared to the Senile Group. Senile dogs had different testicular and epididymal expression pattern of androgen, LH and alpha estrogen receptors compared to young dogs. We were not able to detect the expression of beta estrogen receptor in canine testis and epididymis. Senile dogs had significant changes in epididymal sperm concentration, percentage of sperm defects, motility pattern, damage to plasma and acrosomal membranes, mitochondrial potential and activity and sperm chromatin condensation. In conclusion, senescence alters testicular artery blood flow and vascularization of the testis, without modifying testicular and epididymal biometry and echodensity. In addition, hormonal receptors (androgen, alpha estrogen and LH) were differentially expressed in aged dogs, influencing testicular and epididymal environment and, consequently, compromising spermatogenesis and sperm maturation throughout epididymides, leading to morpho-functional changes in canine sperm.

Biblioteca responsável: BR68.1