DETECÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE MICOPLASMAS HEMOTRÓPICOS E Coxiella burnetii EM MAMÍFEROS DA SUPERORDEM XENARTHRA NO BRASIL

RESUMO

Embora mamíferos da superordem Xenarthra sejam considerados hospedeiros de uma ampla gama de agentes zoonóticos, são raros os trabalhos que visam investigar o papel desses animais como hospedeiros de bactérias com potencial zoonótico. O presente estudo teve como objetivo investigar a ocorrência e caracterizar molecularmente o DNA de Coxiella burnetii e hemoplasma (micoplasmas hemotrópicos) em amostras de sangue e baço de 397 mamíferos Xenarthra de vida livre (233 preguiças, 107 tamanduás e 57 tatus) em cinco estados brasileiros (Mato Grosso do Sul, São Paulo, Pará, Rondônia e Rio Grande do Sul). Todas as amostras biológicas de Xenarthra foram negativas na qPCR para Coxiella burnetii com base no gene IS1111. A ausência de DNA de C. burnetii em amostras de sangue e baço de Xenarthra sugere que esses mamíferos podem não atuar como possíveis hospedeiros desse agente nas localidades estudadas. Quando realizados ensaios de PCR convencionais para o gene endógeno (gapdh) de mamífero, 386 amostras foram positivas. Quando triados por ensaios moleculares baseados no gene 16S rRNA de hemoplasmas, 81 amostras foram positivas, sendo 15,54% (60/386) positivas por PCR convencional e 5,44% (21/386) positivas por PCR em tempo real; três amostras foram positivas em ambos os ensaios. Destes, 39,74% (31/78) também foram positivos para o gene 23S rRNA e 7,69% (6/78) para o gene hemoplasma RNAse P. Entre as amostras positivas para hemoplasmas, 25,64% (20/78) foram obtidas de tamanduás, 39,74% (31/78) de preguiças e 34,61% (27/78) de tatus. Com base na baixa identidade e no posicionamento filogenético das sequências 16S rRNA e 23S rRNA de hemoplasmas detectados em tamanduás, tatus e preguiças, o presente estudo mostrou, pela primeira vez, a ocorrência de um novo putativo de Candidatus hemotrópico Mycoplasma spp. ('Candidatus Mycoplasma haematotetradactyla', 'Candidatus Mycoplasma haematomaximus' e 'Candidatus Mycoplasma haematotridactylus').

ABSTRACT

Although mammals of the superorder Xenarthra are considered hosts of a wide range of zoonotic agents, works aiming at investigating the role of these animals as hosts for bacteria with zoonotic potential are rare. The present study aimed to investigate the occurrence and molecularly characterize Coxiella burnetii and hemoplasma (hemotropic mycoplasmas) DNA in blood and spleen samples from 397 free-living Xenarthra mammals (233 sloths, 107 anteaters, and 57 armadillos) in five Brazilian states (Mato Grosso do Sul, São Paulo, Pará, Rondônia, and Rio Grande do Sul). All biological samples from Xenarthra were negative in the qPCR for Coxiella burnetii based on the IS1111 gene. The absence of C. burnetii DNA in blood and spleen samples from Xenarthra suggests that these mammals may not act as possible hosts for this agent in the locations studied. When performed conventional PCR assays for the endogenous (gapdh) mammalian gene, 386 samples were positive. When screened by molecular assays based on the 16S rRNA gene of hemoplasmas, 81 samples were positive, of which 15.54% (60/386) were positive by conventional PCR and 5.44% (21/386) were positive by real-time PCR; three samples were positive in both assays. Of these, 39.74% (31/78) were also positive for the 23S rRNA gene and 7.69% (6/78) for the hemoplasma RNAse P gene. Among the samples positive for hemoplasmas, 25.64% (20/78) were obtained from anteaters, 39.74% (31/78) from sloths, and 34.61% (27/78) from armadillos. Based on the low identity and phylogenetic positioning of 16S rRNA and 23S rRNA sequences of hemoplasmas detected in anteaters, armadillos and sloths, the present study showed, for the first time, the occurrence of putative new Candidatus hemotropic Mycoplasma spp. ('Candidatus Mycoplasma haematotetradactyla', 'Candidatus Mycoplasma haematomaximus', and 'Candidatus Mycoplasma haematotridactylus').