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MicroRNAs EM AMOSTRAS DE PLASMA E SORO DE FELINOS DOMÉSTICOS HÍGIDOS E COM DOENÇA DOS RINS POLICÍSTICOS

MARCELA CORREA SCALON.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-221882

Resumo

MicroRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs não codantes (ncRNA) que regulam a expressão gênica em um nível pós-transcricional, silenciando o RNA mensageiro alvo (mRNA). A doença renal policística (DRP), também conhecida como doença renal policística autossômica dominante (DRPAD), é uma condição geneticamente heterogênea caracterizada pela formação de cistos no parênquima renal. É a doença hereditária mais prevalente em gatos domésticos. Foi proposto que um único miRNA pode ter como alvo centenas de genes, e que um gene pode ser alvo de vários miRNAs. Essas partículas de RNA não codantes têm funções regulatórios importantes em muitos processos biológicos e podem induzir a cistogênese da DRP por influenciar vários genes alvos, bem como por regular diretamente a expressão do gene felino responsável pela codificação da proteína policistina-1 (PKD1). Neste trabalho foram quantificados e comparados cinco tipos de miRNAs (miR-20a, -192, -365, -15b-5p e -16-5p) em amostras de plasma e soro de felinos domésticos; esse tipo de amostra é fácil de trabalhar e possui potencial diagnóstico e 2 prognóstico. O protocolo padronizado de RT-rtPCR usou 100 L de amostras de plasma ou soro como fontes de moléculas de biomarcadores. No grupo controle, com dez amostras de animais hígidos, demonstrou-se que o soro fornece maiores quantidades de miRNA do que as amostras de plasma, com p <0,0001 para miR-20a e p <0,0002 para miR-16-5p. Tanto em animais hígidos quanto no grupo portador da mutação PKD1 (n = 9), a concentração de miRNA é maior no soro quando comparado ao plasma, com p = 0,0011 para miR-20a, e p = 0,0003 para miR-16-5p. O miR-20a sérico é mais expresso no grupo PKD com p < 0,005; a análise da curva Roc obteve uma área sob a curva (AUC) de 90,1%, e ponto de corte com sensibilidade de 77,8% e especificidade de 100%. Esses dados fornecem valiosas informações sobre a expressão de miRNA renal em amostragem de sangue periférico de felinos domésticos.
MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding RNAs (ncRNA) that regulate gene expression at a post-transcriptional level by silencing targeted messenger RNA (mRNA). Polycystic kidney disease (PKD), also known as autosomal-dominant polycystic disease (ADPKD) is a genetically heterogeneous condition characterized by cysts in renal parenchyma. It is the most prevalent inherited disease of domestic cats. It has been proposed that a single miRNA can target more than hundred genes and one gene can be target of several miRNAs. These non-coding RNA particles have important regulatory roles in a board range of biological processes, and they may induce PKD cytogenesis by affecting targets genes, as well as by directly regulating the expression of feline gene that is responsible for encoding polycystin-1 protein (PKD1). In this study we quantified and 3 compared the relative expression profile of five miRNAs (miR-20a, -192, -365, -15b-5p, and -16-5p) from plasma and serum samples of domestic felines; these types of samples are easy to handle and have diagnostic and prognostic potential. Our RT-rtPCR procedure used 100 L of either plasma or serum samples as sources of biomarker molecules. In ten samples of healthy cats on the control group, it was shown that the serum provided more miRNA than plasma samples, with a p < 0.0001 for miR-20a and p < 0.0002 for miR-16- 5p. Both in healthy animals and the PKD1 carrier group (n = 9), there are more miRNAs in serum when compared with plasma, with a p = 0,0011 for miR-20a and p = 0,0003 for miR-16-5p. Serum miR-20a is upregulated in PKD group with p < 0.005; Roc curve analysis showed an area under the curve (AUC) of 90,1%, with a cut-off value sensitivity of 77.8% and specificity of 100%. This data provides valuable information regarding renal miRNA expression in peripheral blood sampling of domestic felines
Biblioteca responsável: BR68.1