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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-221949

Resumo

Este estudo teve como objetivo avaliar a hemodinâmica placentária de éguas com gestações avançadas por meio da ultrassonografia Doppler espectral das artérias uterinas, mensuração da junção útero-placentária com ultrassonografia modo B, e análise morfológica e imunoexpressão de Ezrin da placenta pós-parto. Foram utilizadas 32 éguas da raça Mangalarga Marchador a partir de cinco meses de gestação, a fim de medir mensalmente a espessura da junção útero-placentária (JUP) e os índices espectrais com ultrassonografia Doppler das artérias uterinas direita e esquerda. Após o nascimento dos potros, as placentas coletadas foram analisadas quanto à morfologia. Foram coletados oito fragmentos de diferentes regiões da placenta e acondicionados em formol tamponado para avaliação microscópica e histomorfométrica dos fragmentos placentários e posteriormente a realiazação da técnica de imunohistoquímica para imunoexpressão do anticorpo anti-ezrin. Durante a gestação, o índice de pulsatilidade (IP) e o índice de resistência (IR) das artérias uterinas foram obtidos por ultrassonografia Doppler espectral, a JUP foi obtida mensalmente por ultrassonografia modo B. Na microscopia foram avaliadas as regiões dos cornos gravídicos e não gravídicos quanto à vascularização dos vasos fetais do alantocório e dos microcotilédones e foram contados os números de vasos em cinco campos de cada corno. Para histomorfometria foram contados cinco campos de vasos fetais da lâmina basal do corioalantoide e mensurada luz dos vasos em comprimento e largura em escala de micrômetro. Para classificação da imunoexpressão do anticorpo anti-ezrin nas amostras placentárias foram utilizados os parâmentros de intensidade de cor marrom nos microcotilédones, células trofoblásticas, lâmina basal e vasos do corioalantóide, bem como a distribuição focal ou difusa das marcações e região dos microcotilédones proximal, medial e distal da lâmina basal do alantocório. Os resultados foram separados por capítulos. A espessura uteroplacentária combinada correlacionou-se com o tempo gestacional de até 13 anos de idade, sendo a diferença significativa observada a partir do sexto mês. A JUP ficou dentro das medidas ideais para esta raça e para este período gestacional. Não houve correlação do JUP com o IP, porém foi observada uma correlação negativa e significativa do IR. O índice de resistência diferiu significativamente entre as faixas etárias, e o IR da artéria uterina esquerda tendeu a diminuir em todas as faixas etárias. Além disso, apenas o IR diferiu significativamente entre as medianas da idade gestacional. O PI esquerdo caiu nas éguas mais velhas. Na avaliação morfológica da placenta, não foram encontradas alterações significativas na macroscopia. Na análise microscópica da região do corno gravídico (CG) foi possível observar que o arranjo microcotiledonário se apresentou mais intenso ou equiparado ao corno não gravídico (CNG), com excessão de um caso. A intensidade de vascularização nos microcotilédones e no alantocório teve uma grande variação entre os cornos. Cinco casos apresentaram congestão nos microcotilédones e vasos fetais. A expressão do anticorpo anti-ezrin nos cornos placentários, foi mais intensa na região proximal dos microcotilédones em relação à lâmina basal do alantocório e apresentou-se difusa por toda rede de microcotilédones. O CG apresentou mais expressão nas células trofoblásticas em comparação ao CNG e entre os cornos a intensidade de cor ficou equiparada na maioria dos casos, apresentando coloração moderada e intensa. Na microscopia dos cornos não foi possível observar alterações significativas relacionadas a alguma patologia como necrose, infiltrados inflamatórios e hipoplasia. Não foram encontradas diferença significativa entre os dois cornos relacionados a número de vasos e intensidade de vascularização dos microcotilédones e alantocório. As medidas da luz dos vasos apresentaram igualdade estatística (p 0,05) entre os cornos. Assim, ocorreu um aumento da perfusão sanguínea nas artérias uterinas de éguas com gestações avançadas e entre diferentes categorias de idade durante o desenvolvimento fisiológico da placenta e do feto. Foi possível obter dados das características vasculares da unidade feto-placentária equina que não apresentaram alterações morfológicas. A expressão de ezrin foi bem signficativa nas células trofoblásticas localizadas nos microcotilédones de placentas equinas a termo que tem um papel importante na vascularização e consequentemente na troca materno-fetal. A aplicabilidade acompanhamento ultrassonográfico gestacional em equinos tem como principal objetivo prevenir a perda gestacional de alto valor comercial, com a mensuração do fluxo sanguíneo uterino em éguas predispostas a doenças vasculares e com história de aborto espontâneo e parto prematuro. Para um diagnóstico confiável na espécie, foi essencial obter dados de um padrão de normalidade de placentas saudáveis para comparar esses dados em futuras éguas com prenhez de alto risco, principalmente vascular, e escolher a intervenção clínica necessária.

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This study aimed to evaluate the placental hemodynamics of mares with advanced pregnancies by means of spectral Doppler ultrasonography of the uterine arteries, measurement of the uteroplacental junction with B-mode ultrasound, and morphological analysis and Ezrin immunoexpression of the postpartum placenta. Thirty-two Mangalarga Marchador mares from five months of gestation were used in order to measure monthly the combined uteroplacental thickness (CUPT) and the spectral indices with Doppler ultrasound of the right and left uterine arteries. After the foals were born, the collected placentas were analyzed for morphology. Eight fragments from different regions of the placenta were collected and placed in buffered formalin for microscopic and histomorphometric evaluation of the placental fragments and later the realization of the immunohistochemical technique for immunoexpression of the anti-ezrin antibody. During pregnancy, the pulsatility index (PI) and resistance index (RI) of the uterine arteries were obtained by spectral Doppler ultrasonography, the CUPT was obtained monthly by B-mode ultrasonography. Under microscopy, the regions of the pregnant and non-pregnant horns were evaluated as to the vascularization of the fetal vessels of the allantochorium and microcotyledons, and the number of vessels in five fields of each horn were counted. For histomorphometry, five fields of fetal vessels from the basal lamina of the chorioallantois were counted, and the vessel lumen were measured in length and width on a micrometer scale. To classify the immunoexpression of anti-ezrin antibody in placental samples, brown color intensity parameters were used in microcotyledons, trophoblast cells, basal lamina and chorioallantoic vessels, as well as focal or diffuse distribution of markings and proximal, medial microcotyledon region and distal from the basal lamina of the allantochorium. The results were separated by chapters. The CUPT was correlated with gestational time up to 13 years of age, with a significant difference observed from the sixth month onwards. CUPT was within the ideal measurements for this breed and for this gestational period. There was no correlation of CUPT with IP, but a negative and significant correlation of RI was observed. The resistance index differed significantly between age groups, and the left uterine artery RI tended to decrease in all age groups. Furthermore, only the RI differed significantly between the medians of gestational age. Left PI fell in older mares. In the morphological evaluation of the placenta, no significant changes were found in the macroscopy. In the microscopic analysis of the gravid horn region it was possible to observe that the microcotyledonary arrangement was more intense or similar to the non-pregnant horn, with the exception of one case. The intensity of vascularization in microcotyledons and allantochorion varied widely between horns. Five cases presented congestion in the microcotyledons and fetal vessels. In the expression of anti-ezrin antibody in placental horns, it was more intense in the proximal region of the microcotyledons in relation to the basal lamina of the allantochorion and it was diffused throughout the network of microcotyledons. Pregnant horn showed more expression in synciotrophoblasts compared to nonpregnant horn and among horns the color intensity was similar in most cases, with moderate and intense coloration. In the microscopy of the horns it was not possible to observe significant alterations related to any pathology such as necrosis, inflammatory infiltrates and hypoplasia. No significant difference was found between the two horns related to the number of vessels and vascularization intensity of microcotyledons and allantochorium. Vessel lumen measurements showed statistical equality (p 0.05) between the horns. Thus, there was an increase in blood perfusion in the uterine arteries of mares with advanced pregnancies and between different age categories during the physiological development of the placenta and fetus. It was possible to obtain data on the vascular characteristics of the equine fetus-placental unit that did not show morphological changes. The expression of ezrin was very significant in trophoblastic cells located in the microcotyledons of term equine placentas, which play an important role in vascularization and consequently in maternal-fetal exchange. The applicability of gestational ultrasound monitoring in horses aims to prevent pregnancy loss of high commercial value, with the measurement of uterine blood flow in mares predisposed to vascular diseases and with a history of miscarriage and premature birth. For a reliable diagnosis in the species, it was essential to obtain data from a normality pattern of healthy placentas to compare these data in future mares with high risk pregnancy, mainly vascular, and to choose the necessary clinical intervention.

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